Biomarkers of therapeutic responses in chronic Chagas disease: state of the art and future perspectives

The definition of a biomarker provided by the World Health Organization is any substance, structure, or process that can be measured in the body, or its products and influence, or predict the incidence or outcome of disease. Currently, the lack of prognosis and progression markers for chronic Chagas disease has posed limitations for testing new drugs to treat this neglected disease. Several molecules and techniques to detect biomarkers in Trypanosoma cruzi-infected patients have been proposed to assess whether specific treatment with benznidazole or nifurtimox is effective. Isolated proteins or protein groups from different T. cruzi stages and parasite-derived glycoproteins and synthetic neoglycoconjugates have been demonstrated to be useful for this purpose, as have nucleic acid amplification techniques. The amplification of T. cruzi DNA using the real-time polymerase chain reaction method is the leading test for assessing responses to treatment in a short period of time. Biochemical biomarkers have been tested early after specific treatment. Cytokines and surface markers represent promising molecules for the characterisation of host cellular responses, but need to be further assessed.

Caracterización parcial de los genes codificantes para la proteína de choque térmico HSP70 de Trypanosoma rangeli / Partial characterization of coding genes for Trypanosoma rangeli HSP70

Objetivo: dada la relevancia inmunológica de la región amino terminal de la proteína HSP70 de la Tripanosoma cruzi, así como el hecho de que la inmunización de ratones con Tripanosoma rangeli protege a los animales contra la infección por T. cruzi, el presente trabajo se centró en el aislamiento y caracterización molecular del fragmento homólogo en T. rangeli. Materiales y métodos: la región amino terminal del gen codificante para la HSP70 de T. rangeli fue amplificada mediante PCR utilizando los oligonucleotidos TrHSP70f/R2, diseñados con base en la secuencia homóloga de T. cruzi. El fragmento amplificado fue purificado, clonado en el vector pGEM® –Teasy (Promega) y secuenciado en un 373 Automatic DNA sequencer (Applied Biosystems). La organización genómica de los genes HSP70 se determino mediante ensayos de “Southern blot” y PFGE. Resultados: los genes HSP70 de T. rangeli tienen un tamaño aproximado de 2.400 pb, se encuentran repetidos en tandem y se localizan en un cromosoma de 1.030 y 1.090 Kb en la cepa H14, KP1(+) y de 1.100 KB en la cepa Tre, KP1 (-). La secuencia de nucleótidos correspondiente a la región amino terminal de la proteína tiene una identidad del 99 por ciento entre las cepas H14 y Tre de T. rangeli y del 94 por ciento entre éstas y T. cruzi, preséntando además polimorfismos para diversas enzimas de restricción. La secuencia de amiácidos de dicha región entre ambos parásitos tiene una identidad del 95 por ciento. Conclusiones: el extremo amino terminal de las proteínas HSP70 de T. cruzi y T. rangeli guardan una elevada identidad de secuencia lo que abre un camino a la posible utilización de la HSP70 de T. rangeli en inmunoterapia. Asimismo y dado que en esta región se localizan epítopes B y T inductores de respuesta inmune en pacientes chagásicos, la HSP70 puede estar implicada en la reacción inmunológica cruzada entre estos parásitos