Persistence of experimental Rocio virus infection in the golden hamster (Mesocricetus auratus)

Rocio virus (ROCV) is an encephalitic flavivirus endemic to Brazil. Experimental flavivirus infections have previously demonstrated a persistent infection and, in this study, we investigated the persistence of ROCV infection in golden hamsters (Mesocricetus auratus). The hamsters were infected intraperitoneally with 9.8 LD50/0.02 mL of ROCV and later anaesthetised and sacrificed at various time points over a 120-day period to collect of blood, urine and organ samples. The viral titres were quantified by real-time-polymerase chain reaction (qRT-PCR). The specimens were used to infect Vero cells and ROCV antigens in the cells were detected by immunefluorescence assay. The levels of antibodies were determined by the haemagglutination inhibition technique. A histopathological examination was performed on the tissues by staining with haematoxylin-eosin and detecting viral antigens by immunohistochemistry (IHC). ROCV induced a strong immune response and was pathogenic in hamsters through neuroinvasion. ROCV was recovered from Vero cells exposed to samples from the viscera, brain, blood, serum and urine and was detected by qRT-PCR in the brain, liver and blood for three months after infection. ROCV induced histopathological changes and the expression of viral antigens, which were detected by IHC in the liver, kidney, lung and brain up to four months after infection. These findings show that ROCV is pathogenic to golden hamsters and has the capacity to cause persistent infection in animals after intraperitoneal infection.

Análise da expressão diferencial de genes em fibroblastos de pacientes com esclerose sistêmica / Differencial gene expression in fibroblasts of patients with systemic sclerosis

A esclerose sistêmica (ES) é uma doença sistêmica inflamatória de etiopatogênese desconhecida, caracterizada por alterações peculiares da microcirculação e extensa fibrose de pele e órgãos internos. A fibrose é a base de várias características clínicas desta doença, como a escleroderma, dismotilidade esofagiana e fibrose pulmonar intersticial. O processo envolve os fibroblastos que exibem fenótipo ativado com taxa de proliferação e de produção de matriz extracelular aumentadas. E este fenótipo ativado se mantém em cultura por várias passagens, e isso facilita o estudo da fibrose na ES. Nos últimos anos um grande progresso foi realizado na caracterização do perfil de expressão gênica de tecidos em situações específicas fisiológicas ou patológicas graças à técnica de microarray. Esta técnica propicia uma visão geral das moléculas que se apresentam estimuladas ou reprimidas para gerar o fenótipo em estudo. Com relação à ES e outras doenças auto-imunes, vários estudos foram realizados utilizando esta técnica, e assim, trazendo novos conhecimentos sobre os mecanismos moleculares das mesmas. Neste estudo nós utilizamos a técnica de microarray para analisar a expressão de aproximadamente 4000 genes em cultura de fibroblastos provenientes de pele comprometida e não comprometida de pacientes com ES. Nós encontramos que pele comprometida e não comprometida de pacientes com ES apresentavam perfil semelhante de expressão gênica para este painel de genes utilizado. Entretanto, comparando fibroblastos de pacientes com fibroblastos de controles sadios, o padrão de expressão era diferente. Sendo que, foram encontrados 329 genes diferentemente expressos entre pacientes e controles, 241 genes reprimidos e 88 estimulados. Entre os reprimidos podemos citar VG5Q, que é fator de angiogênese, MMP9, importante para o remodelamento da matriz extracelula e citocina IK, importante na regulação de expressão de MHC classe I. Entre os genes estimulados PSG1, que estimula resposta Th2, KIFC1, importante para o transporte entre retículo endoplamático e complexo de Golgi e ST A 1, que esta envolvido em adesão e proliferação celular.