Obtainment and characterization of digestive aspartic proteases from the fish Caranx hippos (Linnaeus, 1766) / Obtenção e caracterização de proteases aspárticas digestórias do peixe Caranx hippos (Linnaeus, 1766)

This work aimed to obtain aspartic proteases of industrial and biotechnological interest from the stomach of the crevalle jack fish (Caranx hippos). In order to do so, a crude extract (CE) of the stomach was obtained and subjected to a partial purification by salting-out, which resulted in the enzyme extract (EE) obtainment. EE proteases were characterized physicochemically and by means of zymogram. In addition, the effect of chemical agents on their activity was also assessed. By means of salting-out it was possible to obtain a purification of 1.6 times with a yield of 49.4%. Two acid proteases present in the EE were observed in zymogram. The optimum temperature and thermal stability for EE acidic proteases were 55 ºC and 45 °C, respectively. The optimum pH and pH stability found for these enzymes were pH 1.5 and 7.0, respectively. Total inhibition of EE acid proteolytic activity was observed in the presence of pepstatin A. dithiothreitol (DTT) and Ca2+ did not promote a significant effect on enzyme activity. In the presence of heavy metals, such as Al3+, Cd2+ and Hg2+, EE acidic proteases showed more than 70% of their enzymatic activity. The results show that it is possible to obtain, from the stomach of C. hippos, aspartic proteases with high proteolytic activity and characteristics that demonstrate potential for industrial and biotechnological applications.

Este trabalho objetivou obter proteases aspárticas de interesse industrial e biotecnológico a partir do estômago do peixe xaréu (Caranx hippos). Para isso, foi obtido um extrato bruto do estômago, o qual foi submetido a uma purificação parcial por salting-out onde se obteve o extrato enzimático (EE). As proteases do EE foram caracterizadas físico-quimicamente e através de zimograma. Além disso, o efeito de agentes químicos sobre sua atividade também foi avaliado. Através de salting-out foi possível obter uma purificação de 1,6 vezes com rendimento de 49,4%. Foram observadas duas proteases ácidas presentes no EE através de zimograma. A temperatura ótima e a estabilidade térmica para as proteases ácidas do EE foram de 55 ºC e 45 °C, respectivamente. O pH ótimo e a estabilidade ao pH encontrados para estas enzimas foram o pH 1,5 e 7,0, respectivamente. Observou-se a inibição total da atividade proteolítica ácida do EE na presença de pepstatina A. O ditiotreitol (DTT) e o Ca2+ não promoveram efeito significativo na atividade enzimática. Na presença de metais pesados, como Al3+, Cd2+ e Hg2+, o EE manteve mais de 70% de atividade enzimática do EE. Os resultados mostram que é possível obter, a partir do estômago de C. hippos, proteases aspárticas com alta atividade proteolítica e características que demonstram potencial para aplicações industriais e biotecnológicas.

Carangoides bartholomaei (Cuvier, 1833) stomach: a source of aspartic proteases for industrial and biotechnological applications / Estômago de Carangoides bartholomaei (Cuvier, 1833): uma fonte de proteases aspárticas para aplicações industriais e biotecnológicas

The viscera and other residues from fish processing are commonly discarded by the fishing industry. These by products can be a source of digestive enzymes with industrial and biotechnological potential. In this study, we aimed at the extraction, characterization, and application of acidic proteases from the stomach of Carangoides bartholomaei (Cuvier, 1833). A crude extract from the stomachs was obtained and submitted to a partial purification process by salting-out, which obtained a Purified Extract (PE) with a specific proteolytic activity of 54.0 U·mg-¹. A purification of 1.9 fold and a yield of 41% were obtained. The PE presents two isoforms of acidic proteases and a maximum proteolytic activity at 45 °C and pH 2.0. The PE acidic proteolytic activity was stable in the pH range of 1.5 to 7.0 and temperature from 25 °C to 50 °C. Purified Extract kept 35% of its proteolytic activity at the presence of NaCl 15% (m/v) but was totally inhibited by pepstatin A. Purified Extract aspartic proteases presented high activity in the presence of heavy metals such as Cd2+, Hg2+, Pb2+, Al3+, and Cu2+. The utilization of PE as an enzymatic addictive in the collagen extraction from Nile tilapia scales has doubled the process yield. The results indicate the potential of these aspartic proteases for industrial and biotechnological applications.

As vísceras e outros resíduos do processamento de peixes são geralmente descartados pela indústria pesqueira. Esses resíduos podem ser uma fonte de enzimas digestivas com potencial industrial e biotecnológico. Neste estudo, objetivamos a extração, caracterização e aplicação de proteases aspárticas do estômago de Carangoides bartholomaei (Cuvier, 1833). Um extrato bruto do estômago foi obtido e submetido a um processo de purificação parcial, que obteve um Extrato Purificado (EP) com uma atividade proteolítica específica de 54,0 U·mg-¹. Foi obtida uma purificação de 1,9 vezes e um rendimento de 41%. O EP apresenta duas isoformas de proteases ácidas e atividade proteolítica máxima a 45 °C e pH 2,0. A atividade proteolítica do EP foi estável na faixa de pH de 1,5 a 7,0 e temperatura de 25 °C a 50 °C. O EP manteve 35% de sua atividade proteolítica na presença de NaCl a 15% (m/v), mas foi totalmente inibida pela pepstatina A. As proteases ácidas do EP apresentaram alta atividade na presença de metais pesados como o Cd2+, Hg2+, Pb2+, Al3+ e Cu2+. A utilização de EP como aditivo enzimático na extração de colágeno a partir de escamas de tilápia do Nilo dobrou o rendimento do processo. Os resultados indicam um potencial dessas proteases para aplicações industriais e biotecnológicas.

Obtainment and characterization of digestive aspartic proteases from the fish Caranx hippos (Linnaeus, 1766)

Abstract This work aimed to obtain aspartic proteases of industrial and biotechnological interest from the stomach of the crevalle jack fish (Caranx hippos). In order to do so, a crude extract (CE) of the stomach was obtained and subjected to a partial purification by salting-out, which resulted in the enzyme extract (EE) obtainment. EE proteases were characterized physicochemically and by means of zymogram. In addition, the effect of chemical agents on their activity was also assessed. By means of salting-out it was possible to obtain a purification of 1.6 times with a yield of 49.4%. Two acid proteases present in the EE were observed in zymogram. The optimum temperature and thermal stability for EE acidic proteases were 55 ºC and 45 °C, respectively. The optimum pH and pH stability found for these enzymes were pH 1.5 and 7.0, respectively. Total inhibition of EE acid proteolytic activity was observed in the presence of pepstatin A. dithiothreitol (DTT) and Ca2+ did not promote a significant effect on enzyme activity. In the presence of heavy metals, such as Al3+, Cd2+ and Hg2+, EE acidic proteases showed more than 70% of their enzymatic activity. The results show that it is possible to obtain, from the stomach of C. hippos, aspartic proteases with high proteolytic activity and characteristics that demonstrate potential for industrial and biotechnological applications.

Resumo Este trabalho objetivou obter proteases aspárticas de interesse industrial e biotecnológico a partir do estômago do peixe xaréu (Caranx hippos). Para isso, foi obtido um extrato bruto do estômago, o qual foi submetido a uma purificação parcial por salting-out onde se obteve o extrato enzimático (EE). As proteases do EE foram caracterizadas físico-quimicamente e através de zimograma. Além disso, o efeito de agentes químicos sobre sua atividade também foi avaliado. Através de salting-out foi possível obter uma purificação de 1,6 vezes com rendimento de 49,4%. Foram observadas duas proteases ácidas presentes no EE através de zimograma. A temperatura ótima e a estabilidade térmica para as proteases ácidas do EE foram de 55 ºC e 45 °C, respectivamente. O pH ótimo e a estabilidade ao pH encontrados para estas enzimas foram o pH 1,5 e 7,0, respectivamente. Observou-se a inibição total da atividade proteolítica ácida do EE na presença de pepstatina A. O ditiotreitol (DTT) e o Ca2+ não promoveram efeito significativo na atividade enzimática. Na presença de metais pesados, como Al3+, Cd2+ e Hg2+, o EE manteve mais de 70% de atividade enzimática do EE. Os resultados mostram que é possível obter, a partir do estômago de C. hippos, proteases aspárticas com alta atividade proteolítica e características que demonstram potencial para aplicações industriais e biotecnológicas.

Carangoides bartholomaei (Cuvier, 1833) stomach: a source of aspartic proteases for industrial and biotechnological applications

Abstract The viscera and other residues from fish processing are commonly discarded by the fishing industry. These by-products can be a source of digestive enzymes with industrial and biotechnological potential. In this study, we aimed at the extraction, characterization, and application of acidic proteases from the stomach of Carangoides bartholomaei (Cuvier, 1833). A crude extract from the stomachs was obtained and submitted to a partial purification process by salting-out, which obtained a Purified Extract (PE) with a specific proteolytic activity of 54.0 Umg-1. A purification of 1.9 fold and a yield of 41% were obtained. The PE presents two isoforms of acidic proteases and a maximum proteolytic activity at 45 °C and pH 2.0. The PE acidic proteolytic activity was stable in the pH range of 1.5 to 7.0 and temperature from 25 °C to 50 °C. Purified Extract kept 35% of its proteolytic activity at the presence of NaCl 15% (m/v) but was totally inhibited by pepstatin A. Purified Extract aspartic proteases presented high activity in the presence of heavy metals such as Cd2+, Hg2+, Pb2+, Al3+, and Cu2+. The utilization of PE as an enzymatic addictive in the collagen extraction from Nile tilapia scales has doubled the process yield. The results indicate the potential of these aspartic proteases for industrial and biotechnological applications.

Resumo As vísceras e outros resíduos do processamento de peixes são geralmente descartados pela indústria pesqueira. Esses resíduos podem ser uma fonte de enzimas digestivas com potencial industrial e biotecnológico. Neste estudo, objetivamos a extração, caracterização e aplicação de proteases aspárticas do estômago de Carangoides bartholomaei (Cuvier, 1833). Um extrato bruto do estômago foi obtido e submetido a um processo de purificação parcial, que obteve um Extrato Purificado (EP) com uma atividade proteolítica específica de 54,0 Umg-1. Foi obtida uma purificação de 1,9 vezes e um rendimento de 41%. O EP apresenta duas isoformas de proteases ácidas e atividade proteolítica máxima a 45 °C e pH 2,0. A atividade proteolítica do EP foi estável na faixa de pH de 1,5 a 7,0 e temperatura de 25 °C a 50 °C. O EP manteve 35% de sua atividade proteolítica na presença de NaCl a 15% (m/v), mas foi totalmente inibida pela pepstatina A. As proteases ácidas do EP apresentaram alta atividade na presença de metais pesados como o Cd2+, Hg2+, Pb2+, Al3+ e Cu2+. A utilização de EP como aditivo enzimático na extração de colágeno a partir de escamas de tilápia do Nilo dobrou o rendimento do processo. Os resultados indicam um potencial dessas proteases para aplicações industriais e biotecnológicas

Carangoides bartholomaei (Cuvier, 1833) stomach: a source of aspartic proteases for industrial and biotechnological applications / Estômago de Carangoides bartholomaei (Cuvier, 1833): uma fonte de proteases aspárticas para aplicações industriais e biotecnológicas

The viscera and other residues from fish processing are commonly discarded by the fishing industry. These byproducts can be a source of digestive enzymes with industrial and biotechnological potential. In this study, we aimed at the extraction, characterization, and application of acidic proteases from the stomach of Carangoides bartholomaei (Cuvier, 1833). A crude extract from the stomachs was obtained and submitted to a partial purification process by salting-out, which obtained a Purified Extract (PE) with a specific proteolytic activity of 54.0 U·mg-1. A purification of 1.9 fold and a yield of 41% were obtained. The PE presents two isoforms of acidic proteases and a maximum proteolytic activity at 45 °C and pH 2.0. The PE acidic proteolytic activity was stable in the pH range of 1.5 to 7.0 and temperature from 25 °C to 50 °C. Purified Extract kept 35% of its proteolytic activity at the presence of NaCl 15% (m/v) but was totally inhibited by pepstatin A. Purified Extract aspartic proteases presented high activity in the presence of heavy metals such as Cd2+, Hg2+, Pb2+, Al3+, and Cu2+. The utilization of PE as an enzymatic addictive in the collagen extraction from Nile tilapia scales has doubled the process yield. The results indicate the potential of these aspartic proteases for industrial and biotechnological applications.

As vísceras e outros resíduos do processamento de peixes são geralmente descartados pela indústria pesqueira. Esses resíduos podem ser uma fonte de enzimas digestivas com potencial industrial e biotecnológico. Neste estudo, objetivamos a extração, caracterização e aplicação de proteases aspárticas do estômago de Carangoides bartholomaei (Cuvier, 1833). Um extrato bruto do estômago foi obtido e submetido a um processo de purificação parcial, que obteve um Extrato Purificado (EP) com uma atividade proteolítica específica de 54,0 U·mg-1. Foi obtida uma purificação de 1,9 vezes e um rendimento de 41%. O EP apresenta duas isoformas de proteases ácidas e atividade proteolítica máxima a 45 °C e pH 2,0. A atividade proteolítica do EP foi estável na faixa de pH de 1,5 a 7,0 e temperatura de 25 °C a 50 °C. O EP manteve 35% de sua atividade proteolítica na presença de NaCl a 15% (m/v), mas foi totalmente inibida pela pepstatina A. As proteases ácidas do EP apresentaram alta atividade na presença de metais pesados como o Cd2+, Hg2+, Pb2+, Al3+ e Cu2+. A utilização de EP como aditivo enzimático na extração de colágeno a partir de escamas de tilápia do Nilo dobrou o rendimento do processo. Os resultados indicam um potencial dessas proteases para aplicações industriais e biotecnológicas.

Obtainment and characterization of digestive aspartic proteases from the fish Caranx hippos (Linnaeus, 1766) / Obtenção e caracterização de proteases aspárticas digestórias do peixe Caranx hippos (Linnaeus, 1766)

This work aimed to obtain aspartic proteases of industrial and biotechnological interest from the stomach of the crevalle jack fish (Caranx hippos). In order to do so, a crude extract (CE) of the stomach was obtained and subjected to a partial purification by salting-out, which resulted in the enzyme extract (EE) obtainment. EE proteases were characterized physicochemically and by means of zymogram. In addition, the effect of chemical agents on their activity was also assessed. By means of salting-out it was possible to obtain a purification of 1.6 times with a yield of 49.4%. Two acid proteases present in the EE were observed in zymogram. The optimum temperature and thermal stability for EE acidic proteases were 55 ºC and 45 °C, respectively. The optimum pH and pH stability found for these enzymes were pH 1.5 and 7.0, respectively. Total inhibition of EE acid proteolytic activity was observed in the presence of pepstatin A. dithiothreitol (DTT) and Ca2+ did not promote a significant effect on enzyme activity. In the presence of heavy metals, such as Al3+, Cd2+ and Hg2+, EE acidic proteases showed more than 70% of their enzymatic activity. The results show that it is possible to obtain, from the stomach of C. hippos, aspartic proteases with high proteolytic activity and characteristics that demonstrate potential for industrial and biotechnological applications.

Este trabalho objetivou obter proteases aspárticas de interesse industrial e biotecnológico a partir do estômago do peixe xaréu (Caranx hippos). Para isso, foi obtido um extrato bruto do estômago, o qual foi submetido a uma purificação parcial por salting-out onde se obteve o extrato enzimático (EE). As proteases do EE foram caracterizadas físico-quimicamente e através de zimograma. Além disso, o efeito de agentes químicos sobre sua atividade também foi avaliado. Através de salting-out foi possível obter uma purificação de 1,6 vezes com rendimento de 49,4%. Foram observadas duas proteases ácidas presentes no EE através de zimograma. A temperatura ótima e a estabilidade térmica para as proteases ácidas do EE foram de 55 ºC e 45 °C, respectivamente. O pH ótimo e a estabilidade ao pH encontrados para estas enzimas foram o pH 1,5 e 7,0, respectivamente. Observou-se a inibição total da atividade proteolítica ácida do EE na presença de pepstatina A. O ditiotreitol (DTT) e o Ca2+ não promoveram efeito significativo na atividade enzimática. Na presença de metais pesados, como Al3+, Cd2+ e Hg2+, o EE manteve mais de 70% de atividade enzimática do EE. Os resultados mostram que é possível obter, a partir do estômago de C. hippos, proteases aspárticas com alta atividade proteolítica e características que demonstram potencial para aplicações industriais e biotecnológicas.

Facial restoration after trauma - nasolabial in monkey bugio - Alouatta caraya (Humboldt, 1812) - first case report / [Restauração facial pós trauma nasolabial em macaco bugio - Alouatta caraya (Humboldt, 1812) - relato de caso]

In the last decades in the State of Mato Grosso do Sul - Brazil, the reduction in the preservation of areas due to the degradation of the biome and destruction of the natural environment has caused animals, mainly in the order of non-human primates, to come closer to towns and highways, increasing the number of accidents and in some cases, deaths. New surgical techniques have been developed that favor these species as explained in this report. The howler monkey patient was traumatized in the facial region damaging important vital structures such as facial muscle groups responsible for swallowing food, chewing, breathing, defense, and communication (vocalization and mimicry), in addition to the cartilaginous nasal structures. However, reconstructive facial surgical techniques, used on humans, showed satisfactory results from an anatomical, functional, and aesthetic point of view in howler monkey, with acceptance of the animal with a safe postoperative period for a full recovery of the primate patient.(AU)

Nas últimas décadas, no estado do Mato Grosso do Sul - Brasil, a redução de áreas preservadas pela degradação de biomas e pela destruição de habitat naturais tem favorecido a aproximação de animais - muitos desses, primatas não humanos - em cidades e rodovias, aumentando o número de acidentes e, em alguns casos, de mortes. Novas técnicas cirúrgicas têm sido desenvolvidas, favorecendo essas espécies, como reportado neste trabalho. O paciente macaco bugio foi traumatizado em região facial, envolvendo importantes estruturas vitais, como grupos musculares faciais responsáveis pela apreensão alimentar, mastigação, respiração, defesa e comunicação (vocalização e mímicas), além das estruturas cartilaginosas nasais. No entanto, técnicas cirúrgicas reconstrutivas em face aplicadas e descritas em humanos apresentaram resultados satisfatórios dos pontos de vista anatômico, fisiológico e visual nos macacos bugio, com aceitação deles diante do estresse, com pós-operatório seguro, resultando na reabilitação do paciente primata.(AU)

Oxidonitrergic and antioxidant effects of a low molecular weight peptide fraction from hardened bean (Phaseolus vulgaris) on endothelium

About 3000 tons of beans are not used in human food due to hardening. Several studies on bean-derived bioactive peptides have shown potential to treat some diseases, including those relying on oxidative dysfunctions. We assessed the effects of peptides extracted from hardened bean Phaseolus vulgaris (PV) on reactive oxygen species (ROS) and nitric oxide (NO) production, cytotoxic and cytoprotective effects in endothelial cells, and oxidonitrergic-dependent vasodilating effects. Extract was composed by peptide fraction <3 kDa (PV3) from hardened common bean residue. PV3 sequences were obtained and analyzed with bioinformatics. Human umbilical vein endothelial cells were treated with 10, 20, 30, and 250 µg/mL PV3. Oxidative stress was provoked by 3% H2O2. Cytotoxicity and cytoprotective effects were evaluated by MTT assay, whereas, ROS and NO were quantified using DHE and DAF-FM fluorescent probes by confocal microscopy. NO- and endothelium-dependent vasodilating effects of PV3 were assessed in isolated aortic rings. We found 35 peptides with an average mass of 1.14 kDa. There were no cell deaths with 10 and 20 μg/mL PV3. PV3 at 30 μg/mL increased cell viability, while cytotoxicity was observed only with 250 μg/mL PV3. PV3 at 10 μg/mL was able to protect cells from oxidative stress. PV3 also increased NO release without causing cell death. It also reduced relative ROS production induced by H2O2. PV3 vasodilating effects relied on endothelium-dependent NO release. PV3 obtained from low-commercial-value bean displays little cytotoxicity and exerts antioxidant effects, whereas it increases endothelial NO release.

Characterization of digestive enzymes from captive Brazilian flounder Paralichthys orbignyanus / Caracterização de enzimas digestivas do linguado brasileiro de cativeiro Paralichthys orbignyanus

Abstract Knowledge of specific enzyme activity, along with animal habits and digestive capacity is essential in formulating an appropriate diet for any species. In this study, we evaluated and characterized the activity of digestive enzymes present in the liver, intestine, and stomach of Paralichthys orbignyanus. The effects of pH and temperature on enzyme activity were also evaluated via the use of specific substrates. The use of specific substrates and inhibitors showed strong evidence of the presence of trypsin (BApNA= 0.51 ± 0.2 mU mg-1), chimotrypsin (SApNA= 2.62 ± 1.8 mU mg-1), and aminopeptidases (Leu-p-Nan =0.9709 ± 0.83 mU mg-1) in the intestine. Optimum pH for the activity of trypsin, chemotrypsin, leucino aminopeptidase, amilase, and pepsin were 9.5, 9.0, 8.0, 7.5, and 3.5, respectively, while optimum temperatures were 50, 50, 50, 40, and 45 °C, respectively. These results provide additional information regarding the biology of Brazilian flounder and can be used as a basis for further studies regarding fish feeding physiology.

Resumo O conhecimento da atividade enzimática é essencial para formular uma correta dieta específica para espécie, além de estarem correlacionadas com o hábito da alimentação e capacidade digestive. Neste estudo determinamos e caracterizamos a atividade enzimática presente no intestino, estômago e fígado do linguado Paralichthys orbignyanus. Os efeitos da temperatura e pH sobre a atividade enzimática também foram avaliados utilizando substratos específicos. O uso de substratos e inibidores específicos mostrou uma forte evidência da presença da tripsina (BApNA = 0,51 ± 0,2 mU mg-1), quimotripsina (SAPNA = 2,62 ± 1,8 mU mg-1), e as aminopeptidases (Leu-p-Nan = 0,97 ± 0,83 mU mg-1) no intestino. O pH ótimo observado para a atividade de tripsina, quimotripsina, leucino aminopeptidase, amilase e pepsina foi 9,5, 9,0, 8,0, 7,5 e 3,5, respectivamente. A temperatura ótima observada foi 50, 50, 50, 40 e 45 °C, respectivamente. Estes resultados fornecem informações adicionais sobre a biologia do linguado brasileiro e pode ser usado como base para novos estudos sobre fisiologia alimentar.

Predições da espectroscopia no infravermelho próximo podem determinar a digestibilidade e o consumo alimentar de cordeiros confinados / Near-IR spectroscopy predictions can determine the digestibility and feed intake from feedlot lambs

O presente trabalho teve como objetivo validar a eficácia do método de espectroscopia de reflectância do infravermelho proximal (NIRS) em predizer o consumo e a digestibilidade da MS e nutrientes de dietas para cordeiros confinados, em comparação ao método convencional de laboratório. Amostras das dietas fornecidas, sobras e fezes de 40 cordeiros Santa Inês foram submetidas a ambos os métodos e analisadas quanto aos teores de MS, MM, FDN, FDA, PB e EE, para futuros cálculos do consumo e da digestibilidade. A maioria dos coeficientes de correlação do modelo ficou na faixa de 0,66 a 0,81, mostrando-se adequados para a predição quantitativa. Os maiores coeficientes foram observados para teores de PB das dietas (0,85) e sobras (0,87). Foram encontradas altas correlações entre os métodos na predição do consumo (média de 0,93) e digestibilidade (média de 0,90) das dietas. As correlações entre as variáveis obtidas pela predição do NIRS e pelo método convencional foram adequadas, demonstrando que, independentemente do método, os teores nutricionais das dietas, das sobras e das fezes podem ser utilizados para calcular o consumo e a digestibilidade da MS e dos nutrientes das dietas para cordeiros confinados, sendo recomendado o método NIRS pela precisão, pela rapidez e pelo baixo custo em relação ao método convencional.(AU)

This research was carried out to validate the effectiveness of the Near-IR spectroscopy method in predicting intake and digestibility of DM and nutrients of diets for feedlot lambs, in order to compare with the conventional laboratory method. Samples of diets, ort,s and feces of forty Santa Ines lambs were subjected to both methods and analyzed for DM, MM, NDF, ADF, CP, and EE for future calculations for intake and digestibility. Most of the model's correlation coefficient was in the range of 0.66 to 0.81, being suitable for quantitative prediction. Highest values for CP content of 0.85 (diets) and 0.87 (orts) were observed. There were high correlations between the methods to predicting intake (average values of 0.93) and digestibility (average values of 0.93). Correlations between the variables obtained by the prediction of NIRS and the conventional method were adequate, showing that regardless of the method, the nutritional content of diets, orts and feces can be used to calculate the intake and digestibility of DM and nutrients of lambs' diets. The Near-IR spectroscopy method is recommended for accuracy, speed and low cost compared to conventional method.(AU)

Psittacara leucophthalmus (Aves: Psittacidae) como um novo hospedeiro de Paratanaisia bragai (Trematoda: Eucotylidae) no Brasil: achados clínicos e patológicos: relato de caso / Psittacara leucophthalmus as a new host of Paratanaisia bragai (Trematoda: Eucotylidae) in Brazil: clinical and pathological findings: case report

Paratanaisia bragai é um trematódeo que parasita rins e ureteres de aves domésticas e selvagens. Apesar de considerado pouco patogênico pode levar a complicações clínicas e morte em infecções severas. No presente estudo, um caso de parasitismo fatal em maritaca (Psittacara leucophthalmus) por P. bragai é relatado. A ave, oriunda da área urbana do município de Lavras, Minas Gerais, Brasil, teve manifestações clínicas de apatia, desidratação, dispneia e veio a óbito. Na necropsia foram observados rins aumentados de volume, pálidos, com superfície irregular e nodulações esbranquiçadas. Ao corte verificaram-se parasitos nos rins, que foram processados para montagem de lâminas permanentes e identificados segundo técnica de rotina como P. bragai. No exame histopatológico dos rins foram constatados infiltrado inflamatório linfoplasmocítico multifocal moderado, dilatação de túbulos e focos de regeneração tubular, associados a fibrose intersticial moderada no córtex renal. Na medula renal havia infiltrado de macrófagos, heterófilos, eosinófilos e células gigantes multinucleadas associado a parasitos em ductos coletores dilatados. O parasitismo de P. leucophthalmus por P. bragai é relatado pela primeira vez. A importância de se considerar este parasito entre as possibilidades diagnósticas em aves com insuficiência renal é brevemente discutida.(AU)

Paratanaisia bragai is a trematode parasite of the kidneys and ureters of poultry and wild birds. Despite its low pathogenicity, this parasite can lead to several clinical complications and death in heavy infections. In the present study, a fatal case of parasitism by P. bragai in a specimen of the White-eyed Parakeet, Psittacara leucophthalmus, is reported. The bird, coming from the urban area of the county of Lavras, Minas Gerais, Brazil, was clinically evaluated and revealed apathy, dehydration, dyspnea, and death. The gross findings were pale and enlarged kidneys, which also had irregular surface with whitish nodulations. Parasites were observed on cutting surface of the renal parenchyma. They were processed for assembly of permanent slides and identified as P. bragai according to routine technique. The histologic findings were mild multifocal lymphoplasmacytic infiltrate, tubular dilatation and foci of tubular regeneration related to mild interstitial fibrosis in the renal cortex, and infiltration of macrophages, heterophils, eosinophils and multinucleated giant cells associated with metazoan parasites in the collecting ducts in renal medulla. The parasitism of P. leucophthalmus by P. bragai is reported for the first time. The importance of considering this parasite among the diagnostic possibilities in birds with renal insufficiency is briefly discussed.(AU)

Glicerina associada à ureia na terminação de bovinos: parâmetros ruminais, digestibilidade e massa microbiana / Glycerin associated with urea in finishing cattle: ruminal fermentation, digestibility and microbial mass

O objetivo desta pesquisa foi verificar a combinação de glicerina com ureia, quanto aos parâmetros ruminais, à digestibilidade e à qualidade da massa microbiana. O trabalho foi conduzido na Unidade Animal de Estudos Digestivos e Metabólicos, pertencente à Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias-FCAV/Unesp, Câmpus de Jaboticabal. Seis animais da raça Nelore providos de cânulas ruminais foram utilizados para verificar os parâmetros pH, nitrogênio amoniacal, a digestibilidade e a massa microbiana, distribuídos em quadrado latino 6x6. Seis dietas com energia metabolizável e proteína bruta semelhantes foram formuladas, utilizando-se a proporção volumoso:concentrado de 30:70. O volumoso utilizado foi silagem de milho. Os concentrados utilizados foram compostos por milho, casca de soja, farelo de girassol, glicerina e ureia. Os tratamentos foram: C = controle; U = 1% de ureia; G10 = 10% de glicerina; GU10 = 1% de ureia e 10% de glicerina, G20 = 20% de glicerina e GU20 = 20% de glicerina e 1% de ureia. Houve influência das dietas no crescimento dos microrganismos ruminais, no pH e no nitrogênio amoniacal. Dietas com 20% de glicerina na matéria seca da dieta diminuem a população de protozoários ruminais. A inclusão de glicerina diminui a digestibilidade de componentes fibrosos da dieta.(AU)

The aim of this research was to investigate the combination of glycerol with urea as the ruminal parameters, digestibility and quality of microbial mass. The work was conducted at the Animal Unit of Digestive and Metabolic Studies belonging to the Faculty of Agricultural Sciences and Veterinárias-FCAV/Unesp campus Jaboticabal. Six animals fitted with rumen cannulas Nellore were used to verify the parameters pH, ammonia nitrogen, digestibility, and microbial mass distributed in a 6x6 Latin square. Six diets with similar metabolizable energy and crude protein were formulated using the forage:concentrate ratio of 30:70. The roughage used was corn silage. The concentrates used were composed of corn, soybean hulls, sunflower meal, glycerin and urea. The treatments were: C = control, U = 1 % urea, G10 = 10 % glycerin, GU10 = 1 % urea and 10 % glycerol, G20 = 20 % glycerin and GU20 = 20 % glycerin and 1 % urea. Diets with glycerin had lower digestibility of NDF and hemicellulose. There was no influence of diets on the growth of rumen microorganisms, pH and ammonia nitrogen. Diets with 20 % glycerin in the diet dry matter decrease the population of rumen protozoa. The addition of glycerol decreases the digestibility of fibrous components of the diet.(AU)

Glicerina bruta associada à ureia na terminação de bovinos: consumo, desempenho e características da carne / Glycerin associated with urea in finishing beef cattle: performance and meat characteristics

Objetivou-se nesta pesquisa avaliar os efeitos da combinação de glicerina bruta e ureia sobre o consumo, o desempenho produtivo e as características da carne de bovinos da raça Nelore. O estudo foi conduzido no confinamento do Setor de Digestibilidade, pertencente à Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias-FCAV/Unesp, Câmpus de Jaboticabal. Para tal, 28 novilhas, da raça Nelore (n=28, com aproximadamente 20 meses de idade, 278±5,6kg), foram aleatoriamente distribuídas em quatro tratamentos utilizando-se de delineamento inteiramente ao acaso. Quatro dietas com energia metabolizável e proteína bruta semelhantes foram formuladas utilizando-se a proporção volumoso:concentrado de 30:70. O volumoso empregado foi silagem de milho, e os concentrados foram compostos por milho grão moído, casca de soja, farelo de girassol, e a utilização ou não de acordo com o tratamento de glicerina e ureia. A introdução da glicerina e da ureia na dieta foi fixada, respectivamente, em 10 e 1% de inclusão na matéria seca da dieta. Os tratamentos foram: C = controle sem glicerina e ureia; U= 1% de ureia na matéria seca; G10= 10% de glicerina na matéria seca; GU10= 10% de glicerina e 1% de ureia na matéria seca. A introdução de 10% de glicerina bruta, com ou sem a presença de ureia, não modificou o consumo, tampouco nenhuma variável do desempenho produtivo (P>0,05). As características físico-químicas da carne, bem como o perfil de ácidos graxos, também não foram modificadas. O desempenho dos animais e as características da carne foram satisfatórios e dentro dos padrões esperados encontrados na literatura. Assim, a associação de glicerina com ureia pode ser uma estratégia viável em sistemas de produção de bovinos confinados.(AU)

The aim of this research was to investigate the effect of glycerol with urea, on the consumption and nutritional performance of Nelore cattle. The work was conducted within the confines of the digestibility sector, belonging to the Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinária - FCAV/Unesp campus Jaboticabal. Heifers, Nellore, with approximately 20 months of age with an average body weight of 278kg were allotted to four treatments using a completely randomized design. Four diets with similar metabolizable energy and crude protein were formulated using the forage: concentrate ratio of 30:70. The roughage used was corn silage. The concentrates used were composed of corn, soybean hulls, sunflower meal, and the use or not of glycerin and urea in accordance with the treatment. The introduction of glycerin and urea in the diet was fixed respectively at 10 and 1% inclusion in the diet dry matter, based on recommendations found in the literature for cattle confinados. The treatments were: C = control without glycerin and urea, U = 1 % urea in dry matter; G10 = 10% glycerin dry matter; GU10 = 10% glycerin and 1 % urea in dry matter. The diets were not different ( P>0.05 ) in regards to performance of animals or meat characteristics, so the use of glycerin or glycerine association with urea did not alter the growth traits of Nelore heifers finished in confinement. Thus the association of glycerol with urea may be a viable strategy in the production of cattle feedlot systems.(AU)

Electrocautery technique for proximal tibial epiphysiodesis in Labrador retriever puppies: experimental study / Técnica de eletrocauterização para epifisiodese proximal da tíbia em cães filhotes da raça Labrador Retriever: estudo experimental

There are few studies about the treatment options for cranial cruciate ligament rupture in growing dogs, especially with epiphysiodesis techniques. The aim of this study was to evaluate the electrocautery technique for proximal tibial epiphysiodesis in Labrador retriever puppies. The novel electrocautery technique was compared with the screw technique regarding the efficacy for tibial plateau leveling in growing dogs. Six healthy Labrador retriever puppies were divided into two groups. The screw technique was used in one group and the electrocautery technique was used in the other group. Both proximal tibial epiphysiodesis techniques for tibial plateau leveling were effective in achieving reduced tibial plateau angle and did not cause significant joint changes. The screw technique was more invasive and caused slightly greater morbidity than the electrocautery technique. The electrocautery technique seems to be a good alternative for proximal tibial epiphysiodesis in young dogs.(AU)

São descritos poucos estudos sobre as opções de tratamento para a ruptura do ligamento cruzado cranial em cães na fase de crescimento, especialmente em relação às técnicas de epifisiodese. O objetivo deste estudo foi avaliar a técnica de eletrocauterização para epifisiodese proximal da tíbia em cães filhotes da raça Labrador Retriever. A nova técnica de eletrocauterização foi comparada com a do parafuso em relação à eficácia para nivelamento do platô tibial em cães na fase de crescimento. Seis filhotes saudáveis da raça Labrador foram selecionados e divididos aleatoriamente em dois grupos. A técnica do parafuso foi usada em um grupo, enquanto no outro foi usada a da eletrocauterização. Ambas as técnicas de epifisiodese proximal da tíbia para nivelamento do platô tibial foram eficazes na redução do ângulo do platô tibial e não causaram alterações articulares importantes. A técnica do parafuso foi considerada mais invasiva e causou morbidade um pouco mais acentuada do que a da eletrocauterização. Assim, a técnica da eletrocauterização parece ser uma boa alternativa para a epifisiodese proximal da tíbia em cães jovens.(AU)

Avaliação da depressão miocárdica por meio do feature tracking bidimensional em cadelas com sepse / Assessment of myocardial depression by two-dimensional feature tracking in dogs with sepsis

O objetivo deste estudo prospectivo foi analisar a função do ventrículo esquerdo de cadelas que apresentavam sepse ou não e diagnosticar a depressão miocárdica de forma precoce, por meio do feature tracking imaging bidimensional (FTI-2D).Vinte e nove cadelas diagnosticadas com piometra, patologia usada como modelo experimental para sepse, foram avaliadas. Os animais foram submetidos ao exame ecocardiográfico convencional e ao FTI-2D e divididos em três grupos: grupo I (controle), grupo II (piometra sepse) e grupo III (piometra não sepse). Em relação aos parâmetros da ecocardiografia convencional, não houve diferença estatística entre os grupos avaliados. Quanto ao strain radial, os grupos II e III apresentaram função ventricular inferior no momento do diagnóstico (22,805,80 grupo I; 18,455,96 grupo II; 18,719,45 grupo III; P=0,032) e o grupo III manteve essa redução no retorno. Já no strain rate radial, apenas o grupo III obteve função ventricular inferior no momento do diagnóstico (1,900,57 grupo I; 1,910,70 grupo II, 1,570,53 grupo III; P=0,021). Para o strain longitudinal, observou-se função ventricular mais baixa nos grupos II e III no momento do diagnóstico (11,043,38 grupo I; 8,593,97 grupo II; 8,211,99; P=0,048) e após 10 dias de pós-cirúrgico (11,043,38 grupo I; 9,002,16 grupo II; 8,122,27 grupo III; p=0,048). O FTI-2D foi capaz de detectar alterações precoces da função ventricular esquerda, que não foram observadas no exame ecocardiográfico convencional, sugerindo quadro de depressão miocárdica, até mesmo em cadelas com piometra sem quadro clínico evidente de sepse. Assim, essa modalidade pode ser útil no diagnóstico, pois pode detectar alterações cardíacas precoces, possibilitando uma intervenção terapêutica rápida.(AU)

The aim of this prospective study was to analyze the left ventricular function of dogs who had sepsis or not and diagnose myocardial depression early on through the two-dimensional feature tracking imaging (2D-FTI). Twenty-nine dogs diagnosed with pyometra, a pathology used as an experimental model for sepsis were evaluated. The animals were subjected to conventional echocardiography and 2D-FTI, and divided into three groups: Group I (control), group II (sepsis pyometra) and group III (no sepsis pyometra). Regarding the parameters of conventional echocardiography, there was no statistical difference between the groups. As for the radial Strain, group II and III had lower ventricular function at diagnosis (22.805.80 Group I; 18.455.96 Group II; 18.719.45 Group III; P = 0.032) and group III maintained this reduction in return. Regarding the radial Strain rate, only the III group had lower ventricular function at diagnosis (1.900.57 Group I; 1.910.70 Group II, 1.570.53 Group III; P = 0.021). For the Longitudinal Strain we observed lower ventricular function in groups II and III at diagnosis (11.043.38 Group I, Group II 8.593.97, 8.211.99; P = 0.048) and ten days after surgery (11.043.38 Group I; 9.002.16 Group II; 8.122.27 Group III; P = 0.048). The 2D-FTI was able to detect early changes in left ventricular function, suggesting myocardial depression frame, even in female dogs with pyometra without clear clinical picture of sepsis, which were not seen in conventional echocardiography. Thus, this model can be useful in diagnosis, because it can detect early cardiac changes, enabling a rapid therapeutic intervention.(AU)

Troponina I como biomarcador de lesão cardíaca em cães com sepse / Troponin I as a biomarker of cardiac injury in dogs with sepsis

Avaliou-se a troponina I como biomarcador de lesão cardíaca na sepse, além de outros parâmetros hematológicos, em cadelas com piometra. Os grupos avaliados não diferiram estatisticamente na avaliação da concentração sérica da troponina I cardíaca. A quantidade total de leucócitos (mm3) e a porcentagem de bastonetes foram significativamente maiores no grupo sepse (23.221,74±16.848,80mm3 e 5,91±10,18%) quando comparado ao grupo não sepse (14.492,86±6.828,26mm3 e 1,93±1,64%) e ao grupo controle (10.320,00±3.999,02mm3 e 1,65±2,05%). Houve diferença significativa nas concentrações séricas da proteína C reativa (mg/dL) no grupo sepse (19,57±41,69md/dL) se comparado ao grupo não sepse (10,29±12,02mg/dL) e ao grupo controle (3,60±3,53mg/dL). Na avaliação da concentração sérica do lactato, houve diferença significativa entre cães com piometra e cães saudáveis, porém não houve diferença significativa entre os grupos sepse e não sepse. Os resultados do presente estudo indicam que a troponina I cardíaca não pôde ser considerada um biomarcador precoce para injúria miocárdica nos casos de cadela com piometra, pois os resultados das mensurações foram semelhantes entre os grupos, o que indica que pode não ter ocorrido lesão dos cardiomiócitos nessa fase. Já a proteína C reativa e o lactato são possíveis marcadores para inflamação sistêmica, uma vez que demonstraram concentrações séricas significativamente maiores em cadelas com piometra.(AU)

Troponin I as a biomarker of cardiac injury in sepsis, and other hematological parameters in female dogs with pyometra were evaluated. The groups did not differ in the assessment of serum cardiac troponin I. The total amount of leukocytes (mm3) and percentage of band cells was significantly higher in the sepsis group (23,221.74±16,848.80mm3 and 5.91±10.18%) compared to the non-sepsis group (14,492.86±6,828.26mm3 and 1.93±1.64%) and the control group (10,320.00±3,999.02mm3 and 1.65±2.05% respectively). There were significant differences in serum concentrations of C-reactive protein (mg / dL) in the sepsis group (19.57±41.69md / dL) compared to the non-sepsis group (10.29±12.02mg / dL) and control group (3.60±3.53mg / dL). In the evaluation of serum lactate concentration, there was a significant difference between dogs with pyometra and healthy dogs, but there was no significant difference between the sepsis and non-sepsis groups. The results of this study indicate that troponin I could not be considered an early biomarker of myocardial injury in cases of dogs with pyometra, because the results of the measurements were similar between groups, inferring that there may not have been an cardiomyocytes injury at this stage. C-reactive protein and lactate are potential markers for systemic inflammation, as demonstrated by significantly higher serum concentrations in dogs with pyometra.(AU)

Comparison of the proximal tibial angles between labrador retrievers and other dog breeds with and without cranial cruciate ligament rupture / Comparação dos ângulos da tíbia proximal entre cães da raça labrador retriever e cães de outras raças com e sem ruptura do ligamento cruzado cranial

The influence of the proximal tibia conformation in the rupture of the cranial cruciate ligament (CCL) in dogs is still controversial, especially in Labrador Retrievers. The aim of this study was to compare the angles of the proximal tibia between Labrador Retrievers and other large breeds of dogs, both groups with and without CCL rupture. Radiographic images of 64 stifle joints were obtained and divided into four groups of 16 images. Group 1 consisted of Labrador dogs without orthopedic disorders, group 2 consisted of Labrador dogs with CCL rupture, group 3 consisted of dogs of various large breeds without orthopedic disorders, and group 4 consisted of dogs of various large breeds with CCL rupture. The radiographs were performed in mediolateral projection with the stifle joint positioned at an approximate angle of 135°. The tibial plateau angle showed an overall average of 22.17°±4.20°, and there was no statistically significant difference between the groups. The patellar ligament angle in relation to the tibial plateau had a mean of 103°±4.20°, and there was a significant difference between groups 1 and 4. The patellar ligament angle in relation to the common tangent at the tibiofemoral contact point showed an average of 99.06°±6.08°, and there was no difference between the groups. The patellar ligament insertion angle had an overall average of 51.45°±5.06°, and there was a significant difference between the two groups of normal dogs and two groups of ruptured dogs. In conclusion, the tibial plateau angle, the patellar ligament angles and the patellar ligament insertion angle do not seem to be predisposing factors for rupture of the CCL in Labrador Retriever dogs. In general, there seems to be no relationship between the angles of the proximal tibia and the CCL rupture in dogs.

A influência da conformação da porção proximal da tíbia na ruptura do ligamento cruzado cranial (LCC) em cães ainda é controversa, principalmente na raça Labrador Retriever. O objetivo deste estudo foi comparar os ângulos da tíbia proximal entre cães da raça Labrador Retriever e cães de outras raças grandes com e sem ruptura do LCC. Foram selecionadas 64 imagens radiográficas da articulação do joelho de cães, que foram divididas em quatro grupos com 16 imagens cada. O grupo 1 foi formado por cães da raça Labrador sem alterações ortopédicas, o grupo 2 por cães da raça Labrador com ruptura do LCC, o grupo 3 por cães de várias raças grandes sem alterações ortopédicas, e o grupo 4 por cães de diversas raças grandes com ruptura do LCC. Foram realizadas radiografias na projeção mediolateral com a articulação do joelho posicionada em angulação média de 135°. O ângulo do platô tibial apresentou média geral de 22,17°±4,20°, não sendo encontrada diferença estatisticamente significativa entre os grupos. O ângulo do ligamento patelar em relação ao platô tibial apresentou média geral de 103,00°±4,20°, havendo diferença significativa entre os grupos 1 e 4. O ângulo do ligamento patelar em relação à tangente comum no ponto de contato tibiofemoral apresentou média geral de 99.06°±6.08°, não havendo diferença estatística entre os grupos. O ângulo de inserção do ligamento patelar teve média geral de 51.45°±5.06°, com diferença significativa entre os grupos dos cães normais e dos cães com ruptura. Conclui-se que o ângulo do platô tibial, os ângulos do ligamento patelar e o ângulo de inserção do ligamento patelar não parecem ser fatores predisponentes para a ruptura do LCC em cães da raça Labrador Retriever. Em geral, não há relação entre os ângulos da tíbia proximal e a ruptura do LCC em cães.

Quantification of ruminal microbiota and production of methane and carbonic dioxide from diets with inclusion of glycerin / Quantificação da microbiota ruminal e produção de metano e gás carbônico de dietas com inclusão de glicerina

The aim of this study was to quantify the liquid-associated bacteria and protozoa of the rumen and to evaluate the potential of in vitro production of gases CH4 and CO2 of diets with inclusion of glycerin for sheep. Two diets were formulated with a roughage:concentrate ratio of 20:80, according to the presence or absence of glycerin: G0 - control, without glycerin; and G10 - 10% glycerin as part of the concentrate. To quantify the liquid-associated bacteria and protozoa from the rumen and production of CH4 and CO2 gases, a completely randomized design was used. The diets had no effect (P>0.05) on production and composition of liquid-associated protozoa and bacteria from the rumen of lambs. Likewise, a (P>0.05) diet effect was not observed on production of CH4 and CO2 in vitro, which presented average concentrations of 24.55mL/g MS and 51.52mL/g MS, respectively. The use of 10% glycerin did not alter production or composition of ruminal microflora, and moreover, did not negatively impact the production of CH4 and CO2 gases in vitro.

Objetivou-se com este estudo quantificar as bactérias e protozoários líquido-associados do rúmen e avaliar o potencial de produção dos gases CH4 e CO2 in vitro de dietas com inclusão de glicerina para ovinos. Duas dietas foram formuladas, na proporção volumoso:concentrado de 20:80, conforme a presença ou ausência de glicerina: G0 - controle sem glicerina, G10 - 10% glicerina como parte do concentrado. Para a quantificação das bactérias e protozoários líquido-associados do rúmen e produção dos gases CH4 e CO2, utilizou-se o delineamento inteiramente ao acaso. Não foi observado efeito de dieta (P>0,05) sobre a produção e composição de protozoários e bactérias líquido-associados do rúmen de cordeiros. Da mesma forma, não houve efeito de dieta (P>0,05) sobre a produção de CH4 e CO2 in vitro, os quais apresentaram concentrações médias de 24,55mL/g MS e 51,52mL/g MS, respectivamente. O uso de 10% glicerina não altera a produção ou composição da microflora ruminal, e também não impacta negativamente a produção dos gases CH4 e CO2 in vitro.

A utilização de glicerina em dietas para bovinos altera a microbiota ruminal / The use of glycerin in cattle diets alter the rumen microflora

Objetivou-se com este estudo avaliar a produção e composição das bactérias e protozoários ruminais de bovinos alimentados com glicerina. Cinco bovinos machos, providos de cânulas ruminais, foram distribuídos em delineamento experimental quadrado latino (5 x 5). As dietas foram formuladas com a inclusão de 0, 5, 10, 15 e 20% de glicerina na matéria seca (MS). Foram colhidas amostras de conteúdo ruminal nos tempos 0, 2, 5 e 8 horas após a alimentação e, em seguida, separaram-se as frações sólida e líquida para determinação das bactérias líquido-associadas (BLA), protozoários líquido-associados (PLA) e bactérias sólido-aderidas (BSA). Com o acréscimo da concentração de glicerina na dieta, houve redução linear na produção de MS das BLA e PLA (P<0,05). No tratamento sem inclusão de glicerina, as quantidades de MS foram de 1.048,5 e 2.199,5 mg/L para BLA e PLA, respectivamente, enquanto no tratamento com 20% de glicerina foram, respectivamente, 756,9 e 1.619,9 mg/L para BLA e PLA. Além disso, houve redução nos teores de matéria orgânica (MO) e aumento linear do teor de nitrogênio (N) das BLA com o aumento da concentração de glicerina na dieta. A composição dos protozoários não foi alterada em função dos tratamentos (em média 47,3% MO e 7,2% N). A produção das BSA não foi alterada (P>0,05) com o incremento da glicerina na dieta, e os valores médios para as quantidades de MS, MO e N foram, respectivamente, 3.131,0; 2.463,1 e 294,2mg/kg. Houve aumento linear no teor de N das BSA de 10,8 para 11,3% nos tratamentos com 0 e 20% de glicerina, respectivamente. Não foi verificado efeito do tempo de colheita para as BSA, ao passo que, para as BLA, ocorreu redução na produção de MO e nos teores de MO e N. A utilização de altas concentrações de glicerina na dieta de bovinos necessita de maiores estudos, pois há alteração da produção e composição dos microrganismos ruminais...

The aim of this study was to evaluate the production and composition of ruminal bacteria and protozoa in cattle fed with glycerin. Five steers, provided with ruminal cannulas, were distributed in a latin square design (5 x 5). Diets were formulated to contain 0, 5, 10, 15, or 20% of glycerin on dry matter (DM) basis. Rumen content samples were collected at 0, 2, 5 and 8 hours after feeding that were separated in solid and liquid phases to determine the amount of liquid associated bacteria (LAB), liquid associated protozoa (LAP) and particle-associated bacteria (PAB). With the increase of glycerin concentration in the diet there was a linear reduction in DM production of LAB and LAP (P<0.05). In the treatment without glycerin the amount of DM was 1048.5 and 2199.5 mg/L for LAB and LAP respectively, while in the treatment with 20% of glycerin it was respectively 756.9 and 1619.9 mg/L for LAB and LAP. Furthermore, there was a reduction in the content of organic matter (OM) and a linear increase in nitrogen (N) of LAB with increasing concentration of glycerin in the diet. The composition of protozoa was not altered by the treatments (average 47.3% OM and 7.2% N). The production of PAB was not affected (P>0.05) by the increasing dietary glycerin and mean values for the quantities of DM, OM and N were respectively 3131.0, 2463.1 and 294.2 mg/kg. There was a linear increase in N content of PAB from 10.8 to 11.3% for treatments with 0 and 20% of glycerin respectively. There was no effect on harvest time for PAB, while for LAB there was reduction in OM production and in OM and N contents. The use of high concentrations of glycerin in the cattle diet requires further study, because there are changes in the production and composition of rumen microorganisms...

Morphometric evaluation of nitric oxide synthase isoforms and their cytokine regulators predict pulmonary dysfunction and survival in systemic sclerosis

Because histopathological changes in the lungs of patients with systemic sclerosis (SSc) are consistent with alveolar and vessel cell damage, we presume that this interaction can be characterized by analyzing the expression of proteins regulating nitric oxide (NO) and plasminogen activator inhibitor-1 (PAI-1) synthesis. To validate the importance of alveolar-vascular interactions and to explore the quantitative relationship between these factors and other clinical data, we studied these markers in 23 cases of SSc nonspecific interstitial pneumonia (SSc-NSIP). We used immunohistochemistry and morphometry to evaluate the amount of cells in alveolar septa and vessels staining for NO synthase (NOS) and PAI-1, and the outcomes of our study were cellular and fibrotic NSIP, pulmonary function tests, and survival time until death. General linear model analysis demonstrated that staining for septal inducible NOS (iNOS) related significantly to staining of septal cells for interleukin (IL)-4 and to septal IL-13. In univariate analysis, higher levels of septal and vascular cells staining for iNOS were associated with a smaller percentage of septal and vascular cells expressing fibroblast growth factor and myofibroblast proliferation, respectively. Multivariate Cox model analysis demonstrated that, after controlling for SSc-NSIP histological patterns, just three variables were significantly associated with survival time: septal iNOS (P=0.04), septal IL-13 (P=0.03), and septal basic fibroblast growth factor (bFGF; P=0.02). Augmented NOS, IL-13, and bFGF in SSc-NSIP histological patterns suggest a possible functional role for iNOS in SSc. In addition, the extent of iNOS, PAI-1, and IL-4 staining in alveolar septa and vessels provides a possible independent diagnostic measure for the degree of pulmonary dysfunction and fibrosis with an impact on the survival of patients with SSc.