Stenotrophomonas maltophilia interferes via the DSF-mediated quorum sensing system with Candida albicans filamentation and its planktonic and biofilm modes of growth / Stenotrophomonas maltophilia interfiere a través del sistema de "quorum sensing" mediado por DSF con la filamentación y el crecimiento planctónico y en biofilm de Candida albicans

Stenotrophomonas maltophilia is a nosocomial pathogen of increasing importance. S. maltophilia K279a genome encodes a diffusible signal factor (DSF) dependent quorum sensing (QS) system that was first identified in Xanthomonas campestris pv. campestris. DSF from X. campestris is a homologue of farnesoic acid, a Candida albicans QS signal which inhibits the yeast-to-hyphal shift. Here we describe the antagonistic effects of S. maltophilia on C. albicans on filamentation as well as on its planktonic and biofilm modes of growth. To determine the role of the DSF-mediated quorum sensing system in these effects, C. albicans ATCC 10231 and C. albicans tup1 mutant, locked in the filamentous form, were grown with K279a or with its rpfF deletion mutant (DSF-). A significant reduction in viable counts of C. albicans was observed in planktonic cocultures with K279a as well as in mixed biofilms. Furthermore, no viable cells of C. albicans tup1 were recovered from K279a mixed biofilms. Fungal viability was also assessed by labeling biofilms with SYTO 9 and propidium iodide. Confocal images showed that K279a can kill hyphae and also yeast cells. Light microscopic analysis showed that K279a severely affects hyphae integrity. On the other hand, the presence of K279a rpfF did not affect fungal morphology or viability. In conclusion, we report for the first time that S. maltophilia interferes with two key virulence factors of C. albicans, the yeast-to-hyphal transition and biofilm formation. DSF could be directly responsible for these effects or may induce the gene expression involved in antifungal activity.

Stenotrophomonas maltophilia es un patógeno nosocomial de importancia creciente. El genoma de S. maltophilia K279a codifica un factor de señalización difusible (DSF), autoinductor de "quorum sensing" (QS), identificado previamente en Xanthomonas campestris pv. campestris. El DSF de X. campestris es homólogo del ácido farnesoico, señal de QS de Candida albicans, que inhibe la transición levadura-hifa. En este trabajo se describe el efecto antagónico de S. maltophilia sobre la filamentación y el crecimiento planctónico y en biofilms de C. albicans. Para determinar la participación del sistema de QS mediado por el DSF en dichos efectos, C. albicans ATCC 10231 y la mutante C. albicans tup1, que solo crece en forma filamentosa, fueron cultivadas en presencia de K279a o de su mutante K279a rpfF (DSF-). Se observó una reducción significativa del número de viables de C. albicans en cultivos planctónicos y biofilms desarrollados en presencia de K279a. Es de señalar que no se recuperaron células viables de C. albicans tup1 a partir de biofilms mixtos en presencia de K279a. Las imágenes de microscopía confocal revelaron que K279a produce la muerte de hifas y levaduras en biofilms mixtos teñidos con ioduro de propidio y SYTO 9. El análisis por microscopía óptica mostró que K279a afecta la integridad de las hifas. En cambio, la presencia de K279a rpfF no afectó la morfología ni la viabilidad fúngica. En conclusión, informamos por primera vez que S. maltophilia interfiere con dos factores de virulencia de C. albicans, la transición levadura-hifa y la formación de biofilms. Estos efectos pueden ser mediados por el DSF en forma directa o a través de la inducción de genes involucrados en la actividad antifúngica.

Effect of (2, 6-0-Dimethyl) Beta-Cyclodextrin (heptakis) on cell mass, pertussis toxin and filamentous hemagglutinin production in three bordetella pertussis vaccinal strains

Estudou-se a produçäo de toxina pertussis (PT) e hemaglutininas filamentosas (FHA) para vacinas do vírus Bortella pertussis em cultura supernadante e em supernadante de células lavadas com soluçöes iônicas. O vírus cresceu em meio Stainer-Scholte (SS) e na modificaçäo chamou-se CL-basal (CL-b) e desse meio com heptakis (2,6-0-Dimethyl Beta-Cyclodextrin (MeBCD). FHA e PT foram estimados pelo total de hemaglutinaçäo, hemaglutinaçäo diferencial (com colesterol) e imunoensaio dot-blot. O meio CL-b decresce a produçäo de massa celular e também decresceria a estabilidade e liberaçäo de hemaglutininas. A adiçäo of MeBCD para SS ou meio CL-b estimularia a produçäo, exportaçäo e estabilidade de PT e FHA. Esses efeitos säo maiores para meio CL-b e mais importante para FHA. Esses efeitos säo maiores par meio CL-b e mais importante para FHA que para PT. Obteve-se resultados similares com a adiçäo de 0,5 ou 1g/l de MeBCD para CL-b. Cultura supernadante contém FHA e PT mas supernadantes de células em soluçäo única contém basicamente FHA e seeria usada para prover esse campo

Viabilidad de Bacillus subtilis auxotrofos en ausencia de sus metabolitos esenciales / Viability of Bacillus subtilis auxotrophs in the absence of their essential metabolites

Se estudió el efecto de la privación de triptofano y uracilo sobre la viabilidad del tansformante Bacillus subtilis BSA trp ura y de las cepas parentales Bacillus subtilis PB 168 trp-C y Bacillus subtilis PB 3308 ura. Los ensayos se llevaron a cabo en las condiciones descriptas para el desarrollo de competencia para transformación, durante 16 h. Los resultados obtenidos demostraron que Bacillus subtilis BSA 170 trp ura es resistente a la muerte por carencia de triptofano durante el tiempo del ensayo y a la muerte por carencia de uracilo durante 3h. Luego ocurre una disminución de la recuperación de UFC, acompañada por una reduccción de las absorbancias de los cultivos. La muerte por carencia de uracilo es prevenida en ausencia de triptofano, sugiriendo que reuiere síntesis de proteínas. Las cepas parentales mostraron un comportamiento semejante. Bacillus subtilis PB 168 trp-C mostró ser resistente a la muerte por carencia de triptofano y Bacillus subtilis PB 3308 uta sufrió una reducción de la capacidad para formar colonias, debida a la privación de uracilo, comparable a la de la cepa transformante

Viabilidad y multiplicación de Listeria monocytogenes cepa murray frente a antimicrobianos de uso en medios selectivos / Viability and multiplication of Listeria monocytogenes strain Murray facing antimicrobial agents used in selective media

Se han efectuado estudios comparativos de velocidad de crecimiento, cosecha máxima y duración de la fase de adaptación de poblaciones de Listeria monocytogenes (CCMA 29454, ATCC 15313) a 37-C, en medios de cultivo líquidos conteniendo concentraciones variables de antimicrobianos con diferente espectro de acción. Concentraciones de 160microng/ml de ácido nalidíxico, 80microng/ml de ácido pipemédico, 40microng/ml de ácido oxolínico, 0,8U/ml de bacitracina y 200U/ml de nistatina, constituyen límites confiables que permiten la sobrevivencia y multiplicación de Listeria monocytogenes y ejercen una importante acción inhibitoria sobre el crecimiento de gran parte de la flora habitual de materiales normalmente sépticos. Es de importancia la potencial capacidad selectiva de diversas asociaciones de los agentes ensayados en la formulación de medios de cultivo destinados a un enriquecimiento de Listeria monocytogenes, que posibilite su aislamiento a partir de cultivos mixtos