Perder o apetite. A recusa do outro como busca de si mesmo. Exemplos saharianos, japoneses e franceses / La pérdida del apetito y el rechazo del otro como búsqueda de si mismo. Ejemplos saharianos, japoneses y franceses / Losing one's appetite. Rejection of the other as a quest for oneself. Examples from the Sahara, Japan and France / Perdre l'appétit. Le refus de l'autre comme quête de soi. Exemples sahariens, japonais et français

Esta reflexão antropológica baseia-se em pesquisas realizadas com jovens de 13 a 25 anos de idade, que permanecem isolados no seu quarto. Sua imobilidade, que não se justifica por nenhuma deficiência física ou psicológica, questiona o lugar do corpo no momento da passagem para a vida adulta. Estes jovens expressam uma ausência de apetite do outro, que vai de mãos dadas com a abstinência sexual forçada pelo seu isolamento. A hipótese é que eles experimentam uma relação com seu corpo, sua identidade sexual -e sua sexualidade -assim como com a alimentação, comparável às adolescentes que sofrem de anorexia nervosa, mas ao contrário. Estes comportamentos questionam as relações de gênero e a distribuição de papéis dentro da família. Com base em entrevistas e observações, tanto em casa como nos centros de cuidados, este artigo mostra que estes corpos adolescentes, tornados invisíveis por confinamento ou magreza extrema, são paradoxalmente uma expressão ostensiva de despossessão de si. Um novo apetite é possível quando surge o desejo de diferenciação e permite-se novos encontros

Esta reflexión antropológica se basa en una investigación realizada con jóvenes, de 13 a 25 añosde edad, que están enclaustrados en su habitación. Su inmovilidad, que no se justifica por ningúna discapacidad física o psicológica, cuestiona el lugar del cuerpo en el momento del paso a la edad adulta. Estos jóvenes manifiestan una ausencia de apetito por los demás que va unida a la abstinencia sexual a la que les obliga su aislamiento. La hipótesis es que experimentan una relación con su cuerpo, su identidad sexual -y su sexualidad-así como con la comida, comparable a la de las adolescentes que sufren anorexia nerviosa, pero a la inversa. Estos comportamientos cuestionan las relaciones de género y el reparto de roles en la familia. Basándose en entrevistas y observaciones, tanto en el hogar como en los centros de atención, este artículo muestra que estos cuerpos adolescentes, invisibilizados por el confinamiento o la extrema delgadez, son paradójicamente una ostentosa expresión del desposeimieto de si. Un nuevo apetito es posible cuando surge el deseo de diferenciación y se permite nuevos encuentros

This anthropological reflection is based on research carried out with young boys, aged 13 to 25, who are cloistered in their room. Their immobility, which cannot be explained by any kind of physical or psychological disability, raises questions about the body's place at the time they are passing into adulthood. These young people express an absence of appetite for others that goes hand in hand with the sexual abstinence that their withdrawal forces them to have. The hypothesis is that they experience a relationship with their body, their sexual identity -and their sexuality -as well as with food, comparable to young girls suffering from anorexia nervosa but in reverse. These behaviours question gender relations and the distribution of roles within the family. Based on interviews and observations, both at home and in care facilities, this article shows that these adolescent bodies, made invisible by confinement or extreme thinness, are paradoxically an ostentatious expression of self-dispossession. A new appetite is possible when the desire for differentiation emerges and allows new encounters

Cette réflexion anthropologique s'appuie sur une recherche menée auprès de jeunes garçons, de 13 à 25 ans, cloîtrés dans leur chambre. Leur immobilité, que ne justifie aucun handicap physique ou psychique, interroge la place du corps au moment du passage à l'âge adulte. Ces jeunes expriment une absence d'appétit de l'autre qui va de pair avec l'abstinence sexuelle que leur retrait oblige. L'hypothèse émiseest qu'ils vivent un rapport au corps, à leur identité sexuelle -et à leur sexualité-ainsi qu'à l'alimentation, comparable aux jeunes filles souffrant d'anorexie mentale mais de manière inversée. Ces conduites interrogent les rapports de genre et la distribution des rôles au sein de la famille. À partir d'entretiens et d'observations, à domicile et dans des structures de soin, cet article montre que ces corps adolescents invisibilisés par l'enfermement ou l'extrême maigreur sont paradoxalement une expression ostentatoire d'une dépossession de soi. Un appétit nouveau est possible lorsque le désir de différenciation émerge et permet de nouvelles rencontres

Simple protocol for population (Sanger) sequencing for Zika virus genomic regions

BACKGROUND A number of Zika virus (ZIKV) sequences were obtained using Next-generation sequencing (NGS), a methodology widely applied in genetic diversity studies and virome discovery. However Sanger method is still a robust, affordable, rapid and specific tool to obtain valuable sequences. OBJECTIVE The aim of this study was to develop a simple and robust Sanger sequencing protocol targeting ZIKV relevant genetic regions, as envelope protein and nonstructural protein 5 (NS5). In addition, phylogenetic analysis of the ZIKV strains obtained using the present protocol and their comparison with previously published NGS sequences were also carried out. METHODS Six Vero cells isolates from serum and one urine sample were available to develop the procedure. Primer sets were designed in order to conduct a nested RT-PCR and a Sanger sequencing protocols. Bayesian analysis was used to infer phylogenetic relationships. FINDINGS Seven complete ZIKV envelope protein (1,571 kb) and six partial NS5 (0,798 Kb) were obtained using the protocol, with no amplification of NS5 gene from urine sample. Two NS5 sequences presented ambiguities at positions 495 and 196. Nucleotide analysis of a Sanger sequence and consensus sequence of previously NGS study revealed 100% identity. ZIKV strains described here clustered within the Asian lineage. MAIN CONCLUSIONS The present study provided a simple and low-cost Sanger protocol to sequence relevant genes of the ZIKV genome. The identity of Sanger generated sequences with published consensus NGS support the use of Sanger method for ZIKV population studies. The regions evaluated were able to provide robust phylogenetic signals and may be used to conduct molecular epidemiological studies and monitor viral evolution.

Genotype 1 of human parvovirus B19 in clinical cases / Genótipo 1 do parvovírus humano em casos clínicos

Summary Introduction: Virus surveillance strategies and genetic characterization of human parvovirus B19 (B19V) are important tools for regional and global control of viral outbreak. In São Paulo, Brazil, we performed a study of B19V by monitoring the spread of this virus, which is an infectious agent and could be mistakenly reported as a rash and other types of infection. Method: Serum samples were subjected to enzyme immunoassay, real time polymerase chain reaction, and sequencing. Results: From the 462 patients with suspected cases of exanthematic infections, the results of the 164 serum samples were positive for B19V immunoglobulin M. Among these cases, there were 38 patients with erythema infections and B19-associated with other infections such as encephalitis, hydrops fetalis, chronic anemia, hematological malignancies. These samples were sequenced and identified as genotype 1. Conclusion: This study showed patients with infections caused by B19V and sequencing genotype 1. Continuous monitoring is necessary to detect all known genotypes, and the emergence of new genotypes of these viruses for case management in public health control activities.

Resumo Introdução: Estratégias de vigilância para o parvovírus humano B19 e caracterização genética são ferramentas importantes para o controle regional e global do surto viral. Em São Paulo, Brasil, foi realizado um estudo de parvovírus B19, monitorando a disseminação desse vírus, que é um agente infeccioso e poderia ser erroneamente relatado como uma erupção cutânea e outros tipos de infecções. Método: As amostras de soro foram submetidas ao ensaio imunoenzimático, PCR quantitativo em tempo real e sequenciamento. Resultados: Dos 462 pacientes com casos suspeitos de infecções exantemáticas, os resultados das 164 amostras de soro foram positivos para parvovírus B19 imunoglobulina M. Entre eles, 38 pacientes com eritema infeccioso apresentaram B19 associado com outras infecções, como encefalite, hidropisia fetal, anemia crônica, doenças hematológicas malignas. Essas amostras foram sequenciadas e identificadas como genótipo 1. Conclusão: Os pacientes foram infectados com parvovírus B19 e apresentaram genótipo 1. Monitoração contínua é necessária para detectar todos os genótipos conhecidos e o surgimento de novos genótipos para o controle de casos em saúde pública.

Prenatal diagnosis of congenital rubella infection in São Paulo / Diagnóstico pré-natal de infecção congênita por rubéola, em São Paulo, Brasil

Objective: rubella during the early stages of pregnancy can lead to severe birth defects known as congenital rubella syndrome (CRS). Samples collected from pregnant women with symptoms and suspected of congenital rubella infection between 1996 and 2008 were analyzed. Methods: a total of 23 amniotic fluid samples, 16 fetal blood samples, 1 product of conception and 1 placenta were analyzed by serology and RT-PCR. Results: all patients presented positive serology for IgG / IgM antibodies to rubella virus. Among neonates, 16 were IgG-positive, 9 were IgM-positive and 4 were negative for both antibodies. Of the 25 samples analyzed in this study, 24 were positive by RT-PCR. Changes in ultrasound were found in 15 (60%) of 25 fetuses infected with rubella virus. Fetal death and miscarriage were reported in 10 (40%) of the 25 cases analyzed. The rubella virus was amplified by PCR in all fetuses with abnormal ultrasound compatible with rubella. Fetal death and abortion were reported in 10 of 25 cases analyzed. Conclusion: this study, based on primary maternal rubella infection definitely confirms the good sensitivity and specificity of RT-PCR using amniotic fluid and ultrasound. The results showed that molecular assays are important tools in the early diagnosis of rubella and congenital rubella syndrome. .

Objetivo: a rubéola, durante os primeiros estágios da gravidez, pode levar a graves defeitos congênitos, conhecidos como síndrome da rubéola congênita (SRC). Amostras de gestantes com sintomas e suspeitas da rubéola congênita foram coletadas entre 1996 e 2008. Métodos: um total de 23 amostras de fluido amniótico, 16 amostras de sangue fetal, um produto da concepção e uma placenta foram analisados por sorologia e PCR. Resultados: todas as gestantes apresentaram sorologia positiva para IgG/IgM para o vírus da rubéola. Entre os recém-nascidos, 14 apresentaram anticorpos IgG positivos e 11 foram os anticorpos IgM positivos. Das 25 amostras analisadas neste estudo, 24 eram positivas por RT-PCR. Alterações na ultrassonografia foram encontradas em 15 (60%) dos 25 fetos infectados com o vírus da rubéola. Morte fetal e aborto espontâneo foram reportados em 10 (40%) dos 25 casos analisados. O vírus da rubéola foi amplificado por PCR em todos os fetos que apresentaram alterações na ultrassonografia, compatíveis com a rubéola. Morte fetal e aborto foram relatados em 10 dos 25 casos analisados. Conclusão: os resultados mostraram que os ensaios moleculares são ferramentas importantes para o diagnóstico precoce da rubéola e da síndrome da rubéola congênita. .

Molecular analysis of rubella virus in travelers suspected of measles infection in São Paulo, Brazil / Análise molecular do vírus da rubéola em turistas suspeitos de infecção por sarampo em São Paulo, Brasil

OBJECTIVE: To identify measles virus genotypes in three cases of travelers suspected of measles infection. METHODS: Samples (blood and urine) were collected for serology, virus isolation, and genotyping. Sera were analyzed for IgM antibodies against measles virus and rubella virus by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) (Siemens - Marburg, Germany). Clinical samples (lymphocytes and urine) were inoculated into Statens Serum Institute rabbit corneal epithelial cell line- ATCC CL 60 (SIRC) and Vero Slam cells. RNA was extracted from clinical samples and cell culture was inoculated and processed by polymerase chain reaction (PCR) with oligonucleotides specific for measles virus (MV) and rubella virus (RV). RESULTS: All patients showed IgM negative serology for MV and positive IgM for RV. RV belonging to genotypes 1B, 1C, and 1E were isolated from patients who came from Finland, Peru, and Germany, respectively. Genotype 1B has been found in Europe and on the East Coast of South America; 1C has been found in Peru and the West Coast of South America, and 1E, first identified in 1997, now appears to have worldwide distribution. CONCLUSION: Information about RV and MV genotypes circulating in São Paulo is essential for the control of measles, rubella, and congenital rubella syndrome (CRS) in Brazil.

OBJETIVO: Identificar o genótipo do vírus do sarampo em três viajantes suspeitos de infecção por sarampo. MÉTODOS: Amostras (sangue e urina) foram coletadas para sorologia, isolamento viral e genotipagem. As sorologias para pesquisa de IgM para o vírus do sarampo e da rubéola foi realizada utilizando-se o kit de ELISA (Siemens - Marburg, Alemanha). As amostras clínicas (linfócito e urina) foram inoculadas na SIRC (Statens Serum Institute rabbit corneal epithelial cell line-ATCC CL 60) e nas células Vero Slam. O RNA foi extraído das amostras clínicas e das células inoculadas e processadas por PCR, utilizando oligonucleotideos específicos para sarampo e rubéola. RESULTADOS: Todos os pacientes apresentaram sorologia IgM negativa para sarampo e positivo para rubéola. Os vírus da rubéola isolados dos pacientes que vieram da Finlândia, Peru e Alemanha pertencem aos genótipos 1B, 1C e 1E, respectivamente. O genótipo 1B foi encontrado na Europa e na costa oriental da América do Sul, o genótipo 1C foi encontrado no Peru e na costa oeste da América do Sul e o genótipo 1E, identificado pela primeira vez em 1997, agora aparenta ser um genótipo com distribuição mundial. CONCLUSÃO: O conhecimento dos genótipos de sarampo e rubéola que circulam em São Paulo é essencial para o controle do sarampo, rubéola e síndrome da rubéola congênita.

Prevalência de fissuras orais no estado do Rio Grande do Norte, Brasil, entre 2000 e 2005 / Prevalence of oral clefts in the state of Rio Grande do Norte, Brazil, between 2000-2005

OBJETIVO: Analisar os aspectos epidemiológicos das fissuras orais em crianças nascidas entre 2000 e 2005 no Estado do Rio Grande do Norte, Brasil. MÉTODOS: Realizou-se um estudo transversal com dados obtidos do Sistema de Informações sobre Nascidos Vivos (Sinasc) disponibilizados pela Secretaria de Vigilância em Saúde do Ministério da Saúde. Descreveu-se a faixa etária da mãe, o tipo de fissura, o tipo de parto, o peso ao nascer, o sexo, a etnia da criança e as regionais de saúde. RESULTADOS: Nesse período, o número de nascidos vivos no Estado foi de 318.667, dos quais 155 possuíam algum tipo de fissura de lábio e/ou palato, representando uma prevalência de 0,49 casos/1.000 nascidos vivos. Ao se avaliar a prevalência nas oito regionais de saúde, Grande Natal (0,51), João Câmara (0,81) e Santa Cruz (0,67) ficaram um pouco acima da média do Estado. Entretanto, existiram municípios com valores discrepantes dessa frequência, como o de Maxaranguape, com uma prevalência de 3,52 casos/1.000 nascidos vivos e Serra do Mel, com 2,52 casos/1.000 nascidos vivos. O tipo mais frequente foi fenda labial com envolvimento palatino, e o sexo masculino foi o mais atingido. CONCLUSÕES: A prevalência das fissuras orofaciais foi baixa para o Estado. Destaca-se que alguns municípios merecem atenção devido à alta prevalência da malformação, havendo necessidade de estudos para compreender os potenciais riscos teratogênicos aos quais a mulher grávida pode estar exposta e que propiciam anomalias congênitas, tais como as fissuras labiopalatais.

OBJECTIVE: To analyze the epidemiological aspects of oral clefts in children born alive between 2000 and 2005 in the State of Rio Grande do Norte, Brazil. METHODS: Cross-sectional study with data obtained from Live Births System Data provided by the Department of Health Surveillance of the Ministry of Health. Data regarding mother's age, type of cleft, type of delivery, birth weight, gender, race and place of birth were analyzed. RESULTS: During the studied period, the number of live births in the state was 318,667, of which 155 had some kind of lip and/or palate cleft, with a prevalence of 0.49 cases/1,000 live births. When assessing the prevalence in the eight health regions, the metropolitan region of Natal (0.51), João Câmara (0.81) and Santa Cruz (0.67) presented ratios slightly above the average for the State. Some cities, however, presented very high prevalence of oral clefts such as Maxaranguape and Serra do Mel, with 3.52 and 2.52 cases/1,000 live births, respectively. The most prevalent type was cleft lip with involvement of the palate and males were most affected. CONCLUSIONS: The prevalence of oral cleft was low in the State, but some cities deserve attention due to the high prevalence of malformations. Further studies are needed in order to understand potential teratogenic risks to which the pregnant women may be exposed in such places, predisposing them to fetal congenital anomalies such as cleft lip and palate.

OBJETIVO: Analizar los aspectos epidemiológicos de las fisuras orales en niños nacidos entre 2000 y 2005 en el estado de Rio Grande do Norte, Brasil. MÉTODOS: Se realizó un estudio transversal con datos obtenidos del Sistema de Informaciones sobre Nacidos Vivos (SINASC) puesto a la disposición por la Secretaría de Vigilancia en Salud del Ministerio de Salud. Se describió la franja de edad de la madre, el tipo de fisura, el tipo de parto, el peso al nacer, el sexo, la etnia del niño y las regionales de salud. RESULTADOS: En este periodo, el número de nacidos vivos en el Estado fue de 318.667, de los que 155 poseían algún tipo de fisura de labio y/o paladar, representando una prevalencia de 0,49 casos por 1000 nacidos vivos. Al evaluar la prevalencia en las ocho regionales de salud, Grande Natal (0,51), João Câmara (0,81) y Santa Cruz (0,67) quedaron un poco por encima del promedio del Estado. Sin embargo, hubo municipios con valores discrepantes de esta frecuencia, como el municipio de Maxaranguape, con una prevalencia de 3,52 casos/1000 NV y Serra do Mel, con 2,52 casos/1000 NV. El tipo más frecuente fue la hendidura labial con implicación palatina y el sexo masculino fue el más afectado. CONCLUSIONES: la prevalencia de las fisuras orofaciales fue baja para el Estado. Se destaca que algunos municipios merecen atención debido a la alta prevalencia de la malformación, habiendo la necesidad de estudios para comprender los potenciales riesgos teratogénicos a los que la mujer embarazada puede estar expuesta, propiciando anomalías congénitas, tales como las fisuras labiopalatales.

Soroprevalência da rubéola na população urbana e rural de Guaratinguetá / Seroprevalence of rubella in urban and rural populations, Guaratinguetá

OBJETIVO: Determinar a prevalência de anticorpos para a rubéola na população de 15 a 39 anos no município de Guaratinguetá, São Paulo, SP. MÉTODOS: Neste estudo, 996 amostras foram colhidas após consentimento informado e esclarecido entre homens e mulheres na faixa etária de 15 a 39 anos. Os anticorpos da classe IgG foram detectados por ELISA usando kit comercial Rubenostika IgGII (Organon Teknika AS, Holland). As faixas etárias foram estratificadas em três categorias: 15-19 anos; 20-29 anos e 30-39 anos. As análises estatísticas foram realizadas pelo software MINITAB versão 14.0 (Minitab Inc, EUA). RESULTADOS: A proporção de soros reagentes para anticorpos da classe IgG nas faixas etárias estudadas foram: 92,7 por cento positivos de 15-19 anos; 82,4 por cento de 20 a 29 anos e 90,7 por cento de 30-39 anos com diferença significativa na proporção de soropositivos pela faixa etária ( p < 0,001 ). A variação de intensidade da resposta anticórpica foi calculada e os resultados mostram que há diferença significativa (p = 0,002) entre as médias das três faixas etárias estudadas. Em relação à área rural e urbana, a média da relação DO/CO para cada faixa etária, observa-se que há uma tendência significativa de médias menores na zona rural. O mesmo ocorre quando são calculadas as proporções de soropositivos. CONCLUSÃO: Os resultados obtidos mostraram que o percentual e indivíduos com anticorpos da classe IgG contra a rubéola na faixa etária de 20-29 anos foi abaixo aquela observada em faixas etárias inferiores ou superiores. Além disso, a diferença da soropositividade entre a zona urbana e rural traduz uma suscetibilidade com potencial de manter a circulação do vírus nesta região.

OBJECTIVE: To investigate seroprevalence of rubella antibodies in a 15 to 39 year old population in the municipal district of Guaratinguetá. METHODS: The 996 samples studied were collected in urban and rural zones, after informed and elucidated consent from men and women stratified by age (15 -39 years). Rubella IgG antibodies were detected by ELISA using the commercial kit Rubenostika IgGII (Organon Teknika THE, Holland). Age groups were stratified in 3 categories: 15-19; 20-29 and 30-39 years of age. Statistical analyses were accomplished with the software MINITAB version 14.0 (Minitab Inc, USA). RESULTS: The proportion of seropositives for antibodies of the IgG class were: 92.7. percent positive for 15-19 years; 82.4 percent for 20 to 29 years and 90.7 percent for 30-39 years, with a significant difference in the seropositive proportions by age group (p <0.001). Variation of intensity of antibody response was calculated and results show a significant difference (p = 0.002) between means of the 3 age groups studied. In relation to rural and urban zone average of the ratio DO/CO for each age group, a significant tendency towards a lower average was observed in the rural zone. The same was true when the seropositive proportions were calculated. CONCLUSION: Results showed that the percentage and individuals with antibodies of the IgG class against rubella in the 20-29 year age group was lower than that in the younger and older age groups. Furthermore, the difference between seropositivity in the urban and rural zones discloses susceptibility with a potential for continued circulation of the virus in this zone.

Detection of human parvovirus B19 in cases of hydrops fetalis in São Paulo, Brazil / Detecção de parvovírus humano B19 em casos de hydropsia fetal em São Paulo, Brasil

Human parvovirus B19 infection is known to be one of the causes of hydrops fetalis. The maternal infection caused by the virus may be symptomatic or asymptomatic. In this study, 40 pregnant women with gestational age of approximately 25 weeks, prenatal diagnosis of non immune hydrops fetalis and suspected of human parvovirus B19 infection were studied between January 1999 and December 2005. Serology results and detection of DNA in the maternal serum, foetal serum and amniotic fluid confirmed that 20 pregnant women had been infected by human parvovirus B19. The ultrasound examination demonstrated foetal hydrops, anaemia, hepatosplenomegaly, ascites, cardiopathy and amniotic fluid disorders. Among the positive cases, there were three fatal losses, one by miscarriage and two by intrauterine foetal death.

A infecção por parvovírus humano B19 é um dos responsáveis pela hidropsia fetal. A infecção materna causada pelo vírus pode ser sintomática ou assintomática. Neste estudo 40 mulheres com idade gestacional de aproximadamente 25 semanas, diagnóstico pré-natal de hidropsia fetal e suspeita de infecção por parvovírus humano B19 foram avaliadas durante o período de janeiro de 1999 a dezembro de 2005. Os resultados de sorologia e detecção de DNA no soro materno, fetal e fluido amniótico confirmaram 20 mulheres grávidas com infecção por parvovírus humano B19. A análise de ultra-som demonstrou hidropsia fetal, anemia, hepatosplenomegalia, ascite, cardiopatia e desordens amnióticas. Entre os casos positivos, ocorreram três perdas fetais: uma por aborto e duas por morte fetal intra-uterina.

Human vaccinia-like virus outbreaks in São Paulo and Goiás States, Brazil: virus detection, isolation and identification

A partir de outubro de 2001, o Instituto Adolfo Lutz tem recebido amostras de líquido vesicular e crostas de lesões de pele de pacientes das regiões do Vale do Paraíba, Estado de São Paulo e do Vale do São Patricio, Estado de Goiás. Os dados clínicos e epidemiológicos sugeriam que os surtos poderiam ser causados por Cowpox virus ou Vaccinia virus. A maioria dos pacientes era ordenhadores que tinham lesões vesicopustulares nas mãos, braços, antebraços e alguns na face. A análise por microscopia eletrônica direta (MED) detectou partículas com morfologia de vírus do gênero Orthopoxvirus em amostras de 49 (66,21%) pacientes dos 74 analisados. Os vírus foram isolados em membrana corioalantóide (MCA) de ovo embrionado de galinha e em linhagem celular Vero com confirmação por MED e PCR. Das 21 amostras de lesões submetidas ao PCR utilizando iniciadores para o gene da hemaglutinina (HA), 19 foram positivas. A digestão por enzima de restrição TaqI resultou em quatro fragmentos característicos de Vaccinia virus. A análise nucleotídica do seqüenciamento revelou que esses vírus apresentam 99,9% de similaridade com o Cantagalo virus, descrito como uma cepa de Vaccinia virus, havendo apenas alteração de um nucleotídeo na posição 616 com mudança de um aminoácido na proteína na posição 206. A análise filogenética mostrou que os isolados se agruparam junto aos Cantagalo virus, outras cepas de Vaccinia virus e Rabbitpox virus.

Isolation of the wild-type rubella virus in rabbit kidney cell line RC-IAL

O presente estudo descreve o isolamento e o crescimento do vírus selvagem da rubéola na linhagem celular RC-IAL. A susceptibilidade da linhagem celular RC-IAL (rim de coelho, Instituto Adolfo Lutz) para o vírus-padrão da rubéola RA 27/3 foi anteriormente descrito por nós(4). Amostras de 20 pacientes com suspeita de infecção por rubéola foram testadas por sorologia, isolamento viral e nested PCR. Os soros foram testados por Elisa para detecção de anticorpos reagentes para rubéola e nested PCR para detectar o RNA viral. As amostras clínicas de sangue, urina, fragmento de placenta e líquido amniótico foram inoculadas nas linhagens celulares RC-IAL (rim de coelho, Instituto Adolfo Lutz) e Sirc (córnea de coelho). O vírus da rubéola foi isolado das amostras clínicas de quatorze pacientes. O efeito citopático (ECP) foi examinado por microscopia de contraste de fase, e o RNA do vírus da rubéola foi amplificado por nested PCR. Os resultados obtidos mostram que a linhagem celular RC-IAL é um excelente substrato para isolamento do vírus da rubéola. Estes dados são importantes, pois poucas linhagens descritas na literatura apresentam efeito citopático que possibilite seu uso para isolar o vírus da rubéola de material clínico.

Infectivity of wild-type rubella virus in fibrochondrocyte cells

Este trabalho descreve o rápido crescimento do vírus da rubéola em amostras clínicas em cultura primária de fibrocondrócitos com desenvolvimento de efeito citopático em resposta a infecção pelo vírus da rubéola. As células foram isoladas do menisco do joelho do coelho após extração enzimática e incubadas a 37ºC em meio DMEM suplementado com 10 por cento de soro fetal bovino. Seis amostras clínicas de urina, sangue e liquor foram inoculadas na cultura primária de fibrocondrócitos e na linhagem Vero. As células de fibrocondrócitos apresentaram efeito citopático após 24 horas de incubação e o vírus foi detectado por imunoistoquímica e Nested PCR. As células infectadas apresentaram aspecto arredondado, com formação de alguns prolongamentos citoplasmáticos e sincícios, produzindo células multinucleadas. A curva de crescimento da infecciosidade do vírus foi mais alta quando comparada com a linhagem celular Vero.

Cultura primária de condrócitos articular humana em monocamada / Culture of human articular chondrocyte in monolayer

O objetivo deste trabalho foi padronizar a metodologia para obtenção de cultura primária de condrócitos de cartilagem hialina articular humana para sua utilização em transplante autólogo. Foram selecionados cinco pacientes do Instituto de Ortopedia e Traumatologia do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo (IOT-HC-FMUSP) sem doença degenerativa articular, com indicação de cirurgia artroscópica para correção de afecção do ligamento cruzado anterior do joelho. Os fragmentos de cartilagem articular pesando aproximadamente 300-500 mg foram colocados em placas de Petri contendo meio de Eagle modificado por Dulbecco's (DMEM) com 40ug/ml de gentamicina. Cada fragmento foi cortado e colocado em 2mg/ml de colagenase diluída em meio DMEM com 10 por cento de soro fetal bovino (SFB). As células foram isoladas e cultivadas em frasco de cultura T25 em meio DMEM suplementado com 10 por cento de SFB. As células aderiram ao frasco de cultura após 24h e após o 3º dia de cultivo as células apresentavam morfologia elipsóide e estrelada. As culturas foram fixadas e coradas intensamente com azul de toluidina sugerindo que as células iniciaram a síntese de uma nova matriz extracellular. A curva de crescimento mostrou que a razão de crescimento foi em torno do segundo e terceiro dia de cultivo, com a duplicação do número de células semeadas. As culturas apresentaram alta viabilidade celular após o congelamento celular em nitrogênio líquido

Sensitivity of rabbit fibrochondrocytes to mycoplasmas

Primary cell culture from rabbit meniscus (fibrochondrocytes-FcrC) was infected for 24 hours with different inocula (10² to 10(7) Colony Forming Units-CFU) of Mycoplasma hominis PG-21, M. pneumoniae FH and 1428 or M. arthritidis PG-6. The severity of the different obtained cytophatic effects-CPE was inoculum, Mycoplasma species and strain dependant. These bacteria were recovered from all infected FcrC and the SP4 medium for mycoplasmas also caused toxic effect on the FcrC. It was concluded that rabbit fibrochondrocytes were sensitive to mycoplasma infection, as well as to the SP4 mycoplasma medium

Rash after measles vaccination: laboratory analysis of cases reported in Säo Paulo, Brazil

OBJETIVO: O diagnóstico diferencial de doenças exantemáticas causadas por vírus é geralmente difícil, e equívocos näo säo raros, especialmente depois da introduçäo da vacina contra o sarampo e a rubéola. Um estudo laboratorial foi conduzido com o objetivo de estabelecer o diagnóstico etiológico de casos de exantema em crianças que receberam a vacina contra o sarampo. MÉTODOS: Soros de casos de exantema em crianças que receberam vacina contra o sarampo, em 1999, foram analisados para anticorpos IgM contra os vírus do sarampo, da rubéola e do parvovírus humano B19 (HPV B19), por técnicas comerciais de Elisa, e o herpes vírus humano tipo 6 (HHV 6), por técnica comercial de imunofluorecência. A viremia para cada um desses vírus foi testada pela reaçäo em cadeia da polimerase (PCR). RESULTADOS: Foram notificados, em 1999, 17 casos de crianças com exantema pós-vacinal. A idade das crianças era de nove a 12 meses (mediana, dez meses). Uma amostra de sangue colhida para investigaçäo laboratorial foi obtida para cada criança. O tempo decorrido entre a aplicaçäo da vacina e o aparecimento do exantema variou de um a 60 dias. Os resultados da sorologia das 17 crianças sugeriram o seguinte diagnóstico etiológico para o exantema: 17,6por cento (três em 17) infecçäo pelo HPV B19; 76,5por cento (13 em 17) infecçäo pelo HHV 6; 5,9por cento (um em 17) exantema originado pela vacina do sarampo. CONCLUSAO: Os resultados indicaram que a infecçäo pelo HPV B19 ou pelo HHV 6 pode ser diagnosticada como sarampo de origem vacinal. Portanto, é fundamental incluir esses vírus no diagnóstico laboratorial para corretamente apontar a etiologia das doenças exantemáticas, evitando, assim, atribuir à vacina do sarampo efeito colateral

Detection of rubella virus RNA in serum samples by RT-PCR assay / Detecçäo do RNA do vírus da rúbeola no soro através de RT-PCR

Em geral, a reaçäo de polimerizaçäo em cadeia precedida de retrotranscriçäo (RT-PCR) tem demonstrado ser um método rápido e sensível para detectar o RNA do vírus rubéola em uma variedade de materiais clínicos. A reaçäo de RT-PCR foi utilizada para detectar o vírus no soro e confirmar o teste sorológico em indivíduos infectados com vírus da rubéola. Para este estudo, uma fita simples de RNA viral, extraída do soro, foi usada como fita-molde para para a transcriçäo reversa, seguida da amplificaçäo com dois diferentes pares de olinucleotídeos iniciadores e de uma segunda amplificaçäo com outros pares de oligonucleotídeos. O método do RT-PCR foi utilizado para se examinar amostras de soro de nove pacientes com sorologia confirmada para o vírus da rubéola. Quatro soros testados por RT-PCR tiveram como resultado infecçäo pelo vírus da rubéola. Os soros foram primeiramente analisados utilizando-se de 500µl para a extraçäo de RNA. O vírus da rubéola foi também analisados utilizando-se 500µl para a extraçäo de RNA. O vírus da rubéola foi também analisado utilizando-se volumes menores de soro, e somente uma amostra foi amplificada a partir da extraçäo do RNA viral de 300µl. Neste estudo, a estratégia de se utilizar soro no desenvolvimento do teste RT-PCR sugere ser uma alternativa a mais para o diagnóstico da infecçäo pelo vírus da rubéola

RC-IAL cell line: sensitivy of rubella virus grow

Objetivo: Descreve-se o crescimento do vírus-padräo da rubéola RA-27/3 na linhagem celular RC-IAL, com desenvolvimento de efeito citopático em resposta à infecçäo viral. Para este propósito, o vírus-padräo foi titulado simultaneamente nas linhagens celulares Vero, SIRC e RK13. Métodos: O vírus-padräo da rubéola RA-27/3 foi inoculado na linhagem celular RC-IAL (rim de coelho, Instituto Adolfo Lutz). Placas contendo 1,5c105 células/ml foram inoculadas com 0,1ml do contendo 1x104 DICT50/0,1 ml. O efeito citopático correspondente a 25 por cento foi observado após 48h e 100 por cento após 96h. Os resultados obtidos foram comparados com o crescimento do vírus nas linhagens celulares SIRC, Vero e RK13. O vírus da rubéola na linhagem celular RC-IAL foi detectado por imuno-histoquímica. Resultados: As células inoculadas com o vírus da rubéola apresentaram efeito citopático nas primeiras 48h. As células apresentaram aspecto arredondado, com formaçäo de alguns prolongamentos citoplasmáticos e sincícios, produzindo células multinucleadas. A curva do crescimento da infectividade do vírus foi praticamente a mesma que a observada nas outras linhagens celulares. Conclusäo: Os resultados obtidos mostram que a linhagem celular RC-IAL é um ótimo substrato para crescimento do vírus da rubéola, pois poucas linhagens celulares descritas na literatura apresentam efeito citopático considerável e podem ser utilizadas para preparaçäo de antígenos e nos testes de diagnóstico sorológico para o vírus da rubéola

Comparaçäo de métodos para testar a citotoxicidade "in vitro" de materiais biocompatíveis / Comparison of methods to test an \"in vitro\" test of cytotoxicity of biocompatible hospital materials

Comparar a sensibilidade do método de difusäo em ágar e do método de extraçäo utilizando as linhagens celulares RC-IAL (células fibroblásticas de rim de coelho) e HeLa (células epiteliais de carcinoma do colo do útero humano), na avaliaçäo da citotoxidade "in vitro" de materiais de uso médico-hospitalar. Foram testadas 50 amostras escolhidas por sorteio, entre as já conhecidamente positivas e negativas e identificadas como: algodäo, espuma, borracha, latéx, celulose e acrílico. Além, das amostras citadas foram testadas experimentalmente várias concentraçöes de SDS (duodecil sulfato de sódio) nas culturas celulares RC-IAL e HeLa. Das 50 amostras testadas, 44 (88 por cento) foram positivas para os dois métodos. Mas quanto comparado o SDS nos dois métodos foram observados resultados positivos nas concentraçöes de 0,5 a 0,05 ug/ml no método de difusäo em ágar e no método de extraçäo somente foi observado efeito citotóxico até a concentraçäo de 0,25 ug/ml. Os resultados encontrados säo similares aos observados por outros autores que testaram materiais com, por exemplo, ligas metálicas. Quando foi usado o SDS observou-se, nas duas linhagens celulares, diferenças favoráveis ao método de difusäo em ágar em duas concentraçöes, isto é, a sensibilidade deste método foi significantemente maior, por inspecçäo, em relaçäo ao método de extraçäo, além de se constituir em método mais simples de ser realizado