RESUMO
La acrosina, es uno de los componentes principales del acrosoma, presenta actividad similar a la tripsina, y es liberado luego de la reacción acrosómica (RA). El objetivo del presente trabajo fue estudiar la inducción de la RA en espermatozoides de ratón con zonas pelúcidas homólogas y heterólogas. Espermatozoides de ratón capacitados por 2 horas en medio IVF suplementado con albúmina, heparina y suero sintético a 37 ºC y 5% CO2 fueron incubados en ausencia de Zona Pelucida (ZP) o en presencia de solubilizados de ZP aisladas de ratón (0,78 mg/ml) y alpaca (0,78 mg/ml y 2,35 mg/ml). La RA se evaluó mediante inmunocitoquímica con anticuerpo monoclonal anti-acrosina humana C5F10 a intervalos de 1 hora durante 4 horas. Los resultados obtenidos en espermatozoides de ratón evidencian un incremento significativo (p< 0,05) de la reacción acrosómica inducida con ZP homóloga y heteróloga.
Acrosin is one of the principal components in the acrosome, has trypsin-like activity and is secreted after the Acrosome Reaction (RA). The aim of this study was to study the induction of the acrosomal reaction in mouse sperms with homologous- Pellucid Zone and heterologous- Pellucid Zone. Mouse sperms were capacitated by two hours in IVF medium, supplemented with albumin, heparin and synthetic serum to 37 °C and 5% CO2, and before they were incubated in absence of ZP and in present of solubilized ZP from mouse (0,78 mg/ml) and alpaca (0,78 mg/ml y 2,35 mg/ml). The RA was evaluated through immunocytochemistry with monoclonal antibodies anti-human acrosin C5F10 within intervals of 1 hour during four hours. The results show a significant increase (p<0,05) in acrosome reaction induced with homologous-ZP and heterologous-ZP.
RESUMO
Busulfán es un agente alquilante bifuncional tipo-éster, que interfiere con la replicación del ADN. Dosis elevadas de este compuesto son aplicadas antes de los transplantes de médula ósea y de células germinales, sin embargo no han sido cuantificados el daño ni la recuperación del sistema reproductor. Para cuantificar la recuperación del efecto en la espermatogénesis, se usaron ratones de la cepa Balb C, a los que se les inyectó Busulfán intraperitonealmente, 40 mg/kg de peso corporal, y se evaluó el peso testicular y la concentración espermática en cola de epidídimo, a los 30, 54 y 72 días y se realizaron cortes histológicos de testículo. Los resultados fueron analizados con la prueba U Mann-Whitney p>0.05. A los 30 días el peso testicular, la concentración espermática y el diámetro de los túbulos seminíferos presentaron una drástica reducción del 77,8%, 97,9% y 34,3% respectivamente, comparados con el grupo control. A los 54 días, el peso testicular y el diámetro testicular muestran una recuperación del 70%. A los 72 días, la recuperación es completa en los parámetros evaluados. Por lo tanto, Busulfán aplicado en una sola dosis afecta significativamente la espermatogénesis en el ratón y se logra la recuperación completa en dos ciclos espermáticos.
The DNA replication is disrupted by Busulfan which is a bifunctional alquilant as an ester agent. High dose of this compound are applied before transplants of bone marrow and germ cells. However quantification of the damage to the reproductive system and its recovery have not been established. The aim of this study was to quantify both spermatogenesis and spermiogenesis recovery in mice from damage caused by an injection of Busulfan. We used Balb C mice which were evaluated 30, 54 and 72 days after the intraperitoneal injection of 40 mg/kg body weight. We took the following variables: testicular weight, spermatic concentration in epididimus line and histological cuts to measure the diameter of the seminiferous tubules. Results were analyzed with the test U Mann-Whitney p>0.05. By day 30, testicular weight, spermatic concentration and diameter of the seminiferous tubules were reduced to 77,8%, 97,9% and 34,3% respectively compared to the controls. At day 54, testicular weight and diameter of the seminiferous tubules showed a recovery of 70%. Recovery was complete by day 72. Therefore Busulfan applied in a sigle dose, affects significantly spermatogenesis and the completed recovery takes two spermatic cycles in mice.