Cytotoxic effect of Vernonanthura polyanthes leaves aqueous extracts / Efeito citotóxico do extrato aquoso de folhas de Vernonanthura polyanthes

Abstract Vernonanthura polyanthes, popularly known as assa-peixe, is a medicinal plant that has been widely used by Brazilian Cerrado population for treatment of diseases without a detailed evaluation of their effectiveness, toxicity, and proper dosage. Thus, more studies investigating the safety of V. polyanthes aqueous extract before the use are needed. The purpose of this study was to evaluate the toxicity, cytotoxicity and genotoxicity of V. polyanthes leaves aqueous extract using the Artemia salina and Allium cepa assays. For the A. salina assay, three groups of 10 larvae were exposed to V. polyanthes leaves aqueous extract at the concentrations of 5, 10, 20, 40, and 80 mg/ml. For the A. cepa assay, 5 onion bulbs were exposed to V. polyanthes leaves aqueous extract at 10, 20, and 40 mg/ml, and then submitted to macroscopic and microscopic analysis. As result it was identified a toxicity and cytotoxicity of V. polyanthes dependent on the extract concentration. The A. salina assay suggests that the concentration of 24 mg/ml of the V. polyanthes extract is able to kill 50% of naupllis; while the A. cepa assay suggests that V. polyanthes leaves aqueous extract is toxic at concentrations higher than 20 mg/ml; however the cytotoxic effect in A. cepa root cells was observed at 40 mg/ml of the extract. It is important to say that the V. polyanthes leaves aqueous extract concentration commonly used in popular medicine is 20 mg/ml. Thus, the popular concentration used is very close to toxicity limit in A. salina model (24 mg/ml) and is the concentration which showed toxic effect in A. cepa root cells (20 mg/ml). No genotoxic activity of V. polyantes leaves aqueous extract was observed in the conditions used in this study. Because of the antiproliferative action and no genotoxic activity, V. polyanthes leaves aqueous extract may present compounds with potential use for human medicine. However more detailed studies need to be performed to confirm this potential.

Resumo Vernonanthura polyanthes, popularmente conhecida como assa-peixe, é uma planta medicinal amplamente utilizada pela população brasileira do Cerrado para o tratamento doenças, sem uma avaliação detalhada de sua eficácia, toxicidade e dosagem adequada. Dessa forma, são necessários estudos para investigar a segurança do uso do extrato aquoso de V. polyanthes. O objetivo deste estudo foi avaliar a toxicidade, citotoxicidade e genotoxicidade do extrato aquoso de folhas de V. polyanthes utilizando os ensaios de Artemia salina e Allium cepa. Para o ensaio de A. salina, três grupos de 10 larvas foram expostos ao extrato aquoso de folhas de V. polyanthes nas concentrações de 5, 10, 20, 40 e 80 mg/ml. Para o ensaio de A. cepa, 5 bulbos de cebola foram expostas ao extrato aquoso de folhas de V. polyanthes nas concentrações de 10, 20 e 40 mg/ml, e então submetidos a análise macroscópica e microscópica. O ensaio de A. salina sugere que a concentração de 24 mg/ml do extrato de V. polyanthes é capaz de matar 50% dos náuplios; enquanto o ensaio de A. cepa sugere que o extrato aquoso das folhas de V. polyanthes é tóxico em concentrações superiores a 20 mg/ml. O efeito citotóxico nas células da raiz de A. cepa foi observado apenas na concentração de 40 mg/ml. É importante dizer que a concentração de extrato aquoso de folhas de V. polyanthes comumente usada na medicina popular é de 20 mg/ml. Assim, a concentração popular utilizada está muito próxima do limite de toxicidade no modelo de A. salina (24 mg/ml) e é a mesma concentração que apresentou efeito tóxico nas células da raiz de A. cepa (20 mg/ml). Não foi observada atividade genotóxica do extrato aquoso de folhas de V. polyantes nas condições utilizadas neste trabalho. Por causa da ação antiproliferativa e ausência de atividade genotóxica, o extrato aquoso de folhas de V. polyanthes pode ser uma boa fonte natural de compostos antitumorais e pode apresentar potencial para uso na medicina. No entanto, estudos mais detalhados precisam ser realizados para confirmar esse potencial.

Anti-inflammatory and antinociceptive effects of the isatin derivative (Z)-2-(5-chloro-2-oxoindolin-3-ylidene)-N-phenyl-hydrazinecarbothioamide in mice

Several isatin derivatives have shown important biological activities, which have attracted interest from researchers. For this reason, the present study aimed to evaluate the anti-inflammatory and antinociceptive effects of the isatin derivative (Z)-2-(5-chloro-2-oxoindolin-3-ylidene)-N-phenyl-hydrazinecarbothioamide (COPHCT) in mice. Three doses of this compound were tested: 1.0, 2.5, and 5.0 mg/kg. The anti-inflammatory activity was assessed using the carrageenan-induced paw edema model and the zymosan-induced air pouch model. The evaluation of the antinociceptive effect was performed through the formalin test and the acetic acid-induced abdominal writhing test. The paw edema assay demonstrated that all doses of the compound showed a significant reduction of the edema in the second hour evaluated, but a better response was observed in the fourth hour. The zymosan-induced air pouch model indicated that the compound, in all doses, significantly reduced leukocyte migration and total protein concentration levels. In the formalin test, the doses 1.0, 2.5, and 5.0 mg/kg of COPHCT showed activity only in the second phase, with reduction in paw pain time of 73.61, 79.46, and 73.85%, respectively. The number of abdominal writhings decreased with the increasing dose, but only 5.0 mg/kg COPHCT exhibited a significant response, with a reduction of 24.88%. These results demonstrated the ability of this compound to interfere in the anti-inflammatory activity of edema, vascular permeability, and cell migration. In addition, its possible antinociceptive effect may be related to the dose used.

Cytotoxic effect of Vernonanthura polyanthes leaves aqueous extracts

Abstract Vernonanthura polyanthes, popularly known as assa-peixe, is a medicinal plant that has been widely used by Brazilian Cerrado population for treatment of diseases without a detailed evaluation of their effectiveness, toxicity, and proper dosage. Thus, more studies investigating the safety of V. polyanthes aqueous extract before the use are needed. The purpose of this study was to evaluate the toxicity, cytotoxicity and genotoxicity of V. polyanthes leaves aqueous extract using the Artemia salina and Allium cepa assays. For the A. salina assay, three groups of 10 larvae were exposed to V. polyanthes leaves aqueous extract at the concentrations of 5, 10, 20, 40, and 80 mg/ml. For the A. cepa assay, 5 onion bulbs were exposed to V. polyanthes leaves aqueous extract at 10, 20, and 40 mg/ml, and then submitted to macroscopic and microscopic analysis. As result it was identified a toxicity and cytotoxicity of V. polyanthes dependent on the extract concentration. The A. salina assay suggests that the concentration of 24 mg/ml of the V. polyanthes extract is able to kill 50% of naupllis; while the A. cepa assay suggests that V. polyanthes leaves aqueous extract is toxic at concentrations higher than 20 mg/ml; however the cytotoxic effect in A. cepa root cells was observed at 40 mg/ml of the extract. It is important to say that the V. polyanthes leaves aqueous extract concentration commonly used in popular medicine is 20 mg/ml. Thus, the popular concentration used is very close to toxicity limit in A. salina model (24 mg/ml) and is the concentration which showed toxic effect in A. cepa root cells (20 mg/ml). No genotoxic activity of V. polyantes leaves aqueous extract was observed in the conditions used in this study. Because of the antiproliferative action and no genotoxic activity, V. polyanthes leaves aqueous extract may present compounds with potential use for human medicine. However more detailed studies need to be performed to confirm this potential.

Resumo Vernonanthura polyanthes, popularmente conhecida como assa-peixe, é uma planta medicinal amplamente utilizada pela população brasileira do Cerrado para o tratamento doenças, sem uma avaliação detalhada de sua eficácia, toxicidade e dosagem adequada. Dessa forma, são necessários estudos para investigar a segurança do uso do extrato aquoso de V. polyanthes. O objetivo deste estudo foi avaliar a toxicidade, citotoxicidade e genotoxicidade do extrato aquoso de folhas de V. polyanthes utilizando os ensaios de Artemia salina e Allium cepa. Para o ensaio de A. salina, três grupos de 10 larvas foram expostos ao extrato aquoso de folhas de V. polyanthes nas concentrações de 5, 10, 20, 40 e 80 mg/ml. Para o ensaio de A. cepa, 5 bulbos de cebola foram expostas ao extrato aquoso de folhas de V. polyanthes nas concentrações de 10, 20 e 40 mg/ml, e então submetidos a análise macroscópica e microscópica. O ensaio de A. salina sugere que a concentração de 24 mg/ml do extrato de V. polyanthes é capaz de matar 50% dos náuplios; enquanto o ensaio de A. cepa sugere que o extrato aquoso das folhas de V. polyanthes é tóxico em concentrações superiores a 20 mg/ml. O efeito citotóxico nas células da raiz de A. cepa foi observado apenas na concentração de 40 mg/ml. É importante dizer que a concentração de extrato aquoso de folhas de V. polyanthes comumente usada na medicina popular é de 20 mg/ml. Assim, a concentração popular utilizada está muito próxima do limite de toxicidade no modelo de A. salina (24 mg/ml) e é a mesma concentração que apresentou efeito tóxico nas células da raiz de A. cepa (20 mg/ml). Não foi observada atividade genotóxica do extrato aquoso de folhas de V. polyantes nas condições utilizadas neste trabalho. Por causa da ação antiproliferativa e ausência de atividade genotóxica, o extrato aquoso de folhas de V. polyanthes pode ser uma boa fonte natural de compostos antitumorais e pode apresentar potencial para uso na medicina. No entanto, estudos mais detalhados precisam ser realizados para confirmar esse potencial.

Avaliação da atividade larvicida do óleo essencial do Zingiber officinale Roscoe (gengibre) frente ao mosquito Aedes aegypti / Evaluation of the larvicidal effectof the essential oil of Zingiber officinale Roscoe (ginger) against the mosquito Aedes aegypti

RESUMO Este trabalho analisa o efeito larvicida do óleo Zingiber officinale Roscoe contra larvas em terceiro estágio do mosquito Aedes aegypti. Extraiu-se quantitativamente o óleo essencial por hidrodestilação e calculou-se a CL50 do óleo, a partir dos métodos de Reed-Muench e Pizzi, respectivamente. O óleo essencial obteve CL50 de 76,07 (±2,24) μg mL-1 e rendimento de 0,52% m/v. Os resultados indicam que o óleo essencial avaliado é composto por substâncias que propiciam efeito larvicida contra Aedes aegypti.

ABSTRACT This study analyzes the larvicidal effect of the oil of Zingiber officinale Roscoe against larvae in third stage of the mosquito Aedes aegypti (Linnaeus 1792). The essential oil was extracted quantitatively by hydrodistillation and we calculated the oil’s LC50 from Reed-Muench (1938) and Pizzi (1950) methods, respectively. The essential oil obtained LC50 of 76.07 (±2.24) ug mL-1, and yield of 0.52% m/v. The results indicate that the essential oil assessed has substances that provide larvicidal effect against Aedes aegypti.

Taxas de perda gestacional até 60 dias são afetadas por características cíclicas da égua receptora de embrião Mangalarga Marchador / Rates of pregnancy loss up to 60 days are affected by cyclic characteristics of the Mangalarga Marchador recipient mare

Foram avaliadas taxas de gestação aos 15 dias e perda gestacional entre 15 e 60 dias em 430 transferências de embrião (TE) em éguas Mangalarga Marchador. Diagnósticos de gestação foram realizados entre 15 e 60 dias após TE. Para avaliar os efeitos da duração da fase folicular da receptora, foram formados três grupos: até três dias (<3d); quatro a seis dias (4-6d); sete ou mais dias (>7d). Para avaliar os efeitos do tamanho do folículo pré-ovulatório da receptora, foram formados outros três grupos: menor ou igual a 35mm (Ø<35); maior que 35 e menor ou igual a 45mm (35<Ø<45); maior que 45mm (Ø>45). Os grupos foram comparados pelo teste qui-quadrado (P<0,05). Quanto à duração da fase folicular, as taxas de gestação foram semelhantes (<3d - 83,1%; 4-6d - 86,4%; >d - 86,0%), e a perda gestacional maior em >7d (24,4%) que em <3d(12,0%) e 4-6d (13,3%), estas semelhantes entre si. Quanto ao tamanho folicular, as taxas de gestação foram semelhantes (Ø<35 - 86,4%; 35<Ø<45 - 86,5%; Ø>45 - 81,9%), assim como as de perda gestacional (Ø<35 - 13,2%; 35<Ø<45 - 18,1%; Ø>45 - 10,5%). Razões para a maior perda gestacional no grupo >7dnão foram esclarecidas, mas conclui-se que a duração da fase folicular pode ser fator de escolha de receptoras.

Pregnancy rates were evaluated at 15 days and pregnancy loss between 15 and 60 days on 430 embryo transfers (ET) in Mangalarga Marchador mares. Pregnancy diagnosis was performed between 15 and 60 days after ET. To evaluate the effects of the duration of the follicular phase of the recipient mare, three groups were formed: up to 3 days (<3d); 4 to 6 days (4-6d); 7 or more days (>7d). To evaluate the effects of the size of the pre-ovulatory follicle of the recipient mare, three other groups were formed: below or equal to 35mm (Ø<35); greater than 35 and below or equal to 45mm (35<Ø<45); greater than 45mm (Ø>45). The groups were compared by Chi-square test (P<0.05). Regarding the duration of the follicular phase, pregnancy rates were similar (<3d - 83.1%; 4-6d - 86.4%; >7d - 86.0%), and greater pregnancy loss in >7d (24.4%) than in <3d (12.0%) and 4-6d (13.3%), which were similar. Regarding the follicle size, pregnancy rates (Ø<35 - 86.4%; 35<Ø<45 - 86.5%; Ø>45 - 81.9%) and pregnancy loss (Ø<35 - 13.2%; 35<Ø<45 - 18.1%; Ø>45 - 10.5%) were similar. Reasons for the greatest pregnancy loss in the >7d group have not been elucidated, but we conclude that the duration of the follicular phase may be a factor for choosing recipient mares.

Exigência de metionina + cistina para frangas de reposição na fase recria de 13 a 18 semanas de idade / Requirement of methionine plus cystine for egg pullets in the growing phase from 13 to 18 weeks old

Determinou-se a exigência de metionina + cistina para frangas de 13 a 18 semanas de idade e verificou-se seu efeito sobre a fase de postura. O experimento foi dividido em duas fases experimentais, recria e postura. Na fase de recria, 560 aves - 50% Lohmann LSL e 50% Lohmann Brown -, com 13 a 18 semanas de idade, foram distribuídas em delineamento inteiramente ao acaso, em esquema fatorial 5x2 (porcentagem de met+cis e linhagens), com quatro repetições e 14 aves por repetição. As porcentagens de met+cis totais estudadas foram 0,399; 0,469; 0,539; 0,609 e 0,679%. Ao atingirem 22 semanas de idade, 240 aves foram utilizadas para se avaliar o efeito residual das dietas oferecidas na fase de recria sobre o desempenho das aves, a produção e a qualidade de ovos. Ao se considerar a fase de produção, não se verificou efeito da inclusão de níveis de met+cis na ração, para ambas as linhagens. As exigências de metionina + cistina totais foram de 0,679% (0,611% de met+cis digestível) para aves leves e de 0,646% (0,581% de met+cis digestível) para aves semipesadas.

The methionine + cystine requirement was determined for pullets from 13 to 18 weeks of age and its effect was verified on the laying phase. The experiment was divided into two experimental phases. In the growing phase 560 birds (50% and 50% Lohmann LSL Lohmann Brown) at 13 to 18 weeks of age were distributed in a completely randomized factorial scheme 5x2 (methionine + cystine levels and lineages), with four replications and 14 birds per repetition. The levels of total methionine + cystine studied were 0.399, 0.469, 0.539, 0.609 and 0.679%. When they reached 22 weeks of age, 240 birds were used to assess the residual effects of the diets offered in the growing phase on performance of poultry, egg production and quality. Considering the production phase, there was no effect of the inclusion of methionine + cystine levels in the diet for both strains. The total methionine and cysteine was 0.679% (0.611% of digestible methionine + cystine) for light birds and 0.646% (0.581% methionine + cystine digestible) for brown-egg pullets.

Exigência de metionina + cistina para frangas de reposição na fase cria de sete a 12 semanas de idade / Requirement of methionine + cystine for pullets in the growing phase from 7 to 12 weeks old

Determinou-se a exigência de metionina + cistina para frangas de sete a 12 semanas de idade e verificou-se seu efeito sobre a fase de postura. O experimento foi dividido em duas fases, de cria e de produção, esta de 22 a 33 semanas de idade. Na primeira fase, utilizaram-se 640 aves - 50% Lohmann LSL e 50% Lohmann Brown - com sete a 12 semanas de idade, distribuídas em delineamento inteiramente ao acaso, em esquema fatorial 5x2 (porcentagem de met+cis e linhagem), com quatro repetições e 16 aves por repetição. As porcentagens de met+cis total estudadas foram 0,471; 0,541; 0,611; 0,681 e 0,751%. Ao atingirem 22 semanas de idade, 240 aves foram utilizadas para verificar o efeito residual das dietas fornecidas na fase de cria. A dieta fornecida nesta fase foi igual para todas as aves. As exigências de metionina + cistina para aves de reposição, leves e semipesadas, no período de sete a 12 semanas de idade, foram de 0,710 % de met+cis total (0,639% de met+cis digestível) e 0,706% de met+cis total (0,635% de met+cis digestível), respectivamente.

The methionine + cystine requirement was determined for pullets from seven to 12 weeks of age and its effect was verified on the laying phase. The experiment was divided into two phases, growing and production, which lasted from 22 to 33 weeks of age. In the first experimental phase we used 640 birds (50% and 50% Lohmann LSL Lohmann Brown) allotted in a completely randomized factorial scheme 5x2 (methionine + cystine levels and lineages), with four replications and 16 birds per repetition. The levels of total methionine + cystine studied were 0.471; 0.541; 0.611; 0.681 e 0.751%. When they reached 22 weeks of age, 240 birds were used to verify the residual effect of the diets fed during the growth period. The level of methionine + cystine for white-egg and brown-egg pullets in the period from 1 to 6 weeks of age were 0.710% of total methionine + cystine (0.639 % met+cis digestible) and 0.706 % of total methionine + cystine (0.635 % of met+cis digestible), respectively.

Calagem e adubação orgânica na produção de biomassa e óleo essencial em Lippia citriodora (Kunth) / Liming and organic fertilization on Lippia citriodora (Kunth) phytomass and essential oil production

O presente trabalho objetivou avaliar a calagem e adubação orgânica na produção de biomassa e óleo essencial em Lippia citriodora Kunth. O delineamento experimental utilizado constou de fatorial 7 x 2, sendo sete tratamentos (testemunha; adição de sulfato de Ca e Mg; calcário dolomítico; silicato de Ca e Mg; sulfato de Ca e Mg + esterco de curral; calcário dolomítico + esterco de curral; silicato de Ca e Mg + esterco de curral) e duas épocas de colheita, com quatro repetições, inteiramente casualizado (DIC). Verificou-se que a correção do solo mostrou-se prática necessária para o desenvolvimento da Lippia citriodora. Independentemente da época de colheita, a produção de massa fresca e seca foi maior com a aplicação do esterco de curral (32 t ha-1), no entanto, isso não refletiu em maior rendimento de óleo essencial.

The present work aimed to evaluate the effect of liming and bovine fertilization on Lippia citriodora Kunth phytomass and essential oil production. The experimental design was completely randomized with seven treatments (control; Ca and Mg sulfate; limestone; Ca and Mg silicate; Ca and Mg sulfate + manure; limestone + manure; Ca and Mg silicate + manure) and two harvest seasons, with four replicates. Soil adjustment showed to be a necessary procedure for Lippia citriodora development. Independently of the harvest season, fresh and dry matter yields were higher under treatments with bovine manure (32 t ha-1); however, no effect of treatments was observed on essential oil concentration.

Teores de cálcio em dietas para codornas japonesas no terço final de postura (45 a 57 semanas de idade) / Levels of calcium in diets for Japanese quails in the third end of posture (45 - 57 weeks of age)

Verificou-se o efeito dos teores de cálcio (Ca) na dieta sobre o desempenho e a qualidade dos ovos de codornas japonesas durante o terço final do ciclo de produção. Foram utilizadas 350 codornas, com 313 dias de idade, distribuídas em 35 unidades experimentais de 10 aves. O delineamento foi inteiramente ao acaso, composto de cinco níveis de Ca - 2,2; 2,6; 3,0; 3,4; 3,8 por cento -, com sete repetições. O aumento do Ca na dieta melhorou linearmente a conversão por massa e por dúzia de ovos, melhorou a espessura de casca e influenciou o peso da gema e da casca dos ovos, além da porcentagem da casca. Observou-se redução nos teores de P, Ca e Mg na casca com o aumento dos níveis de Ca da dieta. Para os demais parâmetros, não houve efeito do teor de Ca da dieta. Considerando-se a importância da conversão alimentar, em termos econômicos e de desempenho, o teor de 3,8 por cento de Ca na dieta mostrou-se satisfatório em atender às demais variáveis relacionadas com a qualidade dos ovos. Dieta que contenha 3,8 por cento de Ca, correspondendo ao consumo diário de 982mg por ave, melhora a conversão alimentar e a qualidade da casca dos ovos de codornas japonesas no terço final do ciclo de produção (45 a 57 semanas de idade).

The effect of calcium (Ca) levels in the diet on performance and egg quality of Japanese quail during the final third of the production cycle was evaluated. A total of 350 313-day-old quails was used. They were distributed in 35 experimental units of 10 birds. The design was completely randomized, composed of five levels of Ca (2.2, 2.6, 3.0, 3.4 and 3.8 percent), with seven replications. The increase of Ca in the diet linearly improved the feed conversion per dozen eggs, improved the shell thickness, and influenced the weight of yolk and egg shell as well the percentage of shell. There was reduction in levels of P, Ca, and Mg in the shell with increasing levels of Ca in the diet. For other parameters, no effect of calcium levels in the diet was recorded. Considering the importance of feed conversion in economic terms and performance, the level of 3.8 percent Ca in diet showed satisfactory to meet the other variables related to egg quality. Diet containing 3.8 percent Ca, corresponding to a daily intake of 982mg per bird, improves feed conversion and egg shell quality of Japanese quails in the final third of the production cycle (45-57 weeks old).

Modified model of sub-critical size cranial defect in the rabbit / Modelo modificado de defecto craneal de tamaño subcrítico de conejo

In medical sciences, any experimental animal model should be reproducible and adequate to the purpose of simulated human physiological response. In bone injury response research, when bone substitutes are in use, it is of primary importance that studied defects fail to heal unless treated with the tissue engineering therapy under study. This failure defines the concept of "critical size defect" (CSD) wich has different limits according to the animal species used and the location of the defect. Although this is a basic concept, when the aim of the study is to investigate the interface Bone-Biomaterial, it is of primary importance to obtain as much contact area as possible. In order to do so, we propose a modified surgical approach to the classical bi-parietal round sub-critical defect model in rabbit vault.

En las ciencias médicas, cualquier modelo animal de experimentación debe ser reproducible y ajustado al propósito de simular la respuesta fisiológica humana. En la investigación de la respuesta a la lesión ósea, cuando son utilizados sustitutos óseos, es de gran importancia el estudio de defectos que no logran sanar, a menos que sean tratados con terapia de ingeniería de tejidos. Este fracaso define el concepto de "defecto de tamaño crítico" (CDS) el cual tiene límites diferentes según la especie animal utilizada y la ubicación del defecto. Aunque se trata de un concepto básico, cuando el objetivo del estudio es investigar la interfaz hueso-biomaterial, es de primordial importancia obtener la máxima superficie de contacto que sea posible. Para ello, se propone una modificación en el enfoque quirúrgico del modelo clásico de defecto de tamaño subcrítico biparietal en la bóveda de conejo.

Monitoramento da variabilidade genética de pacu, Piaractus mesopotamicus, do programa de aumento de estoque do rio Paranapanema / Monitoring of the genetic variability of pacu, Piaractus mesopotamicus, of the stock enhancement program of the Paranapanema River

Avaliou-se a variabilidade genética dos estoques de reprodutores e dos peixes jovens de Piaractus mesopotamicus de três pisciculturas do estado do Paraná, utilizadas no programa de aumento de estoque de peixes no rio Paranapanema. Foi utilizado o marcador RAPD para avaliar as amostras do estoque de reprodutores e dos peixes jovens das pisciculturas de Palotina, Cambará e Andirá. A porcentagem de fragmentos polimórficos e o índice de diversidade genética de Shannon dos estoques de reprodutores variaram de 75,0 por cento a 71,4 por cento e de 0,434 a 0,376, respectivamente. Os peixes jovens das pisciculturas apresentaram valores mais elevados para ambos os parâmetros, com exceção da piscicultura de Palotina, na qual o índice de diversidade genética de Shannon foi semelhante. Os estoques de reprodutores apresentaram alta variabilidade genética, e esta foi mantida nos peixes jovens.

The genetic variability of broodstocks and juveniles of Piaractus mesopotamicus raised in three hatchery stations in Parana state, that were used in the fish stock enhancement program of the Paranapanema River, was estimated. The RAPD marker was used to evaluate samples taken from broodstocks and juveniles in the hatchery stations of Palotina, Cambará, and Andirá cities. The percentage of polymorphic fragments and the Shannon genetic diversity index of broodstocks ranged from 75.0 percent to 71.4 percent and from 0.434 to 0.376, respectively. The juveniles of the hatchery stations presented higher values for both parameters, except in the hatchery station of Palotina in which the Shannon genetic diversity index was similar. The broodstocks presented high genetic variability, and this was maintained in the juveniles.

Digestibilidade aparente e verdadeira do fósforo de alimentos de origem animal para suínos / Apparent and true digestibility of phosphorus from animal origin feedstuffs for swines

Determinaram-se os coeficientes de digestibilidade aparente (CDAP) e verdadeira (CDVP) do fósforo de alimentos de origem animal. Foram utilizados 24 suínos, machos castrados, com média de peso de 25,0±3,0kg no período de crescimento e 24 suínos com média de peso de 60,0±5,0kg para o período de terminação. Os tratamentos foram resultantes de um fatorial de duas metodologias (coleta total de fezes e indicador fecal), duas fases (crescimento e terminação) e oito dietas (seis alimentos de origem animal, uma ração referência e uma ração com baixo conteúdo de fósforo total para estimar as perdas de fósforo endógeno), com três repetições e um animal por unidade experimental. Não foram encontradas diferenças entre as metodologias ou entre as fases avaliadas (P>0,05). Os valores médios de CDAP e CDVP encontrados com suínos em crescimento e terminação foram, respectivamente, 61,7 e 62,0 por cento para a farinha de carne e ossos com 35 por cento de proteína bruta (PB); 62,3 e 62,9 por cento para a farinha de carne e ossos com 41 por cento de PB; 49,0 e 52,5 por cento para a farinha de vísceras e penas; 72,3 e 90,8 por cento para a farinha de penas; 85,5 e 88,5 por cento para a farinha de peixe com 55 por cento de PB; e 80,0 e 92,0 por cento para o soro de leite em pó.

The coefficients of apparent (CADP) and true (CTDP) digestibility of the phosphorus from animal origin feedstuffs were determined. Twenty-four barrows in growing phase with initial weight 25.0±3.0kg and the same barrows in finishing phase with initial weight 60.0±5.0kg were used. The treatments were made by a factorial of two methodologies (total collection of feces and fecal marker), two phases (growing and finishing), and eight diets (six animal origin feedstuffs, one reference diet, and one diet with low content of total phosphorus in order to estimate the losses of endogenous phosphorus), with three replicates by treatment. There was no difference between the methodologies or phases evaluated (P>0.05). The average of CADP and CTDP found in growing and finishing phases were, respectively, 61.7 and 62.0 percent for 35 percent crude protein (CP) meat and bone meal; 62.3 and 62.9 percent for 41 percent CP meat and bone meal; 49.0 and 52.5 percent for feather and poultry by-products meal; 72.3 and 90.8 percent for feather meal; 85.5 and 88.5 percent for 55 percent CP fish meal; and 80.0 and 92.0 percent for powder milk whey.

Antibody responses elicited in mice immunized with Bacillus subtilis vaccine strains expressing Stx2B subunit of enterohaemorragic Escherichia coli O157: H7 / Resposta de anticorpos obtidas em camundongos imunizados com linhagens vacinais de Bacillus subtilis expressando a subunidade B da Stx2 de Escherichia coli O157: H7 enterohemorrágica

No effective vaccine or immunotherapy is presently available for patients with the hemolytic uremic syndrome (HUS) induced by Shiga-like toxin (Stx) producedbyenterohaemorragic Escherichia coli (EHEC) strains, such as those belonging to the O157:H7 serotype. In this work we evaluated the performance of Bacillus subtilis strains, a harmless spore former gram-positive bacterium species, as a vaccine vehicle for the expression of Stx2B subunit (Stx2B). A recombinant B. subtilis vaccine strain expressing Stx2B under the control of a stress inducible promoter was delivered to BALB/c mice via oral, nasal or subcutaneous routes using both vegetative cells and spores. Mice immunized with vegetative cells by the oral route developed low but specific anti-Stx2B serum IgG and fecal IgA responses while mice immunized with recombinant spores developed anti-Stx2B responses only after administration via the parenteral route. Nonetheless, serum anti-Stx2B antibodies raised in mice immunized with the recombinant B. subtilis strain did not inhibit the toxic effects of the native toxin, both under in vitro and in vivo conditions, suggesting that either the quantity or the quality of the induced immune response did not support an effective neutralization of Stx2 produced by EHEC strains.

Até o presente o momento, não há vacina ou imunoterapia disponível para pacientes com Síndrome Hemolítica Urêmica (SHU) induzida pela toxina Shiga-like (Stx) produzida por linhagens de Escherichia coli entero-hemorragica (EHEC), tais como as pertencentes ao sorotipo O157:H7. Neste trabalho, avaliamos a performance de Bacillus subtilis, uma espécie bacteriana gram-positiva não-patogênica formadora de esporos, como veículo vacinal para a expressão da subunidade B da Stx2B (Stx2B). Uma linhagem vacinal recombinante de B. subtilis expressando Stx2B, sob o controle de um promoter induzível por estresse, foi administrada a camundongos BALB/c por via oral, nasal ou subcutânea usando células vegetativas e esporos. Camundongos imunizados com células vegetativas e esporos pela via oral desenvolveram títulos anti-Stx2B baixos, mas específicos, de IgG sérico e IgA fecal, enquanto camundongos imunizados com esporos recombinates desenvolveram resposta anti-Stx2B apenas após a administração pela via parenteral. No entanto, anticorpos produzidos em camundongos imunizados com a linhagem recombinante de B. subtilis não inibiram os efeitos tóxicos da toxina nativa em condições in vitro e in vivo, sugerindo que a quantidade e/ou a qualidade da resposta imune gerada não suportam uma neutralização efetiva da Stx2 produzidas por linhagens de EHEC.

McCoy cell line as a possible model containing CD4+ receptors for the study of HIV-1 replication

Several studies have recently shown the use of recombinant rabies virus as potential vector-viral vaccine for HIV-1. The sequence homology between gp 120 and rabies virus glycoprotein has been reported. The McCoy cell line has therefore been used to show CD4+ or CD4+ like receptors. Samples of HIV-1 were isolated, when plasma of HIV-1 positive patients was inoculated in the McCoy cell line. The virus infection was then studied during successive virus passages. The proteins released in the extra cellular medium were checked for protein activity, by exposure to SDS Electrophoresis and blotting to nitro-cellulose filter, then reacting with sera of HIV positive and negative patients. Successive passages were performed, and showed viral replication, membrane permeabilization, the syncytium formation, and the cellular lysis (cytopathic effect). Flow cytometry analysis shows clear evidence that CD4+ receptors are present in this cell line, which enhances the likelihood of easy isolation and replication of HIV. The results observed allow the use of this cell line as a possible model for isolating HIV, as well as for carrying out studies of the dynamics of viral infection in several situations, including exposure to drugs in pharmacological studies, and possibly studies and analyses of the immune response in vaccine therapies

Queratoacantoma de pálpebra: estudo crítico do seu diagnóstico / Palpebral keratoacanthoma: critical study about its diagnosis

O queratoacantoma é uma lesäo benigna auto-resolutiva que se assemelha clínica e histologicamente ao carcinoma espino-celular. Foram revistas 42 lesöes de pápebra provenientes do registro Brasileiro de Patologia Ocular - Escola Paulista de Medicina, dos quais 30 (71,4%) eram carcinomas espino-celulares e 12 (28,6%) correspondiam a queratocantomas. As lesöes foram analisadas quanto a sexo, idade, raça e comparadas com o diagnóstico clínico. Os resultados mostraram imprecisäo do diagnóstico clínico, o que leva as lesöes neoplásicas de pálpebra, principalmente no caso do queratoacantoma, necessitarem de uma incisäo ampla pois podem se tratar de lesöes malignas

Reparacao de assoalho orbitario com enxerto do osso parietal. / Repair of the orbital floor with parietal bone graft

Os autores apresentam a experiencia na reparacao de assoalho orbitario fraturado utilizando enxerto osseo de tabua externa do osso parietal. Descrevem a tecnica empregada em seis pacientes que foram observados no periodo de 6 meses a 1 ano; analisam os resultados obtidos e discutem as vantagens e desvantagens desta conduta

Avaliacao do estado nutricional de criancas moradoras em uma comunidade da periferia da cidade de Sao Paulo (Jardim Sabia). / Evaluation of nutritional status of children living in a suburban communuty of Sao Paulo city (Jardim Sabia)

No Jardim Sabia, periferia da cidade de Sao Paulo, foram realizadas visitas domiciliares a todas as moradias e avaliado o estado nutricional de 332 criancas de 0 a 120 meses, moradoras do bairro ou areas vizinhas.Dentre os aspectos medico-sociais destacou-a importancia do processo de migracao interna na constituicao da populacao do Jardim Sabia. A prevalencia de desnutricao proteico-calorica (DPC) aguda foi de 26,0%; DPC cronica equilibrada, 19,8% e DPC cronica com agravo agudo, 10,8%

Sarcoma alveolar de partes moles retroperitoneal - relato de um caso. / Alveolar retroperitoneal soft-part sarcoma - report of a case

Um unico caso de sarcoma alveolar de partes moles S.A.P.M. foi observado no Hospital Naval Marcilio Dias, no periodo de 1976 a novembro de 1983. Nesse intervalo foram diagnosticados por biopsia ou resseccao cirurgica um total de 63 sarcomas de partes moles. Ha evidencias de que os cristais em forma de agulhas, P.A.S. positivos, diastase resistentes, observados em algumas celulas tumorais, sejam caracteristicas da doenca e importantes no diagnostico diferencial com outros tumores