RESUMO
RESUMEN La deficiencia de zinc en humanos produce disminución de antioxidantes, asociados a taurina, en la retina y se relaciona con adaptación anormal a la oscuridad, cataratas, ceguera y degeneración macular. Existe escasa evidencia acerca del efecto del zinc sobre el sistema de taurina en retina de mamíferos, por lo cual estudiamos el efecto del zinc sobre el transportador de taurina (TAUT) y los transportadores de zinc (ZnT-1 y 3) usando el quelante de zinc extracelular, ácido dietileno-triamino-penta-acético (DTPA), mediante inmunocitoquímica e inmunohistoquímica fluorescentes en células ganglionares (CG) y en las capas de la retina de ratas. Tres días después de la administración de DTPA (10μM) se utilizaron anticuerpos primarios y secundarios conjugados con rodamina o fluoresceína-5-isotiocianato (FITC) según fuera el caso. Para el marcaje inmunocitoquímico se contaron trescientas células por condición y la intensidad de fluorescencia se midió como densidad óptica integrada (DOI) en cuatro áreas por cada capa del tejido. El DTPA produjo una disminución en un 32 % y 29 % de las CG del total de células marcadas con los anticuerpos contra glicoproteína Thy 1.1 y γ-sinucleína, respectivamente. También produjo una disminución significativa de la distribución de TAUT en un 27 y 28 % respecto a los controles. DTPA disminuyó la localización de ZnT-1 y ZnT-3 en las capas de retina (células ganglionares, CCG y en las plexiformes externa e interna, CPE y CPI). El estudio de estos transportadores en la retina resulta relevante para entender las interacciones de taurina y de zinc en esta estructura.
ABSTRACT Zinc deficiency in humans causes decreased antioxidants in the retina and is related with abnormal darkness adaptation, cataracts, blindness, and macular degeneration. There is little information about the effects of zinc on the taurine system in mammalian retinal cells. Therefore, we studied the effect of zinc on the taurine transporter (TAUT) and zinc transporters (ZnT-1 and 3) using the extracellular zinc chelator, diethylenetriaminepentaacetic acid (DTPA) by fluorescence immunocytochemistry and immunohistochemistry in the ganglion cells (CG) and cell layers of the retina of rats. Three days after administration ofDTPA (10μM) primary antibodies and secondary antibodies conjugated with rhodamine or fluorescein isothiocyanate (FITC) were used as required. For immunocytochemical labeling approximately three hundred cells per condition were counted. For immunohistochemical labeling, the fluorescence intensity was measured as integrated optical density (DOI) in four areas for each layer of tissue. DTPA produced a decrease of 32 % and 29 % in GC of the total cells labeled with antibody against glycoprotein Thy 1.1 and γ-synuclein, respectively. It also produced a significant decrease in TAUT localization in 27 and 28 % compared to controls. DTPA produced a decrease in the localization of ZnT-1 and ZnT-3 in the retina layers (ganglion cells, GCC and the outer and inner plexiform, CEP and CIP). The study of these molecules in the retina is relevant to understanding the interactions of taurine and zinc in this structure.