Proteínas de la superficie y proteínas excretadas por trypanosoma cruzi y tripanosoma rangeli su importancia en el diagnóstico y la patogenia de la enfermedad de chagas / Surface proteins and excreted proteins by trypanosoma cruzi and trypanosoma rangeli: importance on the diagnosis and pathogenesis of chagas disease

Se aislan y se caracterizan los antigenos de la superficie y los antigenos excretados al medio de cultivo por T.cruzi y T.rangeli, cultivados entre 26§ y 34§C en medios químicamente definidos, donde estos parásitos crecen sin suplemento proteico alguno. T.cruzi muestra 25-30 proteínas en su superficie, siendo las más concentradas las de 107,95,80,77,55,49,47 kDa de peso molecular, no encontrándose variación en el patrón electroforético en SDA-acrimilamida en las distintas cepas, como tampoco a las diversas temperaturas de cultivo. T.rangeli presenta 10-11 proteínas en su superficie, siendo las de mayor concentración a 26§C las correspondientes a 115,106,88,63,50 y 38 kDa, mientras que a 30§C, estas mismas bandas más las correspondientes a 76,57 y 53 kDa predominan sobre las demás. T.cruzi excreta 2 proteínas, una con un peso molecular de 83 kDa y otra cuyo peso molecular abarca un rango de 64 a 76 kDa. La separación de estas proteínas por isoelectroenfoque permite visualizar 12 bandas proteícas con puntos isoeléctricos entre 4,72 y 5,51 con un mayor número de bandas a 34§C que a 26§C, siendo el patrón igual en todas las cepas estudiadas en este trabajo. Al separar las bandas de proteínas onservadas en el isoelectroenfoque madiante cromatografía en DEAE-Sephadex, se observaron 10-15 especies proteícas en cada fracción de la columna, locual permite concluir que el T. cruzi excreta entre 100-150 proteínas de puntos isoeléctricos diferentes. Los sueros de pacientes chagásicos poseen un grupo de anticuerpos que reconocen a las proteínas de superficie de T. cruzi y otros grupos de anticuerpos que reconocen a las proteínas..

Factores de crecimiento y diferenciación en varias cepas de leishmanias: desarrollo de medios de cultivo químicamente definidos / Growth factors and differentiations in several leishmania species: development of the culture medium chemically defined

Hemos desarrollado un medio de cultivo libre de proteinas y se contiene sales, glucosa, D-ribosa, 2-deoxyribosa, hemina, tricina, HEPES, 34 aminoácidos, 23 vitaminas, 6 nucleótidos y ácido tetrahidrofólico, donde 17 cepas de Leishmanias pertenecientes a 4 especies: brasiliensis, mexicana, donovani y garnhami crecen en forma continua a 26 grados C. Las distintas especies presentan una variabilidad muy grande en cuanto a requerimientos nutritivos se refiere, lo cual nos ha llevado a preparar medios minimos químicamente definidos para cada subespecie de Leishmania. La virulencia de los parasitos en estos medios se mantiene después de 30 pasajes en el medio definido. Los requimientos para la diferenciación en amastigotes también cambian según las especies de Leishmanias y varia en función de la temperatura del medio de cultivo así como del contenido proteico del mismo. Los péptidos trípticos obtenidos de la albúmina sérica bovina sustituyen al suero fetal bovino como factor de crecimiento entre 30-34 grados C