Avaliação imunoparasitológica de pacientes chagásicos submetidos ao tratamento específico e estudo da heterogeneidade genética de cepas de Trypanosoma cruzi isoladas de pacientes do Estado do Rio Grande do Sul / Imunoparasitológica evaluation of chagásicos patients submitted to the specific treatment and study of the genetic heterogeneidade of cepas of isolated Trypanosoma cruzi of patients of the State of the Rio Grande Do Sul

Duzentos e quarenta pacientes chagásicos crônicos de forma clínica indeterminada com idade de 17 a 53 anos, de ambos o sexos, provenientes de diferentes municípios do Estado do Rio Grande do Sul, foram submetidos à investigação sorológica (Imunofluorescência e ELISA), parasitológica e epidemiológica para infecção pelo Trypanosoma cruzi. Como controles foram utilizados 50 indivíduos não chagásicos. Os aspectos epidemiológicos foram avaliados através de questionário e o parasitológico através da hemocultura e da reação em cadeia da polimerase (PCR). A investigação epidemiológica mostrou que 211 (87,9 por cento) pacientes são procedentes de municípios do interior do estado e que a maioria é proveniente dos municípios de Dom Feliciano, Cachoeira do Sul, Santo Ângelo e São Gabriel. Cento e sessenta (66,7 por cento) pacientes possuem menos de cinco anos de escolaridade e 132 (55,0 por cento) referem contato prévio com triatomíneos em algum período da vida. Todos os pacientes foram IFI e ELISA positivos. Oitenta pacientes (33,3 por cento) apresentaram hemocultura positiva e 160 negativas. A PCR foi positiva em 208 (86,7 por cento) dos 240 pacientes. Oitenta pacientes com sorologia, hemocultura e PCR positivas foram tratados com Rochagan na dosagem de 5 mg/Kg/dia dividida em duas ou três vezes durante 60 dias. Todos eles negativaram e mantiveram as hemoculturas negativas durante os três anos de acompanhamento pós-tratamento. Setenta e seis pacientes mantiveram a sorologia positiva pós-tratamento embora com queda de dois a três títulos sorológicos. Nove (11,3 por cento) pacientes tratados negativaram a PCR após três anos de acompanhamento. Porém, só quatro pacientes negativaram a sorologia evidenciando cura

As oitenta cepas de T. cruzi isoladas dos pacientes com hemocultura positivas foram tipadas através dos genes do Mini-Exon e do RNA ribossomal (DNAr 24S alfa). Todas as 80 cepas apresentaram o padrão de TcII no gene de Mini-Exon. Por outro lado, 39 cepas (48,8 por cento) apresentaram perfil TcII e 41 (51,25 por cento) apresentaram perfil TcI para o gene de DNAr24S alfa. É descrita, pela primeira vez, uma não correlação entre 41 cepas tipadas pelo gene do Mini-Exon como TcII e pelo RNA ribossomal como TcI. Dessas 41 cepas, 23 (56,1 por cento) foram provenientes da Região Noroeste do Estado do Rio Grande do Sul. Chama-se a atenção que três dos quatro pacientes curados pertenciam a esse grupo. A caracterização das 80 cepas de T. cruzi com cinco iniciadores através de RAPD, mostrou grande heterogeneidade genética dos parasitos e uma correlação com os dois grupos definidos pelos genes do Mini-Exon e do DNAr24S alfa.

Characterization of Trypanosoma cruzi strains isolated from chronic chagasic patients, Triatomines and opossums naturally infected from the state of Rio Grande do Sul, Brazil

Thrity-five Trypanosoma cruzi strains were isolated from chronic chagasic triatomines and opossums from different municipalities of the State of Rio Grande do Sul. Parasites were characterized by means of mice infectivity, enzyme electrophoresis and randomly amplified polymorphic DNA (RAPD) analysis. Twenty-nine strains were isolated from chagasic patients, 4 from triatomines (2 from Triatoma infestans and 2 from Panstrongylus megistus) and 2 from opossums Didelphis albiventris. Thirty-three T. cruzi strains were of low and 2 strains of high virulence in mice. Both virulent strains were isolated from P. megistus. Isoenzyme analysis of the strains showed 3 different zymodemes. Eleven strains islolated from chagasic patients and 2 from D. albiventris were Z2. Eighteen strains from patients and 2 from T. infestans were ZB and 2 T. cruzi strains isolated from P. megistus were Z1. RAPD profiles obtained with 4 random primers showed a high genetic heterogeneity of T. cruzi strains. Zymodeme 2 and Zb strains were the more polymorphic. A band sharing analysis of the RAPD profiles of Z2 and ZB strains using 3 primers, showed a very low percentage of shared bands, 20 per cent among 13 ZB strains and 14 per cent among 13 Z2 strains. According to the isoenzyme results, 3 T. cruzi populations were present in State of Rio Grande do Sul. Zymodeme 2 and ZB strains were found infecting man (domiciliar transmission cycle) whereas Z1 strains were found infecting the sylvatic vector P. megistus.