Seroprevalence and associated factors of infectious bovine rhinotracheitis and bovine viral diarrhea in dairy cows in the Caparaó region, Espírito Santo, Brazil / Soroprevalência e fatores associados à rinotraqueíte infecciosa bovina e diarreia viral bovina em vacas leiteiras na região do Caparaó, Espírito Santo, Brasil

ABSTRACT: This study evaluated the seroprevalence and associated factors of Infectious Bovine Rhinotracheitis (IBR) and Bovine Viral Diarrhea (BVD), and to analyze the possible relationship between IBR, BVD, and the occurrence of mastitis. For this purpose, 854 crossbred dairy cows were evaluated from 69 properties allocated in the 12 municipalities that make up the Caparaó region, Espírito Santo (ES), Brazil. The seroprevalence of IBR and BVD was determined using the indirect ELISA test. Associations between variables were estimated using the prevalence ratio (PR) with a 95% confidence interval. The chi-square test was used to verify the significance of the associations (P < 0.05). The average prevalence of IBR and BVD was 48.59% and 26.46%, respectively. Animals seroreactive for IBR were more likely to develop subclinical mastitis (P < 0.01; PR: 1.27), and cows that were seroreactive for BVD were more likely to develop clinical mastitis (P < 0.01; PR: 2.24). Mechanical milking was considered a factor associated with IBR (P < 0.01; PR: 1.36) and BVD (P < 0.01; PR: 1.25). Reproductive management by natural breeding was considered a factor associated with IBR (P < 0.01; PR: 1.22). Animals seroreactive for BVD were more likely to develop reproductive problems (P < 0.01; PR: 1.34). It was concluded that the agents that cause IBR and BVD are widely disseminated in dairy cattle herds in the municipalities of the Caparaó region, ES, Brazil. The presence of IBR and BVD increased the chances of cows developing subclinical mastitis and clinical mastitis, respectively, and the cows that were mechanically milked were more likely to be seroreactive for IBR and BVD.

RESUMO: O objetivo do presente estudo foi avaliar a soroprevalência e os fatores de risco associados à Rinotraqueíte Infecciosa Bovina (IBR) e Diarreia Viral Bovina (BVD), e analisar a possível relação entre IBR, BVD e à ocorrência de mastite. Para tanto, foram avaliadas 854 vacas leiteiras mestiças de 69 propriedades localizadas nos 12 municípios que compõem a região do Caparaó, Espírito Santo (ES), Brasil. A soroprevalência de IBR e BVD foram determinadas pelo teste ELISA indireto. As associações entre variáveis ​​foram estimadas pela razão de prevalência (PR) com intervalo de confiança de 95%. O teste do qui-quadrado foi utilizado para verificar a significância das associações (P < 0,05). A prevalência média de IBR e BVD foi de 48% e 26%, respectivamente. Os animais sororreagentes para IBR foram mais propensos a desenvolver mastite subclínica (P < 0,01; PR: 1,27), e as vacas sororreagentes para BVD foram mais propensas a desenvolver mastite clínica (P < 0,01; PR: 2,24). À ordenha mecânica foi considerada um fator associado a IBR (P < 0,01; PR: 1,36) e BVD (P < 0,01; PR: 1,25). O manejo reprodutivo por monta natural foi considerado um fator associado IBR (P < 0,01; PR: 1,22). Os animais sororreagentes para BVD foram mais propensos a desenvolverem problemas reprodutivos (P < 0,01; PR: 1,34). Concluiu-se que os agentes causadores de IBR e BVD estão amplamente disseminados em rebanhos leiteiros nos municípios da região de Caparaó, ES, Brasil. A presença de IBR e BVD aumentaram as chances das vacas desenvolverem mastite subclínica e mastite clínica, respectivamente, e as vacas que foram ordenhadas mecanicamente apresentaram maior probabilidade de serem sororreagente para IBR e BVD.

Acute-phase protein concentration in bronchoalveolar lavage fluid from healthy horses / Proteínas de fase aguda do lavado broncoalveolar de equinos hígidos

Bronchoalveolar lavage fluid (BALF) was analyzed to obtain information on leakage of acute-phase proteins from the blood into the respiratory lumen and about local synthesis. Ceruloplasmin, transferrin, albumin, α1-antitripsin, immunoglobulin G heavy, immunoglobulin G light, immunoglobulin A, haptoglobin, acidic glycoprotein, and P23 were measured in BALF from 30 horses without inflammatory disease by sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE). In serum, the same proteins were identified except for α1-antitrypsin. In conclusion, this study demonstrated that polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) can be used for the determination of acute-phase proteins in BALF samples from horses. In healthy horses, the values are very low, but they can be compared with reference values to assist in the diagnosis of animals with respiratory diseases.(AU)

O líquido obtido através da lavagem broncoalveolar (LBA) foi analisado para obter informações sobre as proteínas da fase aguda. Ceruloplasmina, transferrina, albumina, α1-antitripsina, imunoglobulina G pesada, imunoglobulina G leve, imunoglobulina A, haptoglobina, glicoproteína ácida e P23 foram medidas nos LBA de 30 cavalos sem doença inflamatória por eletroforese em gel de poliacrilamida com dodecilsulfato de sódio (SDS-PAGE). No soro, as mesmas proteínas foram identificadas, exceto a α1-antitripsina. Em conclusão, este estudo demonstra que a eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE) pode ser usada para a determinação de proteínas de fase aguda em amostras de LBA em cavalos. Em cavalos saudáveis, os valores são muito baixos, no entanto, podem ser comparados e auxiliar no diagnóstico de animais com doenças respiratórias.(AU)

ELISA of amyloid A in paired bronchoalveolar lavage fluid and serum samples of healthy horses / Detecção de amilóide A no lavado broncoalveolar de equinos hígidos

Pulmonary disorders are common in horses, and treatment efficiency depends on an adequate diagnosis. Amyloid A is the most sensitive indicator of pathology in horses. The objective of this study was to establish the concentration of amyloid A of bronchoalveolar lavage fluid (BALF) in healthy horses. Health condition of horses was considered normal based on physical examination, complete blood count, biochemical parameters, and BALF cytology. Blood and BALF were collected from thirty adult female horses. Amyloid A concentrations in serum and BALF were measured using commercial ELISA tests. Amyloid A was detected in serum (mean ± SD = 3.71±2.51) and BALF (mean ± SD = 0.000745±0.000785) of all horses. In conclusion, SAA can also be measured in bronchoalveolar fluid, affording early detection of respiratory infections or inflammatory conditions.(AU)

Distúrbios pulmonares são comuns nos cavalos e a eficiência do tratamento depende de um diagnóstico adequado e precoce. A amilóide A é um biomarcador sensível na deteccção de patologias inflamatórias e infecciososa em cavalos. O objetivo deste estudo foi estabelecer a concentração de amilóide A no líquido broncoalveolar (LBA) em cavalos saudáveis. Os cavalos foram considerados saudaveis baseado nos achados de normalidade do exame físico, hemograma, parâmetros bioquímicos e citologia do LBA. Sangue e LBA foram coletados de 30 fêmeas equinas adultas. Os níveis de Amilóide A no soro e no LBA foram mensurados por meio do teste de ELISA. A amilóide A foi detectada no soro (média ± DP = 3,71±2,51) e no LBA (média ± DP = 0,000745±0,000785) de todos os animais. Conclui-se que a amilóide A também pode ser mensurada no LBA, auxiliando no diagnóstico precoce de processos inflamatórios e infecciosos pulmonares.(AU)

Physical exercise on serum electrolytes and acid base balance in Mangalarga Marchador horses submitted to cavalcade of 4, 8 and 20km / Influência do exercício físico sobre o equilíbrio ácido base e hidroeletrolítico em cavalos da raça Mangalarga Marchado submetidos a provas de cavalgadas de 4, 8 e 20km

ABSTRACT: Acid-base and electrolyte disorders have been described in horses associated during and after exercise. The aim of the present study was to evaluate the effect of cavalcade competition on the acid-base and hydroelectrolytic balance in Mangalarga Marchador horses. For this purpose, 15 geldings, 6.2 ± 1.2 years old and clinically healthy, were distributed into three groups of five animals each. Horses were trained to take part in cavalcade competitions. Animals were submitted to cavalcade along 4km (G4), 8km (G8), and 20km (G20) at mean speeds of 15km h-1, 12km h-1, and 12km h-1, respectively. From each horse, venous blood samples were collected before exercise (T0) and immediately after (T1) cavalcade. Bicarbonate ion (HCO3-), pH, partial pressure of carbon dioxide (pCO2), partial pressure of oxygen (pO2), base excess (BE), hematocrit (Hct), sodium (Na+), potassium (K+), chloride (Cl-) and lactate were determined. The variables pH, pO2 and pCO2 were corrected in function of rectal temperature of each animal. Blood samples were analyzed for acid-base balance, as well as biochemical and electrolyte parameters using an i-STAT analyzer. Significant (P<0.05) increase in Hct, Na+, pH, HCO3 - and BE were observed after cavalcade in G20 group. Decrease (P<0.05) in K+ and Cl- were also observed in G20 animals after cavalcade (T1). Changes in the acid-base balance and hydroelectrolytic profile of the Mangalarga Marchador after cavalcade of 20km resulted in hypochloremic metabolic alkalosis. The 20km cavalcade induced significant hydroelectrolytic and acid-base imbalances in Mangalarga Marchador horses.

RESUMO: Distúrbios ácido-base e eletrolíticos têm sido descritos em cavalos durante e após diferentes modalidades de exercícios. Este estudo foi realizado com o objetivo de investigar o efeito do esforço físico de cavalgada sobre o equilíbrio ácido base e hidroeletrolítico de cavalos da raça Mangalarga Marchador. Quinze cavalos castrados com média de idade de 6.2±1.2 anos foram distribuídos em três grupos com 05 indivíduos cada. Os animais percorreram percursos de 4 (G4), 8 (G8) e 20 (G20) km de extensão os quais, foram realizados à velocidade média de 15km h-1, 12km h-1 e 12km h-1, respectivamente. Íon bicarbonato (HCO3 -), pH, pressão parcial de dióxido de carbono (pCO2), pressão parcial de oxigênio (pO2), excesso de bases (BE), hematócrito (Hct), sódio (Na+), potássio (K+), cloreto (Cl-) e lactato foram mensurados. As variáveis pH, pO2 e pCO2 foram corrigidas em função da temperatura corporal dos animais. De cada cavalo, amostras de sangue venoso foram coletadas antes do exercício (T0) e após o término da cavalgada (T1). As amostras foram analisadas através do i-STAT. Houve aumento (P<0,05) nos valores de Hct, Na+, pH, HCO3 - e BE nos animais do G20, após o término da cavalgada (T1). Após a cavalgada, os animais do G20 apresentaram ainda diminuição na concentração de K+ e de Cl-. As alterações no equilíbrio ácido-base e hidroeletrolítico pós-cavalgada de 20km resultou em alcalose metabólica hipoclorêmica. O esforço físico de cavalgada de 20km resultou em desequilíbrios hidroeletrolíticos e ácido-base significativos em cavalos da raça Mangalarga Marchador.

Proteinograma sérico e do líquido peritoneal de equinos submetidos à orquiectomia / Serum and peritoneal protein profile of horses subjected to orchiectomy

Avaliou-se a resposta de fase aguda através da determinação da concentração das proteínas de fase aguda (PFAs) no soro sanguíneo e no líquido peritoneal de dez equinos submetidos à orquiectomia. Foram colhidas amostras de sangue e líquido peritoneal antes do procedimento de orquiectomia (T0) e diariamente, até o sexto dia (T1-T6) pós-operatório. As PFAs foram separadas por eletroforese em gel de poliacrilamida contendo SDS-PAGE, e suas concentrações determinadas por densitometria computadorizada. Foram identificadas no soro e no líquido peritoneal, no pré e pós-operatório, as proteínas ceruloplasmina, transferrina, albumina, haptoglobina e α1-glicoproteína ácida. No pós-operatório, verificaram-se alterações nas concentrações séricas e peritoneais das PFAs, as quais foram associadas à resposta inflamatória desencadeada pelo trauma cirúrgico. A orquiectomia desencadeia reação inflamatória em equinos e o proteinograma pode ser utilizado para diagnosticar e monitorar complicações pós-operatórias.

The acute phase response was evaluated by determining the concentration of acute phase proteins (APP) in blood serum and peritoneal fluid in ten equines submitted to orchiectomy blood and peritoneal fluid samples were collected before the orchiectomy procedure (T0) and daily until the sixth postoperative day (T1-T6). The APPs were separated by electrophoresis on polyacrylamide gel containing SDS - PAGE and their concentrations were determined by computerized densitometry. There were identified in serum and peritoneal fluid, during pre and postoperative period, the acute phase proteins: ceruloplasmin, transferrin, albumin, haptoglobin and α1-acid glycoprotein. Postoperatively, there were changes in serum and peritoneal APPs, which were associated with the inflammatory response induced by surgical trauma. The orchiectomy triggers inflammatory reaction in equines and the proteinogram can be used to diagnose and monitor the postoperative complications.

Proteinograma do líquido sinovial de equinos hígidosobtido por eletroforese em gel de poliacrilamida / Proteinogram of synovial liquid from healthy equines determined by means of sodium dodecyl sulphate-polyacrylamide gel electrophoresis

O objetivo do presente trabalho foi determinar o proteinograma do líquido sinovial de quarenta equinos hígidos. Após colheita, centrifugação e fracionamento das amostras, as proteínas de fase aguda foram separadas por eletroforese em gel de poliacrilamida, contendo SDS-PAGE, e suas concentrações determinadas por densitometria computadorizada. Foram encontradas 16 a 26 proteínas no fracionamento eletroforético, compeso molecular variando de 16 a 238.000 Daltons (Da). Os pesos moleculares encontrados, correspondentes às proteínas mais conhecidas, foram albumina, 63.000Da; ceruloplasmina, 113.000Da; transferrina, 80.000Da; haptoglobina, 40.000Da; α-1-glicoproteínaácida, 37.000Da; IgA, 189.000Da e IgG, 74.000Da. O estabelecimento do proteinograma do líquido sinovial de equinos hígidos pode trazer contribuição significativa ao diagnóstico, tratamento e prognóstico de animais com alterações articulares.

The aim of this study was to determine the proteinogram of the proteins included in the synovial fluid of forty healthy horses. After collection, centrifugation and fractionation of the samples, the acute phase proteins were separated by electrophoresis in polyacrylamide gel containing SDS-PAGE, and their concentrations were determined by computerized densitometry. It was found 16 to 26 proteins on the electrophoretic fraction, with molecular weights from 16 to 238.000 Daltons (Da). The molecular weights found, corresponding to most known proteins were albumin, 63,000Da; ceruloplasmin, 113.000Da; transferrin, 80,000Da; haptoglobin, 40.000Da, α-1-acid glycoprotein, 37.000Da; IgA, IgG and 189.000Da, 74.000Da. The knowledge proteinogram of synovial fluid of healthy horses can bring significant contribution to the diagnosis, treatment and prognosis of animals with articular changes.

Proteinograma sérico e do líquido peritoneal de equinos hígidos e daqueles submetidos à obstrução intestinal experimental / Serum and peritoneal protein profile of healthy horses and horses subjected to experimental intestinal obstruction

Avaliou-se a resposta de fase aguda através da concentração das proteínas de fase aguda (PFA) no soro sanguíneo e no líquido peritoneal de vinte e um equinos, hígidos e submetidos à obstrução intestinal experimental, distribuídos em quatro grupos: obstrução de duodeno - GD (n=6), íleo - GI (n=6), cólon dorsal esquerdo - GM (n=6) e controle instrumentado - GC (n=3). Foram colhidas amostras de sangue e líquido peritoneal e, após centrifugação e fracionamento, as proteínas de fase aguda foram separadas por eletroforese em SDS-PAGE. Identificaram-se as proteínas IgA, ceruloplasmina, transferrina, albumina, IgG, haptoglobina, α1-glicoproteína ácida e P24, no soro e no líquido peritoneal. Houve aumento nas concentrações sérica e peritoneal de todas as PFA, sendo mais evidente no líquido peritoneal e nos animais obstruídos. O fracionamento eletroforético das PFA no líquido peritoneal é mais eficaz no diagnóstico de processos inflamatórios abdominais, quando comparado ao sérico.

It was evaluated the acute phase response over the concentration of acute phase proteins (APP) in serum and in peritoneal fluid of twenty-one healthy equines submitted to experimental intestinal obstruction distributed in groups: duodenal obstruction (GD), ileum obstruction (GI), left-dorsal colon (GM), and instrumentalized control (GC). Blood and peritoneal liquid samples were collected, after centrifugation and fractioning and the acute phase proteins were separated by electrophoresis in SDS-PAGE. The acute phase proteins (APP) identified were IgA, ceruloplasmin, transferrin, albumin, IgG, haptoglobin, α1-acid glycoprotein and P24, in the serum and liquid peritoneal. There was anincrease in the serum and peritoneal proteins concentrations evidencing a higher response of the APP from the peritoneal fluid and of the obstructed groups. The electrophoretic separation of the proteins included in the peritoneal liquid is more effective when compared to the serum concentration in the diagnosis of abdominal inflammatory processes.