Composição química e atividade antimicrobiana dos óleos essenciais das folhas e flores de Callistemon viminalis (sol. ex Gaertn.) G. Don ex. Loudon (Myrtaceae) / Chemical composition and antimicrobial activity of essential oils of leaves and flowers of Callistemon viminalis (sol. ex Gaertn.) G. Don ex. Loudon (Myrtaceae)

O presente trabalho teve como objetivo determinar a composição química e avaliar a atividade antimicrobiana dos óleos essenciais obtidos das folhas (frescas e secas) e flores da Callistemon viminalis. Os óleos essenciais foram analisados por CG/EM. A concentração inibitória mínima (CIM) foi determinada utilizando o método de microdiluição em caldo frente a bactérias Gram-positivas e Gram-negativas. De um total de 96,72%, 98,70% dos compostos identificados nos óleos essenciais foram monoterpenos. O 1,8-cineol foi o componente majoritário no óleo essencial das folhas frescas (70,43%), folhas secas (71,71%) e flores (42,39%), seguido do tricicleno com 12,97% nas folhas frescas, 8,20% nas folhas secas e 28,08% nas flores. A CIM para todos os micro-organismos testados foi ≥ a 2.000 μg/mL. Esse estudo é o primeiro relato sobre a composição química e atividade antimicrobiana do óleo essencial das flores de C. viminalis.

The aim of this study was to determine the chemical composition and the antimicrobial activity of essential oils of Callistemon viminalis leaves (fresh and dried) and flowers. The essential oils were analyzed by GC/MS and the minimum inhibitory concentration (MIC) against Gram-positive and Gram-negative bacteria was determined by the broth microdilution method. Between 96.72% and 98.70% of the compounds identified in the essential oils were monoterpenes. 1,8-Cineole was the major component in the essential oils of fresh leaves (70.43%), dried leaves (71.71%) and flowers (42.39%), followed by tricyclene: 12.97% in the fresh leaves, 8.20% in the dried leaves and 28.08% in the flowers. The MIC for all microorganisms tested was ≥ 2,000 μg/mL, for all the essential oil samples. This study is the first report on the chemical composition and antimicrobial activity of essential oil from the flowers of C. viminalis.

Composição química e atividade antimicrobiana do óleo essencial e anatomia foliar e caulinar de Citrus limettioides Tanaka (Rutaceae) / Chemical Composition and Antimicrobial Activity of Essential Oil and Anatomy of Citrus limettioides Tanaka(Rutaceae) Leaves and Stem

Citrus limettioides (Rutaceae) é utilizada popularmente para tratamento da sinusite, e também como antitérmica e hipotensora. Este trabalho teve como objetivos: identificar os constituintes dos óleos essenciais da folha e da casca dos frutos de C. limettioides; avaliar a atividade antimicrobiana dos óleos essenciais da folha e da casca dos frutos e realizar o estudo anatômico da folha e caule jovem. Os óleos essenciais foram obtidos por hidrodestilação em aparelho de Clevenger modificado e analisados por CG-EM. A concentração inibitória mínima (CIM) foi determinada utilizando o método de microdiluição em caldo frente a bactérias Gram-positivas, Gram-negativas e fungos. Para o estudo anatômico foram realizados cortes histológicos a mão livre e as secções foram coradas com azul de Alcian/safranina, reagente de Steinmetz, lugol e analisados em microscopia de luz. O linalol foi o componente majoritário no óleo essencial das folhas (36,88 a 45,15%) e o limoneno no óleo da casca dos frutos (70,60 a 75,18%). O óleo essencial das folhas apresentou CIM de 2000 μg/mL frente às bactérias e nenhuma atividade frente aos fungos. O óleo essencial da casca dos frutos não apresentou atividade antimicrobiana. A folha é hipoestomática, predominando os estômatos anomocíticos; o mesofilo é dorsiventral com parênquima paliçádico bisseriado e parênquima lacunoso com 11 camadas de células. Cavidades secretoras foram observadas no mesofilo da folha, no pecíolo e no caule, enquanto cristais prismáticos foram identificados em todas as estruturas da folha e do caule. Os dados obtidos no estudo microscópico podem auxiliar na identificação taxonômica desta planta e na avaliação da autenticidade da droga vegetal.

Citrus limettioides (Rutaceae), a sweet lime, is popularly used to treat sinusitis, and as an antipyretic and hypotensive agent.the aim of this study was to identify the constituents of the essential oils from the leaf and fruit peel of C. limettioides, test the antimicrobial activity of these essential oils and perform an anatomical study of the leaf and young stem. Essential oils were isolated by steam distillation in a modified Clevenger apparatus and analyzed by GC-MS. the minimum inhibitory concentrations (MIC) against Gram-positive and Gram-negative bacteria and fungi were determined by broth microdilution.Anatomical studies were performed on freehand histological sections, which were stained with Alcian blue / safranin, Steinmetz reagent and lugol and analyzed by light microscopy. Linalol was the major component in the leaf essential oil (36.88 to 45.15%) and limonene in the fruit peel essential oil (70.60 to 75.18%).the essential oil from leaves showed antimicrobial activity against bacteria (MIC 2000 μg/mL) and no activity against fungi.the essential oil from the fruit peel showed no antimicrobial activity. the leaf is hypostomatic with predominance of anomocytic stomata, the mesophyll is dorsiventral with biseriate palisade and 11 layers of spongy parenchyma cells.Secretory cavities were observed among the mesophyll cells of the leaf, petiole and stem, whilst prismatic crystals were identified in all structures of leaf and stem. the anatomical data obtained in the microscopic study may help in the taxonomic identification of this plant and to verify the authenticity of the drug plant.

Influence of environmental factors on the concentration of phenolic compounds in leaves of Lafoensia pacari

Lafoensia pacari A. St.-Hil., Lythraceae, a plant from the Cerrado known as pacari or dedaleiro, is widely used as an antipyretic, wound healing, anti-inflammatory, antidiarrheal and in the treatment of gastritis and cancer. Notable among the metabolite groups identified in leaves of L. pacari are the polyphenols, such as tannins and flavonoids, related to the pharmacological activities of pacari. Studies on the influence of environmental factors over production of major groups of secondary metabolites in pacari are important because they contribute data for its cultivation and harvest, and establish quantitative parameters of secondary metabolites in the plant drug. The objective of this study was to evaluate the influence of environmental factors on concentrations of phenolic metabolites in the leaves of L. pacari. Compounds quantified in the leaves were: total phenols, tannins by protein precipitation, hydrolysable tannins, total flavonoids, ellagic acid and mineral nutrients, while soil fertility was also analyzed, all over a period of one year. The data were analyzed using multivariate analysis, and the results suggest that metabolite concentrations in the leaves of this plant are influenced by seasonal factors, in particular the temperature and foliar micronutrients (Cu, Fe, Mn, Zn).

Molecular analysis and dimorphism of azole-susceptible and resistant Candida albicans isolates / Análise molecular e dimorfismo de isolados de Candida albicans suscetíveis e resistentes aos azólicos

INTRODUCTION: Candida albicans is responsible for superficial or systemic infections known as candidiasis, which may be found in infected tissue as unicellular budding yeasts, hyphae, or pseudohyphae. In this study, the effects of both fluconazole and itraconazole antifungal agents on the hyphal formation and genotypic characterization of C. albicans isolates classified as either susceptible or resistant were investigated. METHODS: The hyphal production of five C. albicans isolates under the action of antifungal agents was investigated by culturing yeast on growth medium and on hyphal induction medium. The genotypic characterization was carried out for 13 isolates of C. albicans using the random amplified polymorphic DNA-polymerase chain reaction (RAPD-PCR) method. RESULTS: The dimorphism analysis showed that the hyphal formation was higher in resistant than in the susceptible isolates to both azoles. The RAPD-PCR method identified the formation of two different groups. In group A, four resistant and two susceptible isolates were clustered, and in group B, one resistant and six susceptible isolates were clustered. CONCLUSIONS: Considering that hyphal formation was higher in resistant isolates in the presence of azole drugs, we confirmed that the hyphal production is closely related to susceptibility to azoles. These drugs may affect the morphogenesis of C. albicans depending on their susceptibility to these drugs. In relation to RAPD-PCR, most resistant isolates classified in group A and susceptible isolates in group B demonstrated that this method presented a similar standard between the two groups, suggesting that by this technique, a strong correlation between genotypes and fluconazole-resistant samples may be found.

INTRODUÇÃO: Candida albicans é responsável por infecções superficiais ou sistêmicas conhecidas como candidíase, encontrada em tecidos infectados na forma de leveduras brotantes unicelulares, hifas ou pseudohifas. Neste estudo, os efeitos de agentes antifúngicos como o fluconazol e o itraconazol sobre a formação de hifas e caracterização genotípica de isolados de C. albicans suscetíveis ou resistentes foram investigados. MÉTODOS: A produção de hifas de cinco isolados de C. albicans, sob a ação de antifúngicos foi investigada pelo cultivo da levedura em meios de crescimento e de indução de hifas. A caracterização genotípica foi realizada para 13 isolados de C. albicans pelo método de RAPD-PCR. RESULTADOS: A análise do dimorfismo mostrou que a formação de hifas foi maior nos isolados resistentes do que nos suscetíveis aos antifúngicos. O método de RAPD-PCR identificou a formação de dois diferentes grupos. No grupo A, foram agrupados quatro isolados resistentes e dois suscetíveis e no grupo B um resistente e seis suscetíveis. CONCLUSÕES: Considerando que a formação hifal foi maior em isolados resistentes na presença de azólicos, concluimos que a produção hifal está muito relacionada a suscetibilidade a estes fámacos. Estes antifúngicos podem alterar a morfologia de C. albicans em dependência da sua suscetibilidade. No método de RAPD-PCR, o encontro da maioria dos isolados resistentes classificados como pertencentes ao grupo A e suscetíveis ao grupo B demonstrou que este método apresentou um padrão semelhante entre os dois grupos, sugerindo que por este método pode ser detectado uma estreita correlação entre genótipos e amostras resistentes ao fluconazol.

More about the role of 2,6-dichlorophenol in tick courtship: identification and olfactometer bioassay in Amblyomma cajennense and Rhipicephalus sanguineus

This study aimed to identify 2,6-dichlorophenol (2,6-DCP) in Amblyomma cajennense and to evaluate its role in A. cajennense and Rhipicephalus sanguineus courtship. Hexanic extract from attractive females was purified by solid phase extraction and the phenol was identified by the single ion monitoring method using GC/MS. In an olfactometer, the responses of A. cajennense and R. sanguineus males to females, control rubber septa or rubber septa impregnated with 2,6-DCP at 50, 500, and 5000 ng, respectively, were studied. 2,6-DCP was identified in A. cajennense extract and the males oriented themselves toward the concentration of 500 ng. These septa and the females were recognized as copula partners. The septa treated with 2,6-DCP did not attract and were not even recognized by the R. sanguineus males, whereas the females were recognized. Due to the presence of 2,6-DCP in A. cajennense and the results of biological bioassays, it was concluded that this compound acts as an attractant and mounting sex pheromone in this tick, but it does not play any role in R. sanguineus courtship.

Determination of fluconazole in serum and amniotic fluid of rats by gas-chromatography/mass spectrometry (GC/MS)

Rats treated with oral dose of 100 mg/kg of fluconazole during pregnancy had their serum and amniotic fluid quantified for this drug using a GC/MS method. Fluconazole was extracted with ethyl acetate from samples and analysed by a GC-MS Shimadzu QP5050A system using a CBP-5 fused silica capillary column. Tioconazole was used as internal standard. Calibration curve was linear within the range 10.0 - 300.0 µg/mL. The limit of quantification was 0.1 µg/mL and no interference was observed in the blank serum and amniotic liquid. The mean concentrations of the drug in the serum and amniotic fluid were 206.01 ± 105.25 µg/mL and 125.34 ± µg/mL and 125.34 ± 65.24 µg/mL, respectively. This procedure showed to be sensitive and efficient enough for the use in teratogenic studies of fluconazole and other azole drugs

Ação do extrato hexânico de frutos maduros de Melia azedarach (Meliaceae) sobre Boophilus microplus (Acari: Ixodidae) em bezerros infestados artificialmente / Efficacy of Melia azedarach (Meliaceae) hexanic ripe fruit extract against Boophilus microplus (Acari: Ixodidae) on artificially infested calves

A eficácia de um extrato hexânico dos frutos de Melia azedarach foi avaliada em bezerros infestados artificialmente com Boophilus microplus. Os frutos foram submetidos ao processo de secagem e, depois de moídos, o extrato foi produzido em Soxhlet utilizando-se o hexano como extrator. Oito bezerros infestados artificialmente, cinco vezes a cada cinco dias com 2.500 larvas de B. microplus, foram divididos em dois grupos (tratado e controle) com base na infestação por carrapatos. No dia zero os animais foram banhados com 3 litros de uma solução a 0,25por cento do extrato em água e acetona (1,2 litro). Os animais do grupo controle foram banhados com o mesmo volume de água e acetona. Diariamente, as fêmeas ingurgitadas desprendidas naturalmente eram contadas e 40 eram incubadas para acompanhamento dos parâmetros reprodutivos. O número médio de fêmeas, o índice de conversão em ovos (peso da massa de ovos/ peso do grupo de fêmeas x 100) e o percentual de eclosão, obtidos nos dois grupos, foram comparados mediante o teste T de Student. Após 21 dias de contagens, o número médio de fêmeas ingurgitadas foi significativamente menor (P<0,05) no grupo tratado (188) do que no controle (247). Porém, a conversão e a eclodibilidade das larvas não foram afetadas pelo tratamento. Estes resultados indicam que houve interferência da planta no desenvolvimento do carrapato sobre os animais, mas não na sua reprodução. Comparados com a literatura, os resultados se revelaram promissores. No entanto, novos estudos nos quais se empregue uma formulação adequada em uma concentração mais elevada são necessários para se propor o uso desta planta no controle deste carrapato.

Antifungal activity from Ocimum gratissimum L. towards Cryptococcus neoformans

Cryptococcal infection had an increased incidence in last years due to the explosion of acquired immune deficiency syndrome epidemic and by using new and effective immunosuppressive agents. The currently antifungal therapies used such as amphotericin B, fluconazole, and itraconazole have certain limitations due to side effects and emergence of resistant strains. So, a permanent search to find new drugs for cryptococcosis treatment is essential. Ocimum gratissimum, plant known as alfavaca (Labiatae family), has been reported earlier with in vitro activity against some bacteria and dermatophytes. In our work, we study the in vitro activity of the ethanolic crude extract, ethyl acetate, hexane, and chloroformic fractions, essential oil, and eugenol of O. gratissimum using an agar dilution susceptibility method towards 25 isolates of Cryptococcus neoformans. All the extracts of O. gratissimum studied showed activity in vitro towards C. neoformans. Based on the minimal inhibitory concentration values the most significant results were obtained with chloroformic fraction and eugenol. It was observed that chloroformic fraction inhibited 23 isolates (92 percent) of C. neoformans at a concentration of 62.5 æg/ml and eugenol inhibited 4 isolates (16 percent) at a concentration of 0.9 æg/ml. This screening may be the basis for the study of O. gratissimum as a possible antifungal agent.

Atividade antifúngica de Caryocar brasiliensis (Caryocaraceae) sobre Cryptococcus neoformans / Antifungal activity of Caryocar brasiliensis (Caryocaraceae) against Cryptococcus neoformans

A grande incidência de criptococose em decorrência do aumento crescente de indivíduos imunodeprimidos e os efeitos colaterais aos fármacos utilizados para o tratamento desta infecçäo, tem incentivado a pesquisa de novos agentes antifúngicos. Através da técnica de diluiçäo em ágar, foi verificada a atividade antifúngica (in vitro) de diferentes constituintes de Caryocar brasiliensis sobre Cryptococcus neoformans. Verificou-se que a cera epicuticular retirada da folha, coletada em período de baixo índice pluviométrico (170,8mm de água), foi a parte mais ativa da planta, inibindo o crescimento de 91,3 por cento (21/23) dos isolados de Cryptococcus neoformans em concentraçäo <= a 250æg/mL

Antifungal properties of Brazilian cerrado plants

Ethanolic extracts from leaves of Hyptis ovalifolia, H. suaveolens, H. saxatilis, Hyptidendrum canum, Eugenia uniflora, E. dysenterica, Caryocar brasiliensis and Lafoensia pacari were investigated for their antifungal activity against dermatophytes. The most effective plants were H. ovalifolia and E. uniflora, while Trichophyton rubrum was the most sensitive among the four dermatophytes species evaluated. This study has demonstrated antifungal properties of Brazilian Cerrado plant extracts in in vitro assays

Açäo larvicida de extrato bruto etanólico de Magonia pubescens St.Hil. (tingui-do-cerrado), sobre o Aedes aegypti(Lin.) em laboratório / Larvicid action crude ethanol extract of Magonia pubescens St.Hil.(tingui-do-cerrado), on the Aedes aegypti(Lin.), dengue's main vector

Realizaram-se testes biológicos com extrato bruto etanólico (e.b.e.) de Magonia pubescens St. Hill., (tingui-do-cerrado)(Sapindaceae) para verificar a açäo larvicida sobre o Aedes aegypti(Lin.). Os extratos foram obtidos a partir de cada parte da planta: casca do caule, envoltório da semente e semente. Após ter sido coletado, o material foi dessecado em estufa de ar forçado a 40§C, moído, percolado em etanol por 10 dias, filtrado em papel filtro qualitativo, concentrado em evaporador rotativo e dessecado em pistola à vácuo. Após a obtençäo do e.b.e. de cada parte da planta, este foi dissolvido em água, em diferentes concentraçöes e testados com larvas de 4§ estádio de A.aegypti para determinar a DL50, que foi de 35, 55 e 150mg do e.b.e./100ml de água destilada, respectivamente, para semente, envoltório da semente e casca do caule. Cada experimento foi realizado com 20 frascos descartáveis, com capacidade para 30ml, com uma larva em cada um deles e observados por 24 horas. As larvas foram criadas em câmara biológica climatizada a 28ñ1§c, umidade relativa de 80ñ5(pôr cento) e fotofase de 12 horas. Os testes biológicos com os e.b.e. foram realizados em outra câmara, climatizada similarmente. Entre os experimentos realizados, os e.b.e. da semente e seu envoltório, mostraram-se mais eficientes larvicidas do que os e.b.e. da casca do caule