Síntesis total del gen de la ertropoyetina humana / Total synthesis of the human erythropoietin gene

En el presente trabajo se reporta la síntesis total del gen que codifica para la eritropoyetina humana, hormona glicoproteica de 166 aminoácidos, que constituye la hormona principal para la regulación y el mantenimiento, a niveles fisiològicos, de la masa de eritrocitos circulantes el la sangre. El diseño del gen sitético 620 pb, incluye la secuencia que codifica para el péptido señal de 27 aminoácidos, la secuencia consenso CCACC,los sitios de restricción Bgl LL y EcoR l en los extremos 5' y 3' y los codones más frecuentes en eucariotas. Fueron sintetizados en fase sólida, por el método del ß-cianoetilfosforamidito, 54 oligonuleótidos. El gen sintetizado, uno d4 los mayores reportados sin el uso de subclonajes de fragmentos, fue insertado en un vector de expresión para células de mamíferos y secuenciado con el método Sanger

Síntesis químico-enzimática del gen de la proinsulina humana / Chemical-enzymatic synthesis of the human proinsulin gene

En el presente trabajo se reporta la síntesis químoco-enzimática del gen que codifica para la proinsulina humana, hormona proteica de 86 aminoácidos. Para realizar la síntesis del gen de 270/266 pares de bases, fueron preparados 24 oligodesoxinucleótidos en fase sólida por el método del B-cianoetilfosforamidito. El gen sintético, que contiene los codones más frecuentes de E. coli y levadura, fue insertado en el plasmidio pUC18 y secuenciado por el método de Sanger