Dengue: inquérito populacional para pesquisa de anticorpos e vigilância virológica no Município de Campinas, São Paulo, Brasil / Dengue: sero-epidemiological survey and virological surveillance in Campinas, Sao Paulo, Brazil

Estudou-se a epidemiologia do dengue no Município de Campinas, São Paulo, Brasil, por meio de um inquérito populacional aleatório realizado em 1998, visando à detecção dos níveis de anticorpos para dengue, e de dados de vigilância epidemiológica do período de 1996 a 2003, com ênfase na vigilância virológica. Foram coletadas 1.260 amostras, por meio de punção digital, utilizando-se papel de filtro, sendo as amostras testadas pelo teste imunoenzimático em culturas celulares infectadas (EIA-ICC). Observou-se que a prevalência de soro reagentes (14,79 por cento) é mais baixa que as encontradas em outros inquéritos realizados no país e superior às encontradas em dois inquéritos realizados em cidades do Estado de São Paulo. Detectou-se uma prevalência de soro reagentes muito superior à incidência de casos notificados e confirmados laboratorialmente durante as epidemias de 1996, 1997 e 1998. Não se encontrou proporcionalidade entre a prevalência de anticorpos para dengue e a incidência de casos durante a epidemia nos diferentes Distritos de Saúde da cidade. Sugerem-se um estudo aprofundado do significado dos indicadores de transmissão utilizados em epidemias e uma vigilância virológica mais intensa, principalmente em anos com níveis de transmissão baixos.

The epidemiology of dengue in the municipality of Campinas, São Paulo, Brazil, was studied in 1998 using a randomized sero-epidemiological survey. Epidemiological surveillance data from 1996-2003 were also analyzed, with an emphasis on virological surveillance. 1,260 individuals participated in the survey and had blood samples drawn by finger stick on filter paper. Blood samples were tested by EIA-ICC, an enzyme immunoassay using infected cells as antigen. Dengue antibody prevalence (14.79 percent) was lower than in other surveys in other States of Brazil, but higher than in two other serological surveys in São Paulo State. Dengue antibody prevalence was far higher than the reported case incidence during the 1996, 1997, and 1998 epidemics. Antibody prevalence and reported case incidence in different health districts were disproportional. The article concludes by recommending further research on the significance of transmission rates during epidemics and more intensive virological surveillance, especially in years with few reported cases.

Infective endocarditis (IE) first diagnosed at autopsy: analysis of 31 cases in Ribeiräo Preto, Brazil

Thirty one infective endocarditis (IE) fatal cases whose diagnosis was first obtained at autopsy were studied. The clinical data of these patients (Group 1) showed significant differences compared to other 141 IE cases (Group 2). The average age of 53 years in Group 1 patients was 18 years higher than that of Group 2. The Group 1 patients had a low frequency of IE predisposing heart disease. Both patient groups presented fever (about 87 percent), but a significant low frequency of cardiac murmur (25.8 percent) was observed in Group 1 patients and echocardiography tests were performed in only 16.1 percent, suggesting that IE diagnosis was not suspected. Likewise, although most Group 1 patients appeared with severe acute illness, they did not present the classic IE clinical presentation. Blood cultures were performed in only 64.5 percent of the Group 1 patients. However, bacteria were isolated in 70 percent of these blood cultures and Staphylococcus aureus was isolated in 71.4 percent. The bacteria attacked mitral and aortic valves. Complications such as embolizations and cardiac failure occurred in almost half of the cases and they also presented with infections of the lungs, urinary tract, and central nervous system. Medical procedures were performed in practically all fatal cases whose diagnosis was first obtained at autopsy. Sepsis occurred in about half of the patients and it was followed by shock in more than 25 percent. This form of IE must be suspected in mature and in old febrile hospitalized patients having infection predisposing diseases, embolization, and suffering medical procedures

Indução de retinite por citomegalovírus humano (HCMV), em coelhos imunossuprimidos / Retinitis induction by human cytomegalovirus in immunosupressed rabbits

A procura por novos esquemas terapêuticos para a retinite por HCMV levou pesquisadores à busca de um modelo animal para o estudo desta infecção. Em estudo anterior, não conseguimos nível adequado de imunossupressão com associação de Azathioprina e Prednisona em coelhos. Assim, optamos por utilizar a Ciclofosfamida em cinco coelhos da raça New Zealand, e injetamos HCMV no vítreo de ambos os olhos de cada um deles, em diferentes etapas do protocolo de imunossupressão. O períodos de seguimento foi de até 112 dias, avaliando-se alterações sistêmicas (peso, hemograma) e alterações oculares (através de oftalmoscopia binocular indireta e retinografia). Após o sacrifício dos animais, pesquisaram-se antígenos de HCMV em vítreo e retina. Encontrou-se importante perda de peso, hemograma não compatível com os sinais de imunossupressão, lesões retinianas e alterações vítreas inespecíficas (exsudatos e vitreíte com involução espontânea). Não foram detectados antígenos de HCMV nos Inprints de retinas e vítreos dos coelhos sacrificados. Desse modo, concluiu-se que, também com esse novo esquema de imunossupressão, o HCMV causa inflamação intra-ocular inespecífica. Portanto, a inoculação do HCMV, em coelhos, não determina modelo experimental para a retinite pelo CMV

Vírus brasileiros da família Bunyaviridae / Brazilian viruses in the family Bunyaviridae

Os vírus brasileiros da família Bunyaviridae säo vírus RNA, isolados principalmente na Regiäo Amazônica, pertencentes aos gêneros Bunyavirus, Hantavirus e Phlebovirus. A grande maioria destes vírus säo transmitidos por mosquitos e flebótomos, exceto os Hantavirus que têm transmissäo relacionada à inalaçäo de aerossóis dos excretas de roedores. A estrutura, a composiçäo e o mecanismo de replicaçäo dos Bunyaviridae säo brevemente revistos neste trabalho. Também, säo analisados aspectos epidemiológicos e clínicos das doenças causadas pelos seguintes Bunyaviridae brasileiros: Oropouche, Apeú, Caraparu, Marituba, Guaroa, Tacaiuma, Guamá, Maguari, Candiru e Hantavirus.

Hantavirus pulmonary syndrome (HPS) in Guariba, SP, Brazil: report of 2 cases

Casos de hantavirose foram notificados em diferentes regioes do Estado de Sao Paulo (SP), Brasil, durante o primeiro semestre de 1998. Dois casos fatais de sindrome pulmonar ocorreram em maio de 1998 na Cidade de Guariba, localizada na Regiao Nordeste de SP. Ambos os pacientes trabalhavam no mesmo local, estocando milho em um paiol infestado de roedores. Este pacientes, apos 2 ou 3 dias de doenca febril aguda inespecifica, desenvolveram uma grave pneumonia intersticial, que espalhou-se difusamente por ambos os pulmoes causando insuficiencia respiratoria e obito. A autopsia, ambos os casos apresentavam edema pulmonar intersticial com infiltrado de celulas mononucleares (imunoblastos) sugestivo de etiologia viral...

Patogenia das infecçöes pelos vírus do dengue / Pathogenesis of dengue virus infections

Neste trabalho de revisäo, analisam-se aspectos das infecçöes primárias e secundárias pelos vírus do dengue, ressaltando a resposta imune benéfica, que impede a reinfecçäo e a resposta imune que facilita a entrada dos vírus do dengue em macrófagos e que é parte importante no mecanismo fisiopatológico do dengue hemorrágico. Esta forma de dengue é conseqüência de uma anômala resposta imune, envolvendo leucócitos, citocinas e imunocomplexos, causando aumento da permeabilidade por má funçäo vascular endotelial, sem destruiçäo do endotélio, com extravasamento de líquidos para o interstício, causando queda da pressäo arterial e manifestaçöes hemorrágicas, associadas a trombocitopenia.

Vacinas contra o dengue / Dengue vaccines

O controle do dengue é feito, nos dias atuais, em todo o mundo, seguindo normas de combate aos mosquitos vetores preconizadas por sanitaristas do começo do século. O controle e a erradicaçäo do Aedes aegypti, vetor do dengue, é bastante difícil e necessita de grandes investimentos com funcionários, máquinas, venenos e campanhas educacionais permanentes. A alternativa ideal para o controle do dengue seria através do uso de vacinas. Neste trabalho de revisäo, analisam-se pesquisas para o desenvolvimento de vacinas contra dengue, incluindo: as do vírus vivo atenuado; as de engenharia genética (vacinas recombinantes) tendo abordagens relativas à expressäo de proteínas de dengue em células eucarióticas, aos vírus recombinantes, aos vírus mutantes ou quiméricos, e às vacinas com vetores vivos. Ainda, abordam-se as vacinas de DNA. Observa-se que as vacinas de vírus vivo e atenuado säo aquelas que têm as melhores perspectivas para serem utilizadas de forma generalizada, no controle do dengue, dentro de alguns anos.

Análise das seqüências de nucleotídios da regiäo 5' näo codificadora e dos genes das proteínas estruturais dos Flavivirus / Nucleotide sequence alignement of the 5' non coding and structural protein regions of the genome of Flaviviruses

Neste trabalho, analisaram-se comparativamente as seqüências de nucleotídios dos genes das proteínas estruturais C, prM e E de todos os Flavivirus, incluindo, também, a regiäo 5' näo codificadora, de 21 Flavivirus. Utilizou-se para a análise o programa de microcomputador DNAsis (Hitachi, Japäo) e construiu-se uma árvore filogenética, incluindo os vinte e um (21) vírus, após alinhamento de suas seqüências de nucleotídios. Na árvore filogenética obtida, observou-se uma ramificaçäo inicial, separando os vírus transmitidos por carrapatos daqueles transmitidos por mosquitos. Também, agruparam-se, em diferentes ramos, os vírus do dengue, os da febre amarela, e os da encefalite japonesa. Observou-se uma evidente relaçäo entre a árvore filogenética e os subgrupos e tipos virais, reconhecidos com base em relacionamento antigênico.

A simple reverse transcription-polymerase chain reaction for dengue type 2 virus identification

We show here a simplified reverse transcription-polymerase reaction (RT-PCR) for identification of dengue type 2 virus. Three dengue type 2 virus strains, isolated from Brazilian patients, and yellow fever vaccine 17DD, as a negative control, were used in this study. C6/36 cells were infected with the virus, and tissue culture fluids were collected after 7 days of infection period. The RT-PCR, a combination of RT and PCR done after a single addition of reagents in a single reation vessel was carried out following a digestion of virus with 1 per cent Nondet P-40. The 50 µl assay reaction mixture included 50 pmol of a dengue type 2 specific primer pair amplifying a 210 base pair sequence of the envelope protein gene, 0.1 mM of the four deoxynucleoside triphosphates, 7.5U of reverse transcriptase, and 1U of thermostable Taq DNA polymerase. The reagent mixture was incubated for 15 min at 37ºC for RT followed by a variable amount of cycles of two-step PCR amplification (92ºC for 60 sec, 53ºC for 60 sec) with slow temperature increment. The PCR products were subjected to 1.7 per cent agarose gel electrophoresis and visualized with UV light after gel incubation in ethidium bromide solution. DNA bands were observed after 25 and 30 cycles of PCR. Virus amount as low as 10².8 TCID 50/ml was detected by RT-PCR. Specific DNA amplification was observed with the three dengue type 2 strains. This assay has advantages compared to other RT-PCRs: it avoids laborious extraction of virus RNA; the combination of RT and PCR reduces assay time, facilitates the performance and reduces risk of contamination; the two-step PCR cycle produces a clear DNA amplification, saves assay time and simplifies the technique.

Condutas terapêuticas e de suporte no paciente com dengue hemorrágico / Therapeutics behavior and supportin patiente with hemorrhagic fever of dengue

Aborda o fluxo de atendimento do paciente com febre hemorrágica do dengue, quanto à relevancia da organizaçäo da rede de serviços de saúde.

Jatobal virus antigenic characterization by ELISA and neutralization test using EIA as indicator, on tissue culture

A caracterizaçäo antigênica do vírus Jatobal (BeAn 423380) foi efetuada utilizando uma técnica de ELISA para deteccäo de anticorpos que utiliza culturas celulares infectadas como antígeno e um micro teste de neutralizaçäo para vírus que utiliza o método imunoenzimático como auxiliar para a leitura dos resultados (NT-EIA). O vírus Jatobal foi caracterizado como um Bunyaviridae, gênero Bunyavirus, pertencente ao sorogrupo Simbu. A técnica de ELISA, utilizando culturas celulares infectadas como antígeno, trata-se de método sensível e confiável na identificaçäo de agentes virais, possuindo muitas vantagens sobre ELISA convencionais e outros testes: elimina a preparaçäo laboriosa de antígenos para o revestimento em fase sólida; permite que se teste de forma mais rápida e fácil que por CF, HAI e neutralizaçäo por reduçäo de plaques um grande número de antisoros de vírus. ELISA e NT-EIA podem ser utilizados para a classificaçäo de vírus que näo produzem efeito citopático e podem ser aplicáveis na identificaçäo de vírus que crescem em células oriundas de mosquitos