RT-PCR for confirmation of echovirus 30 isolated in Belém, Brazil

Echovirus (Echo) 30 or human enterovirus B is the most frequent enterovirus associated with meningitis cases. Epidemics and outbreaks of this disease caused by Echo 30 have occurred in several countries. In Brazil, Echo 30 has been isolated from sporadic cases and outbreaks that occurred mainly in the south and southeast regions. We used RT-PCR to examine Echo 30 isolates from meningitis cases detected from March 2002 to December 2003 in Belém, state of Pará, in northern Brazil. The patients were attended in a Basic Health Unit (State Health Secretary of Pará), where cerebrospinal fluid (CSF) was collected and stored in liquid nitrogen. Weekly visits were made by technicians from Evandro Chagas Institute to the health unit and samples were stored at -70°C in the laboratory until use. HEp-2 and RD cell lines were used for viral isolation and neutralization with specific antisera for viral identification. RNA extraction was made using Trizol reagent. The RT-PCR was made in one step, and the total mixture (50 æL) was composed of: RNA, reaction buffer, dNTP, primers, Rnase inhibitor, reverse transcriptase, Taq polymerase and water. The products were visualized in agarose gel stained with ethidium bromide, visualized under UV light. Among the 279 CSF samples examined, 30 (10.7 percent) were EV positive, 29 being Echo 30 and one was Cox B. Nineteen Echo 30 were examined with RT-PCR; 18 tested positive (762 and 494 base pairs). The use of this technique permitted viral identification in less time than usual, which benefits the patient and is of importance for public-health interventions.

Molecular and seroepidemiologic studies of Enterovirus 71 infection in the State of Pará, Brazil

Em muitos países, o Enterovírus 71 (EV-71) família Picornaviridae é associado a doença de pé-mão e boca e doenças neurológicas agudas enquanto que no Brasil esse vírus está mais associado às últimas. O objetivo desta pesquisa foi utilizar em estudos moleculares e soroepidemiológicos, o primeiro isolamento de EV-71 obtido na região norte do Brasil. No período de janeiro de 1998 a dezembro de 2000 foram coletadas 88 amostras (44 casos de PFA) de fezes das quais, duas (2,2%) foram positivas para EV-71 (73442/PA/99). A seqüência de nucleotídeos do gen que codifica a proteína VP1 mostrou que o isolado 73442/PA/99 foi similar às cepas de EV-71 pertencentes ao grupo B- mais próxima das norte americanas. Teste de neutralização com 389 amostras de soro colhidas no período de janeiro de 1998 a novembro de 2001, de indivíduos com idade de 0 a 15 anos residentes na cidade de Belém, Estado do Pará mostrou os seguintes resultados em relação ao isolado 73442/PA/99 e ao protótipo BrCr: 207 indivíduos (53,2%) tinham anticorpos neutralizantes para ambos os vírus, 167 (42,9%) não tinham anticorpos e 15 tinham anticorpos para um dos dois vírus. Somente 20,2% das crianças com idade de 0 a 3 anos tinham anticorpos neutralizantes para EV-71, indicando que essas crianças estavam mais suscetíveis à infecção. Tanto o estudo de soroprevalência quanto o de sequenciamento da VP1 foram importantes para demonstrar a propagação e o padrão molecular do EV-71 circulante na região norte do Brasil.

Human T-cell lymphotropic virus types I and II infections in a cohort of patients with neurological disorders in Belém, Pará, Brazil

Amostras de soro e/ou líquido céfalo-raquidiano (LCR) foram obtidas de 190 pacientes com quadro de doença neurológica crônica e progressiva, com vistas à detecção de anticorpos para os vírus linfotrópicos humanos de células T dos tipos I (HTLV-I) e II (HTLV-II), durante um período de seis anos (1996 a 2001) em Belém, Pará, Brasil. O grupo compreendia ambos os sexos (homens, 52 por cento), com idades variando de 2 a 79 anos (média, 35,9 anos). Tomando-se os resultados como um todo, 15 (7,9 por cento) indivíduos, incluindo 12 (80 por cento) mulheres adultas, apresentaram anticorpos para HTLV-I/II a partir da triagem pelo procedimento imunoenzimático (ELISA). Soros de 14 desses pacientes também foram testados utilizando-se procedimento de Western blot (WB), alcançando-se freqüências de anticorpos para HTLV-I, HTLV-II e dupla reação (HTLV-I e HTLV-II) em 10 (71,4 por cento), 3 (21,4 por cento) e 1 (7,2 por cento) indivíduos, respectivamente. As freqüências anuais de positividade para HTLV-I/II variaram de 2,6 por cento (2001) a 21,7 por cento (2000), em escala crescente no período de 1998 a 2000. Em conjunto, dificuldade na deambulação (n = 5 pacientes), espasticidade (n = 4) e hipotonia crural compreenderam 80 por cento das manifestações clínicas registradas entre os 15 pacientes cujas amostras de soro continham anticorpos para HTLV-I/II, com base em ELISA. Tais resultados oferecem indicadores quanto a uma possível associação do HTLV-I e do HTLV-II à gênese das mielopatias crônicas em Belém, norte do Brasil.

Síndrome da meningite asséptica por enterovírus e Leptospira sp em crianças de Salvador, Bahia / Aseptic meningitis syndrome due to enterovirus and Leptospira sp in children of Salvador, Bahia

Objetivando verificar a freqüência de enterovírus (EV), leptospiras e arbovírus como agentes causais da síndrome da meningite asséptica (SMA), em períodos näo-epidêmicos, e comparar os pacientes com e sem diagnóstico etiológico determinado, foram selecionados 112 pacientes de idade entre 3 meses e 15 anos, com suspeita clínica de SMA, referenciados para Hospital Couto Maia, especializado em Doenças Infecciosas e Parasitárias (Salvador, Bahia), Em 44,6 por cento (n=50) a etiologia foi determinada: enterovírus em 37,7 por cento (n=42) dos casos, pelo teste de PCR Amplicor, por cultura do líquor e/ou de fezes; a Leptospira sp. em 7,1 por cento (n=8), pelo método da micro-aglutinaçäo, e nenhum caso de arbovírus foi detectado (inibiçäo da hemaglutinaçäo passiva). Entre os 14 enterovírus dos 22 isolados, foram identificados seis diferentes sorotipos, sendo o Echovirus-4 predominante (27,2 por cento; 6/22) entre outros (Coxsackie B2, B3, B6 e B9; EV 71). Conclui-se que, os enterovírus foram os agentes mais freqüentes, e que a leptospirose deve ser lembrada no diagnóstico diferencial da SMA. Uma vez que as características clínicas e liquóricas dos pacientes dos grupos com e sem determinaçäo do agente etiológico foram semelhantes, pode-se supor que o diagnóstico presuntivo de SMA é de provável etiologia viral ou pela leptospira

Neutralizing antibodies to Enterovirus 71 in Belém, Brazil

Non-polio enteroviruses (Coxsackievirus A, Coxsackievirus B, Echovirus and EV 68-72) which belong to the enterovirus (EV) genus, Picornaviridae family, may be responsible for acute flaccid paralysis, aseptic meningitis, myocarditis, hepatitis, pleurodinia, neonatal sepsis, hand, foot and mouth disease (HFMD) even though 50-80 percent of infections are asymptomatic. EV 71 has been responsible for outbreaks and epidemics of HFMD and acute neurologic disease justifying its study in our country. The aim of this study was to detect neutralizing antibodies (NtAb) to EV 71 in individuals up to 15 years of age living in Belém, State of Pará, northern Brazil. Serum samples from 238 patients attending the Virology Sector of Evandro Chagas Institute in Belém, Brazil, were analyzed using microneutralization tests that included RD cells and BrCr strain. Overall 40.8 percent (97/238) of tested samples had NtAb to EV 71. Regarding the distribution per age group, 85.2 percent (92/108) of patients aged 0-3 years had no NtAb to this virus and 69.2 percent of those 12 to15 years of age were seropositive. These results confirm that EV 71 infection occurs in the city of Belém; and that a high rate of individuals in this study were infected aged 3 years and over and, when aged 15 years nearly 70 percent had EV 71 NtAb

Semilunar valvar stenosis associated with congenital rubella syndrome

We studied four children who were born with congenital rubella syndrome, in whom cardiac malformations including semilunar valvar stenosis were present. These children attended the pediatric cardiology unit of Hospital Fundacao Santa Casa de Misericordiórdia do Pará. The diagnosis was made clinically and by laboratory results. Specific anti-rubella antibodies IgM and IgG were measured using a capture-antibody enzyme immunoassay. Three patients presented with aortic stenosis associated with patient ductus arteriosus, and 1 patient had isolated pulmonary valvar stenosis. Rubella-specific IgM antibodies were detected in 3 of the 4 children and IgG antibodies in 1. We review the role of rubella virus as a teratogenic agent implicated in a pathogenesis of aortic and pulmonary valvar stenosis. These pathologic lesion are part of the diffuse ateriopathy that affects the fetus with rubella virus infection.

Enterovírus 70: o segundo surto de conjuntivite hemorrágica aguda em Belém, Pará, Brasil, 1984 / Enterovirus 70: second outbreak of acute hemorrhagic conjunctivitis in Belém, Pará, Brazil, 1984

Informaçöes de natureza epidemiológica, clínica e laboratorial sobre o segundo surto de conjuntivite hemorrágica aguda (CHA) ocorrido no período de três anos na cidade de Belém, Pará, Brasil, durante os meses de janeiro a abril de 1984. Foram atendidos 126 pacientes de ambos os sexos e colhidos especímes da conjuntiva, orofaringe e soro. Em 92 pares de soro foram realizados testes de neutralizaçäo para o enterovírus 70 (EV70) e fixaçäo do complemento para os adenovírus. Houve conversäo sorológica para o EV70 em 76,1% da amostra (70 pares). Näo foram constatadas evidências de comprometimento neurológico em pacientes de conjuntivite, durante ou após o surto

Conjuntivite hemorrágica aguda causada pela variante do coxsackievirus A24, em Belém, Pará, Brasil, 1987 / Acute hemorrhagic conjunctivitis caused by a variant of coxsackievirus A24, in Belém, Pará, Brazil, 1987

Durante um surto de conjuntivite hemorrágica aguda (CHA), ocorrido em Belém, Pará, Brasil, em 1987, foi feita investigaçäo etiológica clínica e laboratorial, atendidos 83 pacientes e colhidos espécimes da conjuntiva, orofaringe e soro. Na linhagem celular HEP-2 obteve-se 73 isolamentos de um enterovirus posteriormente identificado pelo Centers for Disease Control (CDC), Atlanta, Georgia, USA, como sendo uma variante do coxsackievirus A24. Em 56 pares de soro foram realizados testes de neutralizaçäo para o EV70 e para a cepa isolada, tendo havido 57%(32) de conversäo sorológica para essa última