Ketoconazol e intraconazol en el tratamiento de queratitis por Acanthamoeba en conejos (modelo experimental) / Ketoconazol and intraconazol in the Acanthamoeba keratitis treatment in rabbits (experimental model)

Se inoculó el estroma corneal de OD en 38 conejos con A. polyphaga, en cultivo axénico con 90 por ciento trofozoitos y 10 por ciento quistes, suspendidos en solución al 1 por ciento de fosfato de dexametasona, con 1.2 x 10 a la sexta/ml células, en 0.1 ml. El OI se uso como testigo. Se formaron tres lotes: Lote A (queratitis) de 14 conejos, con los que se observó el desarrollo de la queratitis con lámpara de hendidura, utilizando la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) y cultivos para A. polyphaga del tejido corneal a los 3, 9, 16, 24 y 37 días. Lote B (Ketoconazol) de 12 conejos; 6 con tratamiento por vía oral, 3 mg/kg dos veces al día y 6 con tratamiento tópico con suspensión al 2 por ciento en hidroxil metil propilcelulosa 4 veces al día. Lote C (itraconazol) de 12 conejos, 6 con tratamiento por vía oral con 1.5 mg/kg dos veces al día, y 6 conejos con tratamiento tópico con suspensión al 1 por ciento en hidroximetil propilcelulosa cuatro veces al día. En los lotes B y C se hicieron enucleaciones en tres conejos de cada vía usada a los 14 y 28 días de tratamiento buscando en el tejido corneal por PCR y por cultivo la presencia de A. polyphaga. En todas las corneas se hicieron cortes teñidos con hematoxilina-eosina para observar datos de inflamación. Resultados: No se observaron datos de inflamación importante en las primeras 96 h por la acción de la dexametasona: este aumentó a partir del cuarto día, y se observó en todos los conejos en diferentes grados, PCR fue positiva en 100 por ciento de lote A; 25 por ciento en el lote B y negativa en el lote C. Los cultivos para A. polyphaga fueron positivos en 42.8 por ciento en el lote A y negativos 100 por ciento en los lotes B y C. Los síntomas de inflamación disminuyen en los primeros 14 días de tratamiento con ketoconazol (lote B) e intraconazol (lote C), y PCR se hace negativa en el lote C desde el día 16

La reacción en cadena de la polimerasa una alternativa en niños con problema diagnóstico de giardiasis / Polymerasa chain reaction as an alternative in children with diagnostic problems in giardiasis

Introducción. El empleo de técnicas de biología molecular como la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) en el diagnóstico de la giardiasis intestinal es una alternativa en niños inmunocomprometidos o con dificultad diagnóstica por no presentar la sintomatología habitual. El propósito de este trabajo fue comparar el análisis coproparasitoscópico en serie de 3, con la PCR en las heces de niños asintomáticos. Material y métodos. Se colectaron las heces de 67 niños de 4 a 6 años de edad sin síntomas de giardiasis; con una parte se determinó la presencia de Giardia lamblia, por análisis coproparasitoscópico en serie de 3 y con la restante, se aisló en ADN por el método fenol-cloroformo. Se amplificó el ADN por la PCR empleando como primeros dos oligonucleótidos (+) 5'ACG-ACG-GTA-CTA-AGG-GCA-CGT-G3' y el (-)5'GTA-TCC-TGG-AGC-TCA-CGC-CTT-ACA-TG3'. La amplificación de 520 bp en un gel de agarosa al 1 por ciento que hibridó con la sonda obtenida del ADN de G. lamblia marcada con fluoresceina acoplada a anticuerpos antifluoresceina, se consideró como resultado positivo. Resultados. El análisis coproparasitoscópico fue positivo en 4 (5.97 por ciento) y la PCR en 8 (11.94 por ciento), por cálculo Bayesiano se obtuvo una especificidad del 100 por ciento y sensibilidad del 93 por ciento para la PCR. Conclusiones. La PCR aplicada al diagnóstico de giardiasis en las heces de niños asintomáticos es un método confiable y específico comparativamente con el análisis coproparasitoscópico en serie de 3, por lo que se sugiere emplearla como una alternativa en niños con problemas diagnósticos para esta parasitosis