RESUMO
El tratamiento de la Leucemia Mieloide Crónica (LMC) con Imatinib puede fracasar por mutaciones en el dominio tirosina quinasa o amplificación del gen BCR/ABL. Otros mecanismos de refractariedad pueden deberse a los genes de resistencia múltiple a drogas (MDR). Objetivo: Investigar en la línea celular K562 (LMC resistente al Imatinib), la expresión del gen MDRl y los efectos de su inhibición con Ciclosporina A (CyA). Métodos: Se sintetizó ADNc por retrotranscripción del ARN total y se amplificaron por RT-PCR los genes BCR/ABL y MDRl con primers específicos. Se verificó la expresión de la glicoproteína P-gp (producto del gen MDRl) por inmunohistoquímica con 2 anticuerpos monoclonales (C494 y C2l9). Las células K562 fueron enfrentadas (24hs) con Imatinib (2uM), CyA (3ug/ml), Imatinib+Cy A. Se evaluaron apoptosis con naranja de acridina/bromuro de etidio (microscopía de fluorescencia) y función farmacorresistente de P-gp con Rhodamina-l23 (citometría de flujo). Resultados: La expresión del gen MDRl se confirmó tanto por RT-PCRcomo por inmunhistoquímica. La prueba funcional con Rhodamina-l23 indicó que la P-gp fue inhibida por CyA o hipotermia. El tratamiento con Imatinib+Cy A triplicó el porcentaje de apoptosis comparado con Imatinib solo. Conclusión: El gen MDRl jugaría un rol adicional en la resistencia al Imatinib. La Cy A u otros inhibido res de la P-gp, facilitaría la acción del Imatinib, induciendo mayor porcentaje de apoptosis en células BCR/ ABL positivas.