Efeitos do cetoconazol e seus mecanismos de ação in vitro sobre linhagens hipofisárias tumorais imortalizadas / Effects of ketoconazole and its mechanisms of action in pituitary tumoral immortalizaded cell lines

O cetoconazol, inicialmente descrito como um agente antifúngico, revelou-se um potente inibidor da esteroidogênese adrenal, podendo, assim, ser utilizado no manejo da doença de Cushing, como terapia primária ou após insucesso cirúrgico, enquanto aguarda o efeito da radioterapia. Durante o tratamento com cetoconazol, uma redução dos níveis de cortisol é observada, usualmente não acompanhada por uma elevação do ACTH plasmático, como poderia ser esperada. Este fenômeno paradoxal, caracterizado pela redução do cortisol com níveis de ACTH inadequadamente normais ou não elevados, pode estar relacionado a uma ação adicional do cetoconazol nas células hipofisárias produtoras de ACTH. Para se testar essa hipótese, alguns estudos in vitro realizados na década de 80, avaliando a secreção de ACTH na vigência do cetoconazol, sugeriram a sua ação em células adenohipofisárias. Em adição, foi evidenciado que o cetoconazol ativou vias de apoptose em linhagens tumorais não hipofisárias. O presente estudo tem como objetivo avaliar o efeito in vitro do cetoconazol na viabilidade celular e na expressão de genes envolvidos na apoptose e replicação do DNA em linhagens tumorais hipofisárias imortalizadas corticotróficas (AtT-20), gonadotróficas (alfaT3.1), mamossomatotróficas (GH3) e mamotróficas (MMQ), utilizando-se a técnica de RT-qPCR. Os resultados mostraram que, na presença do cetoconazol, ocorreu uma redução da viabilidade celular nas linhagens hipofisárias, de forma concentração-dependente, às custas do estímulo da via extrínseca e intrínseca da apoptose, com aumento da expressão dos receptores de morte celular (ex.: Fas, TNFR) e/ou caspases (ex.: -2, -3, -6 ,-7 ,-9). Estes resultados foram associados a um aumento da expressão gênica dos inibidores do ciclo celular p21 (nas linhagens GH3 e alfaT3.1) e p27 (nas linhagens GH3 e MMQ), com uma redução acentuada da expressão destes genes após retirada do cetoconazol do meio de cultura...

Ketoconazole, initially described as an antifungal agent, proved to be a potent inhibitor of steroidogenesis, allowing its use in the management of Cushing's disease as primary or after unsuccessfully surgery and waiting the effect of radiotherapy. During treatment with ketoconazole, there a reduction in the cortisol levels is observed, usually not accompanied by an elevation of plasmatic ACTH, as could be expected. This paradoxical phenomenon, characterized by reduced cortisol with ACTH levels inappropriately normal or not elevated, could be related to an additional action of ketoconazole on ACTH-producing pituitary cells. In agreement with this hypothesis, some in vitro studies in the 80's, evaluating ACTH secretion in the presence of ketoconazole, suggested its action in pituitary cells. In addition, ketoconazole activated apoptosis pathways in non-pituitary tumor cell lines. Therefore, the present study aims to revisit this topic and evaluate the in vitro effect of ketoconazole on cell viability and expression of genes involved in apoptosis and DNA replication by RT-qPCR in immortalized pituitary tumoral corticotroph (AtT-20), gonadotroph (alphaT3.1), mammosomatotroph (GH3), mammotroph (MMQ) cell line. As a result, there was a reduction in pituitary cell viability with ketoconazole, in a concentration-dependent manner, due to stimulation of the extrinsic and intrinsic pathway of apoptosis, with increased expression of cell death receptors (eg. Fas, TNFR) and/or caspases (eg. -2, -3, -6, -7, -9). These results were associated with an increased gene expression of the cell cycle inhibitors p21 (in GH3 and alphaT3.1 cell line), and also p27 (in GH3 and MMQ cell line), with a significant reduction in the expression of these genes after removal of ketoconazole in the media. In conclusion, the ketoconazole have the potential of reduce cell viability in pituitary tumoral lineages possibly due to a cytotoxic effect (by increasing...

Evaluation of weight loss and metabolic profile of obese patients with type 2 diabetes mellitus (dm2) versus non-dm2 subjects, one and three years after bariatric surgery / Avaliação da perda ponderal e perfil metabólico pós-cirurgia bariátrica em pacientes obesos portadores de diabetes mellitus tipo 2 versus não diabéticos

BACKGROUND: There is a debate over results obtained from type 2 diabetes mellitus (DM2) obese patients and non-DM2 patients, in reference to metabolic control and ponderal loss, after bariatric surgery. AIM: To evaluate weight loss and metabolic profile of obese patients with DM2 versus non-DM2 subjects, one and three years after bariatric surgery. METHODS: Data from 38 non-DM2 patients and 44 DM2 patients submitted to Roux-en-Y gastric-bypass were analysed retrospectively. For the pre-operatory, first and third year of post-operatory, were compared: weight, body mass index (BMI), fasting glucose (FG), high density lipoprotein (HDL) and triglycerides (TG). RESULTS: Preoperatively, both groups were statistically equivalent in regards to weight, BMI (P = 0.90) and HDL (P = 0.73). This was not the case when TG (P = 0.043) and FG (P<0.01) were analyzed. In PO1, both DM2 and non-DM2 groups showed a reduction in weight, BMI and TG, just as FG in the DM2 group (P < 0.05). HDL increased (P < 0.05) in PO1 in both groups. In the following period, between PO1 and PO3, only TG continued to decrease in the non-DM2 group (P = 0.039), while the other variables did not change. In the DM2 group mean A1c in PO3 was 6.2

RACIONAL: Tem havido debate sobre os resultados obtidos da cirurgia bariátrica nos obesos diabéticos versus não diabéticos, no quesito controle metabólico e perda ponderal. OBJETIVO: Avaliar a perda ponderal e perfil metabólico dos obesos diabéticos e não diabéticos após um e três anos da cirurgia bariátrica. MÉTODO: Análise retrospectiva dos prontuários de 44 diabéticos tipo 2 (DM2) e 38 não-DM2 submetidos à gastroplastia com derivação em Y-de-Roux. Dados como peso, índice de massa corpórea (IMC), glicemia de jejum (GJ), lipoproteína de alta densidade (HDL) e triglicérides (TG) foram vistos no pré-operatório, primeiro (PO1) e terceiro ano (PO3) após a operação. RESULTADOS: No pré-operatório, ambos os grupos foram estatisticamente equivalentes em peso, IMC (P=0,90) e HDL (P=0.73). Não se verificou o mesmo quando TG (P=0.043) e GJ (P < 0.01) foram analisados. No PO1, ambos DM2 e não-DM2 mostraram redução no peso, IMC e TG, assim como GJ no grupo DM2 (P < 0.05). HDL aumentou (P < 0.05) no PO1 em ambos os grupos. No período seguinte, entre PO1 e PO3, somente TG continuou a cair nos não-DM2 diabéticos (P=0,039), enquanto as outras variáveis não mudaram. No grupo DM2, a média da A1c no PO3 foi 6,2

+- 0,75 (P=0,027). Compararam-se os dados do pós-operatório de ambos os grupos. A variação de HDL e TG entre os grupos não foi diferente no PO1 e entre PO1 e PO3. Peso no PO1 e PO3, assim como IMC no PO1 e PO3, não foram estatisticamente diferentes. CONCLUSÃO: No PO1, perda de peso e melhora metabólica foi vista em ambos os grupos. Este dado foi sustentado no PO3, sem reganho de peso ou alteração lipídica significativa. A A1c encontrada no pós-operatório mostrou bom controle do diabetes pela operação. Houve tendência à menor perda ponderal no grupo DM2 (P=0,053).

+- 0.75 (P = 0.027). It was compared both group's post-operative data. HDL's and TG's variation between groups did not differ in PO1 or between PO1 and PO3. Weight in PO1 and PO3, just as BMI in PO1 and PO3, were not significantly different either. CONCLUSION: In PO1, weight loss and metabolic improvement was seen in both groups. This was sustained in PO3, with no significant weight regain or lipid/FG change. A1c found suggests a reasonable control of DM2 surgery. A trend towards a less intense weight loss could be noticed in the DM2 group (P = 0.053).

Cirurgia bariátrica cura síndrome metabólica? / Can bariatric surgery cure metabolic syndrome?

OBJETIVOS: Avaliar o impacto da cirurgia bariátrica na síndrome metabólica (SM) e quais os critérios que mais contribuíram para sua remissão após cirurgia. A evolução da leucometria também foi analisada. MATERIAL E MÉTODO: 47 mulheres obesas com SM foram avaliadas. Todas as pacientes foram operadas pela técnica da gastroplastia vertical em Y-de-Roux, com colocação de anel de contenção na anastomose gastro-jejunal (Fobi-Capella). Pacientes foram avaliadas antes da cirurgia e no primeiro ano pós-operatório. RESULTADOS: A glicemia de jejum apresentou queda relevante nos 3 primeiros meses. Ao final de 12 meses, todas as 20 pacientes que tinham DM2 ou glicemia de jejum alterada apresentavam níveis glicêmicos e hemoglobina glicosilada normais. Nenhuma delas estava usando drogas anti-diabéticas. Valores de triglicerídeos reduziram 49,2 por cento. O HDL-colesterol aumentou 27,2 por cento. A redução da pressão arterial foi, em média, de 28,7 mmHg na sistólica e de 20,8 na diastólica. A contagem de leucócitos caiu de 7671/æL para 6156/æL. Glicemia de jejum, triglicerídeos, pressão diastólica e sistólica e HDL-colesterol foram as variáveis que mais contribuíram para a extinção da SM. No final do primeiro ano, essa extinção ocorreu em 80,9 por cento das pacientes. DISCUSSÃO: Cirurgia bariátrica reduz a resistência à insulina e conseqüentemente os riscos cardiovasculares.

OBJECTIVES: To evaluate the impact of bariatric surgery on the metabolic syndrome (MS) and what are the criteria that contribute the most for its exclusion after surgery. The progress of leucometry was also analyzed. METHODS AND PROCEDURES: 47 obese women with MS were evaluated. All patients were operated with the Roux-en-Y vertical gastric bypass technique, with the insertion of a contention ring on the gastro-jejune anastomosis (Fobi-Capella). Patients were evaluated before and on the first year post-surgery. RESULTS: Fasting glucose presented a relevant decrease at 3 months after surgery. After 12 months, all 20 patients who had DM2 or altered fasting glucose presented normal levels of fasting glucose and glicated hemoglobin, and none of them was using any anti-diabetic drug. Triglycerides levels were reduced by 49.2 percent, whereas HDL-cholesterol increased by 27.2 percent. Systolic and diastolic blood pressures were reduced by an average of 28.7 and 20.8 mmHg, respectively. Leucocytes counting fell from 7671/æL to 6156/æL. Fasting glucose, triglycerides, DBP, SBP and HDL-cholesterol were the variables that contributed most for the reduction of MS. At the end of the first year, elimination of MS occurred in 80.9 percent of the patients. DISCUSSION: Bariatric surgery reduces resistance to insulin and consequently the cardiovascular risk factors.