Desenvolvimento de um ensaio imunofluorométrico para a medida da molécula inteira da gonaatrofina coriônica (hCG) no soro / Development of an immunofluorometric assay for serum measurement of the whole molecule of human chorionic gonatropin (hCG)

Tendo como base dois anticorpos monoclonais produzidos em nosso laboratório, um específico contra a subunidade beta de hCG/LH (E2P1) e outro específico contra um epítopo descontínuo presente na molécula inteira da hCG (F1P16), desenvolvemos um ensaio imunométrico específico para a molécula inteira de hCG. O monoclonal E2P1 foi adsorvido a placas de microtitulaçåo e o monoclonal F1P16 foi marcado com Európio; o ensaio consta de duas incubaçöes sequenciais de 1h cada e leitura final de fluorescência em fluorômetro tempo-sincronizado. A sensibilidade calculada foi de 1,8 UI/L; o perfil de imprecisåo mostrou erro inferior a 19 por cento entre os valores de 5 a 3000 UI/L; o coeficiente de variaçåo interensaio mostrou-se de 8 por cento para uma amostra de valor médio de 1065 UI/L (n=15) e de 13,9 por cento para outra de valor médio de 28 UI/L (n=15). A comparaçåo com método equivalente (Delphia hCG) nåo mostrou nenhuma discordância em 300 amostras dosadas sequencialmente, sendo que em 1388 amostras onde os valores eram iguais ou superiores a 20 UI/L pelo Delfia, obtivemos alto índice de correlaçåo (r=0,988). Os valores obtidos pelo nosso método mostraram-se discreta, porém, significativamente mais elevados, com medianas de 4610 e 4370 UI/L, respectivamente

Desenvolvimento de ensaio imunoenzimométrico baseado em anticorpos monoclonais para a dosagem de hormônio luteotrófico (LH) soro / Development of monoclonal antibody-based immunoenzymometric assay for the measurement of serum luteotropic hormone

Com o objetivo de se desenvolver um ensaio imunométrico para a dosagem de hormônio luteotrófico (LH) sérico, anticorpos monoclonais foram produzidos a partir de esplenócitos de camundongos imunizados contra gonadotrofina coriônica humana (hCG) e LH. Dois anticorpos de alta afinidade, um específico contra a subunidade alfa (F3P4) e outro contra a subunidade beta (E2P1) de LH/hCG, foram selecionados. O ensaio desenvolvido baseia-se no uso de anticorpo E2P1 em fase sólida e do F3P4 biotinilado, sendo a revelaçäo feita com o uso de estreptavidina peroxidase e leitura colorimétrica. O ensaio apresenta sensibilidade de 0,2 UI/L, coeficiente de variaçäo intraensaio inferior a 10 por cento entre as concentraçöes 1,5 a 200 UI/L e tempo total de execuçäo inferior a 6 horas. A dosagem concomitante de 367 amostras de rotina com o presente método e um ensaio disponível comercialmente (DELFIA-LH) mostrou correlaçäo de r=0,958