Calificación de un sistema de HPLC-IR para la determinación de impurezas en vacunas / Quality of a HPLC-IT system for determination of impurities in vaccines

La calificación de los diferentes componentes del sistema HPLC es un aspecto de vital importancia para el logro de buenos resultados en la validación de un método analítico, pues se necesita demostrar previamente que el sistema se encuentra trabajando de forma satisfactoria. En este caso la evaluación reviste una gran importancia, por tratarse de instrumentos de varios años de uso, con los que el fabricante no se responsabiliza, por lo que se recopiló información de instrumentos similares producidos por otros fabricantes o establecidos para versiones modernas de estos donde se describiera la forma de evaluar los parámetros más importantes en el funcionamiento de cada uno de los componentes del sistema cromatográfico a usar. Para calificar la bomba isocrática (Pharmacia-LKB), se evaluó la función de bombeo, la indicación del cero de presión, el límite mínimo y máximo de presión, así como la prueba de hermeticidad y la exactitud del flujo. Para calificar el detector de índice de refracción (Knauer), se evaluó la señal de ruido, la sensibilidad y la linealidad de la señal. Además se calculó la precisión del inyector. Se determinó que tanto la bomba isocrática como el detector de índice de refracción y el inyector manual cumplen con todos los parámetros estudiados, lo que demuestra que todos los componentes del sistema de HPLC cumplen con las especificaciones establecidas y adecuadas a sus características, además de satisfacer los requerimientos necesarios para la determinación de impurezas mediante esta tecnología

The assessment of different components of HPLC system is a very important feature to achieve good results in validaion of a analytical method since it is necessary to demonstrate previously that this system is working in a satisfactory way. In present case the assessment is very important to be about of instruments of some years of use where the manufacturer not accept responsability for the information collected on similar instruments produced by other manufacturers for current versions of these where is is described the way to assess the more significant parameters in the functioning of each components of chromatographic system to be used. To assess the isocratic pump (Pharmacia-LKB) pumping function, zero-pressure indication, minimal and maximal pressure limit, as well as the sealed test and flow accuracy. To determine the refraction rate detector (Knauer), the noise, sensitivity and linearity signal was assessed. Also, the injector's accuracy was estimated. Authors determined that the isocratic pump as refraction rate detector and the manual injector flufill with all study parameters demonstrating that all components of HPLC system also fulfill with specifications established and suitable to its features, satisfying the requirements necessaries for determination on impurities using this technology

Desarrollo de un método de CLAR-IR para la determinación de etanol residual en vacuna / Development of a HPLC-IR method for determination of residual ethanol in vaccine

Los ingredientes farmacéuticos activos de la vacuna antimeningocócica cubana VA-MENGOC-BC TM (vesículas de membrana externa purificadas de Neisseria meningitidis, serogrupo B y polisacßrido capsular purificado de Neisseria meningitidis, serogrupo C) son conservados en etanol, de ahí que dicha vacuna posea un contenido de etanol residual, cuya concentración real no se conocía hasta el momento. Las regulaciones internacionales plantean que los productos biofarmacéuticos y sus ingredientes farmacéuticos activos deben tener bien caracterizadas todas sus impurezas, por lo que el objetivo de este trabajo fue el desarrollo de un método de determinación de etanol mediante cromatografía líquida de alta resolución-índice de refracción para estos fines y su comparación con un método utilizado frecuentemente para cuantificar este solvente, como es la cromatografía gaseosa. El método evaluado resultó ser útil y con una buena robustez para la determinación de este solvente orgßnico en esta vacuna antimenigocócica. No se detectaron diferencias estadísticamente significativas entre los resultados obtenidos al evaluar las mismas muestras de vacuna mediante ambos métodos cromatogrßficos (cromatografía líquida de alta resolución y cromatografía gaseosa), lo que indica la posibilidad del uso de la cromatografía líquida de alta resolución en sustitución de la cromatografía gaseosa para esta determinación.

Active pharmaceutical ingredients of Cuban anti-meningococcal vaccine VA-MENGOC-BC TM (vesicles of purified external membranes of Neisseria meningitidis, B serum-group, and purified capsular polysaccharide of Neisseria meningitidis, serum-group C) are stored in ethanol, thus that such vaccine has residual ethanol content, of which real concentration is not known just now. International regulations propose that the biopharmaceutical products and its active pharmaceutical ingredients must to have well defined all impurities, thus, the aim of present papers was to develop an ethanol assessment method by liquid high performance-refraction index chromatography to these aims and its comparison with a frequent used method to quantify this solvent, like in the case of gas chromatography. Method assessed was very useful and with a good robustness for determination of this organic solvent in this anti-meningococcal vaccine. There were not statistically significant differences among results obtained with assessment of the same samples of vaccine by both chromatographic methods (high resolution liquid and gas), indicating possibility of high performance liquid chromatography use in substitution of the gas one for this determination.