Neospora caninum in bovine fetuses of Minas Gerais, Brazil: genetic characteristics of rDNA / Neospora caninum em fetos bovinos de Minas Gerais, Brasil: características genéticas do rDNA

Neosporosis is an important cause of abortion in cattle and information on their genetics and host parasite relationships are desirable. Neospora caninum samples obtained from 24 bovine fetuses from Minas Gerais, were genetically analyzed in part of the rDNA region, coding for rRNAs. Previously, brain, heart, liver, skeletal muscle, lung, kidney, spleen, thymus, lymph nodes, ovary or testis, uterus and skin of the ear were analyzed by conventional histopathology and immunohistochemistry. Of these, eight had lesions compatible in the brain and heart and two also in skeletal muscle and liver. Three brains showed antigen identification in immunohistochemistry. Brain and heart tissues were subjected to DNA extraction for PCR, whose product of 588 bp of ITS-1 region was sequenced in three samples. We obtained 96 percent similarity with dozens of sequences N. caninum deposited in GenBank. The phylogenetic tree showed great conservation among isolates of N. caninum in this study and those deposited in GenBank, while well-defined and specific branches were generated against other Apicomplexa. PCR for this region is useful as a diagnosis, with good analytical specificity, but the ITS-1 region is not suitable for genetic differentiation intra species because the sequences obtained were identical to the others analyzed.

A neosporose é uma importante causa de abortos em bovinos, e informações sobre sua genética e relação parasito-hospedeiro são desejáveis. Amostras de Neospora caninum, obtidas de 24 conceptos bovinos oriundos de Minas Gerais, foram analisadas geneticamente em parte da região rDNA, codificadora de rRNAs. Previamente, cérebro, coração, fígado, músculo esquelético, pulmão, rim, baço, timo, linfonodos, ovário ou testículo, útero e pele da orelha foram analisados por histopatologia convencional e imuno-histoquímica. Dessas, oito apresentaram lesões compatíveis no encéfalo e coração e dois também no músculo esquelético e fígado. Três cérebros apresentaram identificação antigênica na imuno-histoquímica. Tecidos cerebral e cardíaco foram submetidos a extração de DNA para PCR, cujo produto de 588 pb da região ITS-1 foi sequenciado em três amostras. Obteve-se similaridade de 96 por cento com dezenas de sequências de N. caninum depositadas no GenBank. A árvore filogenética mostrou grande conservação entre isolados de N. caninum deste estudo e aqueles depositadas no GenBank, enquanto ramos bem definidos e específicos foram gerados em relação a outros apicomplexa. A PCR para esta região é útil como diagnóstico, com boa especificidade analítica, mas a região ITS-1 não é apropriada para a diferenciação genética intraespécie, pois as sequências obtidas foram idênticas às demais analisadas.

Soroprevalência e fatores de risco para Babesia bovis em rebanhos leiteiros na região sul de minas gerais / Seroprevalence and risk factors for Babesia bovis in dairy cattle from region southern Minas Gerais state, Brazil

Conduziu-se este trabalho, com o objetivo de determinar a prevalência e os fatores de risco associados à soropositividade para Babesia bovis em 556 bovinos leiteiros procedentes de dez propriedades localizadas no sul de Minas Gerais, as quais foram divididas em dois grupos de acordo com a produção média diária de leite: Alta Produção (AP) >2.000 l de leite/dia, e Baixa Produção (BP) 500 l de leite/dia. Os soros foram submetidos à reação de imunofluorescência indireta (RIFI) para pesquisa de anticorpos anti-B. bovis e considerados positivos na diluição de 1:320. A análise estatística foi realizada no programa SPSS 12.0 for Windows e se buscou determinar a associação entre níveis de positividade para B. bovis nos rebanhos e os fatores de risco por meio do Teste Exato de Fischer. Para testar a diferença das médias de soropositividade, foi utilizado o teste T Student e em todos os cálculos considerou-se o grau de significância de 95 por cento. A prevalência média global de bovinos infectados por B. bovis foi de 94,1 por cento (523/556). Não houve diferença significativa na frequência média de anticorpos anti-B. bovis entre as propriedades leiteiras dos grupos de AP (95,97 por cento) e BP (92,22 por cento); e o mesmo resultado foi observado entre os animais jovens e adultos de ambos os grupos. Não foi observada associação significativa entre os fatores de risco avaliados e a taxa de bovinos positivos para B. bovis. A alta prevalência de rebanhos leiteiros soropositivos permite caracterizar, epidemiologicamente, a microrregião de Lavras, sul de Minas Gerais, como área de elevada estabilidade endêmica para B. bovis.

The objective of this study was to determine the prevalence and risk factors associated with Babesia bovis infection in 556 dairy cattle from ten properties located in southern Minas Gerais State, Brazil. The herds were divided into two groups according to average daily milk production (liters): I- High Production (HP), >2,000 L milk/day; and II- Low Production (LP), d"500 L milk/day. The serum samples were submitted to the indirect fluorescent antibody test (IFAT) for antibodies anti-B. bovis and they were considered positive at a dilution of 1:320. The statistical analysis was performed using SPSS 12.0 for Windows. It was stated the association between positivity levels for B. bovis in dairy herds and the risk factors (farm size, production system, breed and feeding system) by Fisher exact test. The average prevalence of cattle with B. bovis infection was 94.06 percent (523/556). There was no significant difference (p>0.05) in the average frequency of antibodies anti-B. bovis between the groups of HP (95.97 percent) and LP (92.22 percent), and similar results were observed between young or adult cattle for both groups. The association between risk factors and seroprevalence of B. bovis has not been previously reported (p>0.05). The high prevalence of seropositive dairy herds allows to characterize epidemiologically the microregion of Lavras, south of Minas Gerais State, an area of enzootic stability to B. bovis.

Fatores associados a soroprevalência de neospora caninum e toxoplasma gondii em rebanhos caprinos na região sul de Minas Gerais / Factors associated to seroprevalence of neospora caninum and toxoplasma gondii in caprine herds in southern Minas Gerais state, Brazil

Este estudo estabelece a soroprevalência de Neospora caninum e Toxoplasma gondii em rebanhos caprinos no Sul de Minas Gerais e verifica a sua associação com o desempenho reprodutivo dos rebanhos analisados, uma vez que não há dados sobre neosporose em caprinos neste Estado. Amostras de soro de 401 caprinos provenientes de 11 propriedades foram submetidas à reação de imunofluorescência indireta anti-N. caninum e T. gondii. A prevalência média de animais positivos foi de 10,7% e 21,4%, respectivamente. Houve diferença significativa entre as faixas etárias. Neste quesito os maiores índices de positividade, para ambos os parasitas, foram observados nos caprinos acima de três anos de idade. Estes apresentaram uma probabilidade 2,6 e 4,8 maior, em relação aos animais de até um ano de idade, para N. caninum e T. gondii, respectivamente. No teste T não houve associação positiva entre as médias de prevalência de N. caninum (p=0,553) e T. gondii (p=0,098) com a ocorrência de problema reprodutivo nos rebanhos. Porém, propriedades com histórico de problemas reprodutivos apresentaram uma média de reagentes para N. caninum de 18,64%, se comparadas a 13,97% de criatórios que não relataram essas alterações. Quando os problemas reprodutivos foram separados em categorias a relação entre a ocorrência de aborto e a soroprevalência de N. caninum e de T. gondii foi significativa (p<0,05) por meio dos testes Exato de Fisher e Qui-quadrado. Não houve diferença (p>0,05) entre as médias de prevalência de T. gondii e o acesso de gatos ao rebanho no teste T. Entretanto, a média de prevalência nas propriedades em que os gatos tinham acesso foi de 31,01%, se comparada a 17,34% em criatórios onde não existiam gatos. Foi constatado o acesso de cães em 100% das propriedades. Os resultados obtidos neste estudo demonstram que N. caninum e T. gondii infectam caprinos no Sul de Minas Gerais e que estes parasitas podem estar associados à ocorrência de abortos nessa espécie animal.

This study determines the seroprevalences of Neospora caninum and Toxoplasma gondii in caprine herds in southern Minas Gerais state and investigates their association with the reproductive performance of the herds analyzed since no data concerning neosporosis in goats in this state are available. Serum samples from 401 goats from 11 farms were subjected to indirect immunofluorescence reaction for the detection of N. caninum and T. gondii. The mean prevalence rates of animals that tested positive were 10.7% and 21.4%, respectively. Significant differences between different age groups were observed. The highest frequencies of positive cases for both parasites were observed in goats over three years of age; in this group, the probability of seropositivity for N. caninum and T. gondii was 2.6 and 4.8 times higher, respectively, when compared to animals up to one year of age. No positive correlation was found between the mean prevalence rate of N. caninum (p-0,553) and T. gondii (p=0.098) and the occurrence of reproductive problems in the herds using T-test. However, farms with a history of reproductive problems exhibited an average of 18.64% animals reactive to N. caninum, compared to 13.97% from farms where those problems were not reported. When reproductive problems were separated in category, the relationship between occurrence of abortion and seroprevalence of N. caninum and T. gondii was significant (p<0.05) using Fisher’s exact test and chi-square test. No difference was seen (p>0.05) between the mean prevalence rate of T. gondii of herds to which cats had access as compared to herds that had no contact with cats using a Ttest. However, the mean prevalence rate in farms where cats had access to the herd was 31.01% as compared to 17.34% in farms where there were no cats. Access of dogs was observed in 100% of the farms...

Freqüência de anticorpos anti-Neospora caninum em vacas e fetos provenientes de municípios do sul de Minas Gerais / Frequency of anti-Neospora caninum antibodies in cows and fetuses from Municipalities of Southern Minas Gerais

The objective of this study was to determine the frequency of antibodies anti-Neospora caninum in cows and fetuses from Municipalities of southern Minas Gerais. A total of 559 serum samples of cows of the a bank of sera formed from of serum samples collected at 18 dairy farms, distributed for seven Municipalities of the Lavras Micro region, southern Minas Gerais, and 575 serum samples of cows and 503 serum samples of fetuses were collected at slaughter house of Campo Belo, MG. Serum samples were submitted to the indirect fluorescent antibody tests (IFAT), using as antigen taquizoites of N. caninum, and as cut-off values the serum dilution of 1:25 for the fetuses serum and 1:200 for the cows. The frequency in the cows of the Lavras Micro region was of 91.2 percent (510/559). The frequency was of 97.2 percent (559/575) and 12.7 percent (64/503) for females and fetuses from slaughter house, respectively. These results indicate that the infection by N. caninum is endemic in dairy cattle of the Lavras Micro region, southern Minas Gerais, Brazil.

O objetivo deste estudo foi determinar a freqüência de anticorpos anti-Neospora caninum em vacas e fetos provenientes de municípios do sul de Minas Gerais. Foram utilizadas 559 amostras de soros de vacas de um banco de soros formado a partir de amostras coletadas em 18 propriedades produtoras de leite, distribuídas por sete municípios da microrregião de Lavras, MG; e 575 amostras de soros de vacas e 503 de soros fetais, ambas coletadas no matadouro de Campo Belo, MG. As amostras foram submetidas à reação de imunofluorescência indireta (RIFI-IgG), para pesquisa de anticorpos anti-N. caninum, considerando como ponto de corte o título de 1:200 para as fêmeas bovinas e 1:25 para os soros fetais. A freqüência média global de anticorpos anti-N. caninum em vacas leiteiras das fazendas da microrregião de Lavras foi de 91,2 por cento (510/559) e nas vacas abatidas em matadouro e fetos de 97,2 por cento (559/575) e 12,7 por cento (64/503), respectivamente. Esses resultados indicam que a infecção por N. caninum está amplamente distribuída em rebanhos leiteiros da microrregião de Lavras, sul de Minas Gerais.