RESUMO
Avaliou-se a reação em cadeia da polimerase (PCR) utilizando iniciadores que amplificam a região conservada do kDNA do mini-círculo mitocondrial de Leishmania spp. para o diagnóstico da leishmaniose visceral (LV) em sangue periférico. O limite de detecção foi de 4,5 atg de DNA total de Leishmania (Leishmania) chagasi (equivalente a 4,5x10-5 parasito). kDNA de Leishmania spp. foi detectado no sangue periférico de 47 entre 53 (89 por cento) pacientes portadores de LV. Não se detectou DNA de Leishmania spp. no sangue periférico de 15 voluntários não-expostos (Detection of circulating Leishmania chagasi DNA for thenon-invasive diagnosis of human infection, Trans Royal Soc. Trop. Med. Hyg, in press). A presença de DNA circulante de Leishmania spp. antes, durante e 61 a 259 dias após o tratamento da LV foi avaliada em 20 pacientes. Dezessete deles (85 por cento) apresentaram PCR positivo antes do tratamento. Em 16 (94 por cento) entre este 17 a DNA deixou de ser detectado até a primeira semana após o termino. Apenas uma paciente apresentou PCR positivo durante todo tempo de acompanhamento (259 dias), apesar de recuperação clínica completa (Clearance of circulating Leishmania kDNA after treatment of human visceral leishmaniasis,enviado para publicação). Um oligonucleotídeo Leishmania donovani complexo-específico e, complementar à uma seqüência interna da região conservada do mini-círculo, foidesenhado e utilizado como iniciador reverso adicional ao par de iniciadores que amplificam a região conservada, em ensaio ôPCR multiplexö. Os isolados de referência pertencentes ao complexo Leishmania donovani geraram os produtos complexo e gênero-específico, também identificados em sangue periférico de 20 pacientes com LV. Isolados de outros complexos apresentaram somente o produto gênero-específico (Single step multiplex-kDNA-PCR for detection of Leishmania donovani complex in human peripheral blood samples, enviado para publicação). É descrita a caracterização de L. (L.) chagasi isoladade lesão cutânea de um paciente portador de co-infecção Leishmania/HIV com manifestações viscerais e cutâneas, através de eletroforese enzímática e por análise de polimorfismos em fragmentos de DNA (Identification of Leishmania chagasi from skin in Leishmania/HIV co-infection: a case report (Rev. Soc. Bras. Med. Trop.35(3): 259-262, 2002).
Assuntos
Animais , Síndrome da Imunodeficiência Adquirida , DNA , Leishmania , Leishmaniose Visceral , Polimorfismo Genético/genética , Reação em Cadeia da Polimerase , Leishmania donovani , Leishmania infantum , PacientesRESUMO
In August/1999, a group of 14 adults from the staff of a private hospital in Contagem -- Minas Gerais State, Brazil, received unintentionally a 25 times concentrated dose of the 17-DD yellow fever vaccine (Bio-Manguinhos), due to a mistake at the reconstitution step. All patients were clinically and laboratorially evaluated at days 5, 13 and 35 post vaccination. Frequency of side effects and clinical observations of this group of individuals were not different from the observed in recipients immunized with normal doses of the vaccine. At the second and third evaluation none of the subjects reported symptoms. None of the patients presented abnormalities at the physical examination at none of the time points and in all cases the blood examination was normal, except for a reduced number of platelets that was detected in one subject at the first and second evaluation and reverted to normal at third evaluation. At the first evaluation point, 8 subjects were serum negative and 6 serum positive for yellow fever at the plaque reduction neutralization test. In 5 subjects the observed titre was 10 times higher as the baseline of 2.36 Log10 mUI/ml. The samples collected at second and third evaluation (13th and 35th days) demonstrated that all subjects responded to the vaccination with the exception of one that did not present a positive result in any of the samples collected. This evaluation confirms the safety of the 17-DD yellow fever vaccine