Purificación parcial y empleo de fracciones glicosídicas de Trypanosoma cruzi en el diagnóstico de la enfermedad de Chagas / Partial purification and use of Trypanosoma cruzi glycosidic fractions for Chagas disease diagnosis

En el diagnóstico serológico de la enfermedad de Chagas se emplean fracciones proteicas y glicoproteicas de Trypanosoma cruzi, las cuales se degradan por la acción de proteasas endógenas del parásito, esto amerita el uso de inhibidores para su conservación encareciendo el costo del antígeno. La posibilidad de utilizar fracciones glicosídicas del parásito, resistentes a la acción de proteasas resolvería el problema, permitiendo obtener antígenos estables, de alta sensibilidad y a bajo costo. Esta alternativa se ve reforzada por la existencia en sueros de pacientes chagásicos de anticuerpos anti-galactosil dirigidas contra fracciones oligosacáridas de T. cruzi. El objetivo de este trabajo fue obtener fracciones glicosídicas de T. cruzi y evaluar su utilidad en el diagnóstico serológico de la enfermedad de Chagas. Se emplearon masas de parásitos de los cuatro estadios de T. cruzi, a partir de las cuales se obtuvieron proteínas y glicoproteínas totales, así como fracciones glicosídicas, éstas últimas mediante proteólisis exhaustiva con Proteinasa K. Se analizaron las fracciones proteicas, glicoproteicas y glicosídicas mediante SDS-PAGE y tinción específica para proteínas (Coomassie/Plata), así como para glico-proteínas y fracciones glicosídicas (APABGP). Se determinó la naturaleza antigénica de las diferentes fracciones mediante Western Blot y luminografía, utilizando suero control hiperinmune anti-epimastigota y "pool" de sueros chagásicos humanos. Finalmente se estudió, mediante ELISA, la capacidad discriminativa de las fracciones glicosídicas de los diferentes estadios para sueros de pacientes chagásicos y no chagásicos y la sensibilidad de las fracciones respecto al suero control. Se evidencia que: a) existen polipéptidos, glicopéptidos y fracciones glicosídicas comunes y específicos de estadio; b) los epimastigotas y metacíclicos son más ricos en glicoproteínas antigénicas respecto a los tripomastigotas y amastigotas; c) existe una relación entre el patrón de fracciones glicosídicas y el tipo de hospedador; d) las fracciones glicosídicas sirven como antígenos para discriminar mediante ELISA pacientes chagásicos y no chagásicos, pero muestran títulos menores que los antígenos proteicos y glicoproteicos totales. Se concluye que es posible desarrollar un kit diagnóstico para...

Infección urinaria por Haemophilus influenzae / Urinary infection by Haemophilus influenzae

En 13137 urocultivos procesados en el período 1982-1984 utilizando una metodologia que incluye el medio gelosa chocolate (GC) se detectan 10(0.07 por cento) casos producidos por Haemophilus influenzae, ocurriendo 9 de ellos en niños cuya edad oscila entre 1-11 años.De los aislamientos 9 resultan no tipiables serológicamente.A cada uno de los biotipos II y III pertenecem 4 de los aislamientos.Los 10 aislamientos.Los 10 aislamentos son uniformemente sensibles a 13 antibióticos estudiados.Son llamativos los altos niveles de sensibilidad con porcentajes acumulativos de inhibición para el 100 por cento de los aislamientos para cefoperazona (0.006µgr/ml), cefotaxima(0.025µgr/ml) y ampicilina (0.2µgr/ml), logrando esta última curación clínica y bacteriológica en 6 casos en los cuales se utilizara. El análisis de costo y la relación costo-efectividad estabelece un valor elevado ($588) por caso.El urocultivo convencional negativo en orinas con piuria estéril y/o positividad microscópica de la orina sin centrifugar, especialmente si provienen de niñas con antecedentes de infección urinaria recurrente y/o anormalidades del tracto urinario justifican la inclusión del agar chocolate en el urocultivo para descartar el H.influenzae como agente etiológico de la infección.