RESUMO
Abstract Heartworm disease is a health problem for dogs and cats, especially in tropical and subtropical coastal regions of the world. Some studies have compared the efficacy of the diagnostic techniques used to detect this parasitosis. Therefore, the aim of this study was to compare parasitological optical microscopy (POM), serological and molecular techniques for diagnosing canine heartworm infection. Samples were collected between July 2015 and April 2016 from 103 dogs in Cabo Frio, RJ, Brazil. The wet fresh blood, thick smears, thin smears and modified Knott's test were used to detect microfilariae. ELISA (Snap™ 4Dx ® IDEXX) was used to detect antigens and the polymerase chain reaction (PCR) was used to detect DNA and enable sequencing for species differentiation and confirmation. 19.4% of samples were positive according to microscopy. Through PCR, 15.5% of the total were positive. Using ELISA, the positivity rate was 29.1%. Occult heartworm infection was detected in 11.6% of the samples. ELISA sensitivity was shown to be higher than PCR or microscopy (P = 0.001). Sequencing of samples confirmed the presence of Dirofilaria immitis and Acanthocheilonema reconditum . ELISA was more effective for serological diagnosis canine heartworm and should be used in clinical and epidemiological studies.
Resumo A dirofilariose é um problema de saúde para cães e gatos, especialmente nas regiões costeiras tropicais e subtropicais do mundo. Alguns estudos compararam a eficácia das técnicas de diagnóstico usadas para detectar esta parasitose. Portanto, o objetivo deste estudo foi comparar a microscopia óptica (OM), técnicas sorológicas e moleculares para o diagnóstico de infecção por Dirofilaria immitis . Foram coletadas, entre julho de 2015 e abril de 2016, amostras de 103 cães em Cabo Frio, RJ, Brasil. O exame direto, distensão espessa, distensão delgada e o teste de Knott modificado foram usados para detectar microfilárias. O ELISA (Snap ™ 4Dx ® IDEXX) foi usado para detectar antígenos e a reação em cadeia da polimerase (PCR) foi usada para detectar DNA e o sequenciamento para diferenciação e confirmação de espécie. Das amostras, 19,4% foram positivas de acordo com a microscopia. Por PCR, 15,5% do total foram positivos. Utilizando o ELISA, a taxa de positividade foi de 29,1%. Dirofilariose oculta foi detectada em 11,6% das amostras. A sensibilidade ao ELISA mostrou-se superior à PCR ou microscopia (P = 0,001). O sequenciamento das amostras confirmou a presença de Dirofilaria immitis e Acanthocheilonema reconditum . O ELISA foi mais eficaz no diagnóstico sorológico de dirofilariose canina e deve ser usado em estudos clínicos e epidemiológicos.
Assuntos
Animais , Masculino , Feminino , Cães , Dirofilaria immitis/isolamento & purificação , Dirofilariose/diagnóstico , Doenças do Cão/diagnóstico , Brasil , Ensaio de Imunoadsorção Enzimática , Sensibilidade e Especificidade , Análise de Sequência de DNA , Dirofilaria immitis/genética , Dirofilaria immitis/imunologiaRESUMO
A espécie Dirofilaria immitis parasita principalmente canídeos, podendo infectar também gatos embora raramente (Felis catus Linnaeus, 1758). Seus hospedeiros intermediários podem ser diferentes espécies de culicídeos. Motivados por um caso autóctone de dirofilariose felina, encontrado na região do Engenho Novo - RJ (S 22º 90' e WO 43º 27'), estudou-se: 1) a fauna culicídica local e; 2) a ocorrência de cães portadores de microfilárias. Os estudos sobre a fauna culicídica foram conduzidos, de abril de 2003 a maio de 2004, realizando-se capturas peridomiciliares e intradomiciliares. Foram capturados 672 indivíduos (fêmeas) das espécies Aedes aegypti (Linnaeus) (561/672 - 83,5%), Culex quinquefasciatus Say (96/672 - 14,3%), Aedes (Oc.) scapularis (Rondani) (12/672 - 1,8%) e Aedes albopictus (Skuse) (3/672 - 0,4%). Apenas as espécies A. aegypti e C. quinquefasciatus foram capturadas em todos os meses do ano. Foram coletadas 235 amostras de sangue canino, durante a Campanha de Vacinação "Rio Sem Raiva", em outubro de 2003. Nenhuma amostra examinada continha microfilárias (técnicas de Knott e NAN), apesar de apenas 3,4% dos cães receberem quimioprofilaxia. A presença de culicídeos vetores, associada à possibilidade de mobilidade dos cães, pode ter favorecido o aparecimento da infecção felina na região.
Dirofilaria immitis preferably infects canids and can, in lower frequency, be found in cats (Felis catus Linnaeus, 1758). The parasite may be transmitted by various Culicidae species. Motivated by an autochtone feline heartworm case diagnosed in the region of Engenho Novo - RJ (S 22º 90' e WO 43º 27'), the following issues were surveyed: 1) the local Culicidae fauna and; 2) the ocurrence of microfilaremic dogs. The mosquito study was conducted from April 2003 through May 2004, by peri-domiciliary and intra-domiciliary captures. A total of 672 mosquitoes (female) of the following species were caught: Aedes aegypti (Linnaeus) (561/672 - 83.5%); Culex quinquefasciatus Say (96/672 - 14.3%); Aedes (Oc.) scapularis (Rondani) (12/672 - 1.8%) and Aedes albopictus (Skuse) (3/672 - 0.4%). Only A. aegypti and C. quinquefasciatus specimens were captured year-round. A total of 235 canine blood samples were collected during the Campanha de Vacinação "Rio Sem Raiva" in October 2003. No microfilaria could be found in any of the examined samples (Knott´s and NAN techniques), even though only 3.4% of the dogs received chemoprophylaxis and the majority of them frequently traveled to endemic areas. The presence of vectors associated to a possible dog mobility, may have provided the right scenario for the feline D. immitis infection to happen in the studied area.
Assuntos
Animais , Gatos , Cães , Feminino , Masculino , Doenças do Gato/transmissão , Dirofilariose/transmissãoRESUMO
O diagnóstico coproparasitológico é o recurso laboratorial mais utilizado para detecção de infecções parasitárias gastrintestinais. A técnica de centrífugo-flutuação com sulfato de zinco (FAUST et al., 1938) é técnica de eleição no diagnóstico de estruturas parasitárias leves, podendo também ser usada para detecção de estruturas pesadas. Para avaliar o desempenho dessa técnica no diagnóstico das helmintoses gastrintestinais de gatos domésticos, foram realizados exames coproparasitológicos de 13 gatos domésticos 15 dias antes de suas mortes. A necropsia, os helmintos adultos encontrados no tubo digestivo e fígado foram contados, fixados e identificados. A técnica utilizada mostrou-se capaz de recuperar ovos de todos os nematóides e trematódeos encontrados, mas não foi adequada para a recuperação de cestóides.
Fecal examinations are the most commonly used laboratory tool for diagnosis of gastrointestinal nematode parasitic infections. Zinc centrifugal floatation technique (FAUST et al., 1938) is not only considered to be efficient in detecting light parasitic structures, but it is also used for recovery of heavy structures. In order to evaluate the performance of that technique in the diagnosis of domestic cats' gastrointestinal helminthiasis, fecal examinations of 13 animals were carried out 15 days prior to the animals' deaths. At necropsy, adult gastrointestinal parasites found were collected, counted, fixed and identified. The studied technique was able to recover eggs from all detected nematodes and trematodes, but appeared inappropriate for recovery of cestode eggs.
RESUMO
Amostras fecais de cäes com até seis meses de idade, com gastrenterite, foram testadas para a presença do parvovírus canino (CPV) pelo teste de hemaglutinaçäo (HA) e confirmadas como positivas pelo teste de inibiçäo da hemaglutinaçäo. Noventa e duas das 208 amostras recebidas no período de abril de 1995 a novembro de 2000 foram positivas. Aproximadamente, 76 por cento das amostras foram obtidas de cäes entre dois e quatro meses de idade. Entre os 92 animais positivos para CPV-2,28 tinham sido vacinados, e para 11 destes o resultado positivo do HA poderia ser devido a detecçäo do vírus vacinal. Através da reaçäo em cadeia pela polimerase, pode-se confirmar a infecçäo pelo vírus selvagem em nove dos 11 animais vacinados. Neste estudo näo foi possível observar que fatores como sexo ou raça possam ser importantes no desenvolvimento da doença. No período estudado, o parvovírus canino pode ser detectado, em todos os meses do ano, näo apresentando sazonalidade definida.
Assuntos
Animais , Cães , Gastroenterite , Infecções por Parvoviridae/diagnóstico , Infecções por Parvoviridae/veterinária , Parvovirus Canino , FezesRESUMO
Foram estudadas lesöes renais de 17 cäes da raça Beaglo, infectados experimentalmente com o parasita Dirofilaria immitis através de transplante de parasita adulto ou por injeçäo subcutânea de larva infectante, com o período de infecçäo variando de 111 a 923 dias. Os animais foram separados em seis grupos de acordo com o tempo de duraçäo e tipo de infecçäo e um grupo controle composto por 11 cäes da mesma raça. As amostras renais foram obtidas por necropsia e examinadas através da microscopia óptica pelas coloraçöes de hematoxilina-eosina, ácido periódico de Schiff, prata-metanamina e tricrômico de Masson. Nos grupos de cäes infectados a alteraçäo glomerular mais freqüente foi o aumento da celularidade mesangial, associado ou näo à presença de microfilárias intracapilares ou intersticiais. Nos grupos com tempo de infecçäo acima de 365 dias foram observadas alteraçöes glomerulares como espessamento de membrana basal glomerular e nefrite intersticial. Esses achados preliminares confirmam relatos anteriores sugerindo que a glomerulonefrite e a nefrite intersticial säo as principais lesöes renais associadas a cäes infectados por D. immitis.