Avaliação de anticorpos monoclonais como marcadores diferenciais de meningites bacterianas e virais por meio de técnica imuno-histoquímica / Investigation on the monoclonal antibodies as differential markers for viral and bacterial meningitis by means of immnunohistochemistry technique

Desde 1996, o Laboratório de Anticorpos Monoclonais, Antígenos e Adjuvantes - Centro de Imunologia do Instituto Adolfo Lutz (CI-IAL) tem desenvolvido trabalhos na caracterização antigênica de cepas de Neisseria meningitidis utilizando-se painel de anticorpos monoclonais(AcMo) pré-estabelecido, e produção de novos monoclonais para a análise de cepas com perfis desconhecidos. AcMo foram obtidos das diferentes fusões realizadas no laboratórioutilizando-se células esplênicas e linfonodos poplíteos. Dois hibridomas murinos secretores de AcMo anti-N. meningitidis produzidos e caracterizados no CI-IAL têm sido avaliados por meio de estudo imuno-histoquímico (IHQ) no Centro de Patologia-Laboratório de Imunohistoquímica-IAL. Com a padronização da reação, estabeleceu-se um protocolo para efetuar apesquisa de antígenos de N. meningitidis por IHQ. Houve melhoria no diagnóstico histopatológicoda meningite meningocócica, sobretudo em situações em que não há confirmação da presença do microorganismo por técnicas biomoleculares, como PCR, utilizando-se AcMo específicos para antígenos de diferentes sorogrupos, sorotipos e subtipos de N. meningitidis. O resultado obtido nos primeiros testes mostrou-se promissor, e os dois AcMo demonstraram excelentesresultados. Não houve reatividade cruzada com meningite viral, S. pneumoniae, Rickettsia ou rubéola. Nos próximos estudos, é fundamental ampliar número de amostras, incluindo-se aquelas coletadas de pacientes com meningites meningocócicas e de indivíduos infectados com outros agentes patogênicos.

Since 1996, the Laboratory of Monoclonal Antibodies, Antigens and Adjuvants - Immunology Center of the Adolfo Lutz Institute (CI-IAL) has been developing works on the antigenic characterization of strains of Neisseria meningitidis using pre-established panel of monoclonal antibodies (AcMo) And production of new monoclonals for the analysis of strains with unknown profiles. AcMo were obtained from the different fusions performed in the laboratory using splenic and popliteal lymph nodes. Two murine hybridomas secreting anti-N mAb. Meningitidis produced and characterized in CI-IAL have been evaluated by means of an immunohistochemical study (IHC) at the Center for Pathology-Laboratory of Immunohistochemistry-IAL. With the standardization of the reaction, a protocol was established to carry out research of antigens of N. meningitidis by IHC. There was improvement in the histopathological diagnosis of meningococcal meningitis, especially in situations where there is no confirmation of the presence of the microorganism by biomolecular techniques, such as PCR, using specific mAbs specific for antigens of different serogroups, serotypes and subtypes of N. meningitidis. The results obtained in the first tests proved to be promising, and the two MAbs demonstrated excellent results. There was no cross reactivity with viral meningitis, S. pneumoniae, Rickettsia or rubella. In the next studies, it is essential to expand the number of samples, including those collected from patients with meningococcal meningitis and from individuals infected with other pathogens.

Investigation on the monoclonal antibodies as differential markers for viral and bacterial meningitis by means of immnunohistochemistry technique / Avaliação de anticorpos monoclonais como marcadores diferenciais de meningites bacterianas e virais por meio de técnica imuno-histoquímica

Since 1996, the Laboratory of Monoclonal Antibodies Antigens and Adjuvants - Immunology Center of Adolfo Lutz Institute (IC-IAL) has been working on N. meningitidis strains antigens characterization by using a predetermined monoclonal antibodies (MoAb) panel; and the new monoclonal production has been performed for characterizing strains with unknown profiles. MoAb were obtained from different fusions performed at IAL using spleen cells and popliteal lymph nodes. Two murine hybridomas secreting MoAb anti-N. meningitidis antigens, produced and characterized in the Laboratory of IC-IAL, are presently being evaluated by immunohistochemical (IHC) technique at Immunohistochemistry Laboratory - Pathology Center, IAL. After standardizing these reactions, a protocol for performing investigation on N.meningitidis antigens by using IHQ was established. An increment in the histopathological diagnosis of meningococcal meningitis was occurred, by using MoAb specific for antigens from N. meningitidis serogroups, serotypes and subtypes, mainly in those cases without microorganisms confirmation by biomolecular techniques as PCR. The results obtained in these first tests proved to be promising, and two MoAb showed excellent results. No cross-reactivity with viral meningitis, S. pneumoniae, Rickettsia or Rubella was detected. For the further studies, it is fundamental to increase the samples size, including samples from patients with meningococcal meningitis and from individuals infected with other pathogens.

Desde 1996, o Laboratório de Anticorpos Monoclonais, Antígenos e Adjuvantes - Centro de Imunologia do Instituto Adolfo Lutz (CI-IAL) tem desenvolvido trabalhos na caracterização antigênica de cepas de Neisseria meningitidis utilizando-se painel de anticorpos monoclonais (AcMo) pré-estabelecido, e produção de novos monoclonais para a análise de cepas com perfis desconhecidos. AcMo foram obtidos das diferentes fusões realizadas no laboratório utilizando-se células esplênicas e linfonodos poplíteos. Dois hibridomas murinos secretores de AcMo anti-N. meningitidis produzidos e caracterizados no CI-IAL têm sido avaliados por meio de estudo imuno-histoquímico (IHQ) no Centro de Patologia-Laboratório de Imunohistoquímica-IAL. Com a padronização da reação, estabeleceu-se um protocolo para efetuar a pesquisa de antígenos de N. meningitidis por IHQ. Houve melhoria no diagnóstico histopatológico da meningite meningocócica, sobretudo em situações em que não há confirmação da presença do microorganismo por técnicas biomoleculares, como PCR, utilizando-se AcMo específicos para antígenos de diferentes sorogrupos, sorotipos e subtipos de N. meningitidis. O resultado obtido nos primeiros testes mostrou-se promissor, e os dois AcMo demonstraram excelentes resultados. Não houve reatividade cruzada com meningite viral, S. pneumoniae, Rickettsia ou rubéola. Nos próximos estudos, é fundamental ampliar número de amostras, incluindo-se aquelas coletadas de pacientes com meningites meningocócicas e de indivíduos infectados com outros agentes patogênicos.

Associação multivariada entre alterações citológicas do colo uterino e comportamento de risco em mulheres profissionais do sexo / Multivariate association between the cervix cytological abnormalities and the risk behavior female sex workers

Neste trabalho foram identificadas as associações multivariadas entre as alterações citológicas (AC) do colo uterino e o comportamento de risco das profissionais do sexo (PS) atendidas no Centro de Referência em Saúde Sexual e Reprodutiva (CRESSER) – Sumaré, SP. Das 90 PS participantes, foram coletados dados sociocomportamentais por meio de questionário e amostras cérvico-vaginais para realização do exame de Papanicolaou. Para o teste estatístico foi utilizada a Análise Hierárquica de Agrupamentos (AHA). AC foram detectadas em 33 PS (36,7 por cento), sendo 18 (20,0 por cento) atipias de significado indeterminado possivelmente não neoplásica (ASC-US), quatro (4,4 por cento) atipias de significado indeterminado sem excluir lesão de alto grau (ASC-H), sete (7,8 por cento) lesão intraepitelial de baixo grau (LSIL) e quatro (4,4 por cento) lesão intraepitelial de alto grau (HSIL). Comparando os dados das PS com citologia normal e alterada, houve diferenças estatisticamente significativas quanto ao tabagismo, início da atividade sexual, relações com pessoas do mesmo sexo e detecção de Gardnerella vaginalis. AHA classificou as PS em quatro grupos distintos, em que as PS com idade média superior apresentaram maior proporção de DST, HIV, AC e pouco uso do preservativo. As PS com menor idade média mostraram menor frequência de AC, DST, atividade sexual precoce e HIV negativo.

Análise das discordâncias diagnósticas dos exames citopatológicos do Programa de Monitoramento Externo de Qualidade no Estado de São Paulo, Brasil, 2000-2010 / Analysis of the diagnostic disagreements in cytopathologic exams from the External Quality Assurance Program in the State of São Paulo, Brazil, 2000-2010

Introdução: O Programa de Monitoramento Externo de Qualidade (MEQ) dos exames citopatológicos cervicovaginais realizados pelo Sistema Único de Saúde (SUS ) foi proposto pelo Ministério da Saúde (MS) para melhorar o desempenho dos laboratórios de citologia da Rede Pública de Saúde. Objetivo: Avaliar as discordâncias diagnósticas dos exames citopatológicos cervicovaginais submetidos à revisão pelo Programa de MEQ do Estado de São Paulo, no período de 2000 a 2010. Método: Avaliação comparativa retrospectiva dos diagnósticos emitidos pelos lab-SUS e dos diagnósticos de revisão dos exames citopatológicos cervicovaginais. Resultados: Das 123.002 amostras revisadas,16.581 (13,48%) apresentaram discordância diagnóstica, sendo que, em 14.313 (11,64%) casos, houve divergência entre a conduta adotada e a preconizada pelo Instituto Nacional de Câncer José Alencar Gomes da Silva (INCA). Foram considerados exames falso-positivos 2.530 (2,06%) e falso-negativos 2.154 (1,75%). A sensibilidade foi de 92,02% e especificidade de 96,49%. Houve concordância boa entre os diagnósticos originais e de revisão (kappa=0,77).Conclusão: Além do conjunto de atividades básicas propostas pelo MS, o MEQ do Estado de São Paulo destaca asações educativas implementadas, adotadas para promover a educação continuada no sentido da uniformização de critérios citomorfológicos e a consequente redução dos resultados falso-negativos e falso-positivos