Immunohistochemccal approach reveals localizatin of cystathionine--lyase and ccystathionine--synthetase in ethanol-induced gastric mucosa damage in mice

Context Hydrogen sulphide (H2S) has been proved to be a neuromodulator and contributes to the maintenance of gastric mucosal integrity in damage caused by anti-inflammatory nonsteroidal drugs. Previously, we demonstrated that H2S synthesis is essential to gastric protection against ethanol. Objective To better understanding the role of H2S and the detailed localization of its production in both normal and injured stomach due to ethanol injection, we studied the expression of cystathionine-γ-lyase (CSE) and cystathionine-β-synthetase (CBS) isoforms in gastric mucosa of mice treated with saline or 50% ethanol. Methods Mice were treated by gavage with saline or 50% ethanol (0.5 mL/25 g). After 1 hour, mice were sacrificed, and gastric tissue was evaluated by histological and immunohistochemical analysis specific for CSE and CBS. Results We have demonstrated a non-specific expression of CBS in the normal gastric mucosa and expression of CSE occurring mainly in the parietal cells of the animals treated with ethanol. Conclusion Thus, we demonstrated that the expression of CBS appears to be constitutive and diffuse across the gastric epithelium, while the expression of CSE appears to be induced in parietal cells by damage agents such as ethanol. .

Contexto O sulfeto de hidrogênio (H2S) tem sido mostrado como um neuromodulador e contribuidor para a manutenção da integridade da mucosa gástrica na lesão causada por drogas antiinflamatórias não esteroidais. Previamente, demonstramos que a síntese de H2S é essencial para a proteção da mucosa gástrica contra a administração de etanol. Objetivo Para compreender o papel do H2S e a localização detalhada de sua produção no estômago normal e após lesão induzida pela administração de etanol, estudou-se a expressão das isoformas cistationina-γ-liase (CSE) e cistationina-β-sintetase (CBS) na mucosa gástrica de camundongos tratados com salina ou etanol 50%. Métodos Os camundongos foram tratados por gavagem com salina ou etanol 50% (0,5 mL/25 g). Após 1 hora, os camundongos foram sacrificados e os tecidos gástricos foram avaliados por análise histológica e imunoistoquímica específica para CBS e CSE. Resultados Foi demonstrado expressão não específica de CBS na mucosa gástrica normal e expressão de CSE ocorrendo principalmente nas células parietais dos animais tratados com etanol. Conclusão Assim, demonstramos que a expressão de CBS parece ser constitutiva e difusa através do epitélio gástrico, enquanto a expressão de CSE parece ser induzida nas células parietais por agentes lesivos como o etanol. .

Efeitos gastroprotetor e procinético do sulfeto de hidrogênio (H2S) em camundongos [manuscrito]: papel dos Neurônios Aferentes Sensíveis à Capsaicina, Receptores de Vanilóides do tipo 1 (TRPV1) e Canais de K ATP-Dependentes (KATP) / Gastroprotective effects and prokinetic hydrogen sulfide (H2S) in mice [manuscript]: role of Afferent Neurons sensitive to capsaicin, vanilloid receptors type 1 (TRPV1) and Channel K ATP-Dependent (KATP)

Recentemente, foi demonstrado que o H2S está envolvido em inúmeras funções fisiológicas e patológicas, sendo produzido em muitos tecidos de mamíferos. OBJETIVOS: Avaliar o papel do H2S na defesa da mucosa e no controle da motilidade gástrica em camundongos, bem como estudar a participação dos canais de KATP, dos neurônios sensoriais sensíveis à capsaicina e dos receptores TRPV1 neste efeito. MÉTODOS: Camundongos Swiss foram pré-tratados com L-cisteína (25, 50 ou 100 mg/kg, v.o), NaHS (75, 150 ou 300 µmol/kg, v.o) ou Lawesson´s (3, 9, 27 ou 81 µmol/kg, v.o). Trinta minutos depois, o etanol 50% (0,5ml/25g, v.o) foi administrado. Depois de 1 h, os animais foram sacrificados e os estômagos abertos para determinação da área da lesão usando planimetria computadorizada. Além disso, fragmentos de tecidos foram removidos para análise microscópica e dosagem de glutationa e malondialdeído. Para o estudo do esvaziamento gástrico, outro grupo experimental foi tratado, por gavagem, com as mesmas doses de L-cisteína, NaHS ou Lawesson´s, decorridos 30 min os animais receberam uma solução glicosada (5%) contendo vermelho de fenol (0,75 mg/ml) em cada animal. Após 10, 20 ou 30 min os animais foram sacrificados e o esvaziamento gástrico foi avaliado por técnica de espectrofotometria. Em outro grupo experimental os animais foram pré-tratados com glibenclamida (3 e 10 mg/Kg, v.o.) ou capsazepina (10 mg/kg, i.p). Após 1h, foram administrados a L-cisteína (50 mg/kg) ou os doadores de H2S (NaHS 150 µmol/kg ou o reagente de Lawesson´s 27µmol/kg, v.o). Trinta minutos depois, o etanol 50% foi administrado para avaliação da lesão gástrica e solução de vermelho de fenol foi administrada para avaliar o esvaziamento gástrico conforme descrito anteriormente...