Mutações inativadoras no gene MKRN3 são causa de puberdade precoce central familial / Inactivating mutations in the MKRN3 gene are cause of familial central precocious puberty

A maioria dos casos de puberdade precoce central (PPC) em meninas permanece idiopática. A hipótese de uma causa genética vem se fortalecendo após a descoberta de alguns genes associados a este fenótipo, sobretudo aqueles implicados com o sistema kisspeptina (KISS1 e KISS1R). Entretanto, apenas casos isolados de PPC foram relacionados à mutação na kisspeptina ou em seu receptor. Até recentemente, a maioria dos estudos genéticos em PPC buscava genes candidatos selecionados com base em modelos animais, análise genética de pacientes com hipogonadismo hipogonadotrófico, ou ainda, nos estudos de associação ampla do genoma. Neste trabalho, foi utilizado o sequenciamento exômico global, uma metodologia mais moderna de sequenciamento, para identificar variantes associadas ao fenótipo de PPC. Trinta e seis indivíduos com a forma de PPC familial (19 famílias) e 213 casos aparentemente esporádicos foram inicialmente selecionados. A forma familial foi definida pela presença de mais de um membro afetado na família. DNA genômico foi extraído dos leucócitos do sangue periférico de todos os pacientes. O estudo de sequenciamento exômico global realizado pela técnica ILLUMINA, em 40 membros de 15 famílias com PPC, identificou mutações inativadoras em um único gene, MKRN3, em cinco dessas famílias. Pesquisa de mutação no MKRN3 realizada por sequenciamento direto em duas famílias adicionais (quatro pacientes) identificou duas novas variantes nesse gene. O MKRN3 é um gene de um único éxon, localizado no cromossomo 15 em uma região crítica para a síndrome de Prader Willi. O gene MKRN3 sofre imprinting materno, sendo expresso apenas pelo alelo paterno. A descoberta de mutações em pacientes com PPC familial despertou o interesse para a pesquisa de mutações nesse gene em 213 pacientes com PPC aparentemente esporádica por meio de reação em cadeia de polimerase seguida de purificação enzimática e sequenciamento automático direto (Sanger). Três novas mutações e duas...

Most cases of central precocious puberty (CPP) in girls remain idiopathic. The hypothesis of a genetic cause has been strengthened after the discovery of some genes associated with this phenotype, particularly those involved with the kisspeptin system (KISS1 and KISS1R). However, genetic defects in KISS1 and its receptor are rare and have been identified in only a few patients with CPP.over the past years. To date, most genetic studies in CPP was based mainly on a candidate gene approach, including genes selected in animal studies, human models of patients with hypogonadotropic hypogonadism or in genome wide association studies. In the present study, we used whole exome sequencing, a more advanced method of sequencing, to identify variants associated with CPP. Thirty-six patients with the familial form of CPP (19 families) and 213 apparently sporadic cases were initially selected. The familial form was defined by the presence of more than one member affected in the family. Genomic DNA was extracted from peripheral blood leukocytes in all patients. Whole exome sequencing performed by ILLUMINA technique in 40 members of 15 families with CPP, identified inactivating mutations in a single gene, MKRN3, in five out of these families. Analysis of MKRN3 mutations performed by automatic sequencing in two additional families (four patients) identified two novel mutations. MKRN3 is an introless gene located on chromosome 15, in the Prader Willi syndrome critical region, and it is expressed only by the paternal allele due to the maternal imprinting. Following the initial findings, we searched for MKRN3 mutations in 213 patients with apparently sporadic CPP using polymerase chain reaction followed by direct enzymatic purification and automated sequencing (Sanger). Three new mutations and two previously reported, including four frameshifts and one missense variant was identified in six unrelated girls with CPP. All variants were not described in...

Efeitos colaterais da administração da pulsoterapia de ciclofosfamida em pacientes com lúpus eritematososistêmico e fatores associados a irregularidades no tratamento / Side effects of cyclophosphamide pulse therapy in patients with systemic lupuserythematosus and factors associated with irregularity

Objetivo: Avaliar os principais efeitos colaterais que ocorrem durante o tratamento com pulsoterapia de ciclofosfamida em pacientes com Lupus Eritematoso Sistêmico, bem como analisar quais fatores estariam mais associados com a irregularidade do tratamento. Métodos: pacientes com diagnóstico de Lupus Eritematoso Sistêmico(LES)em esquema de pulsoterapia de ciclofosfamida (CF) foram abordados no dia da administração da medicação para coleta de dados sóciodemográficos, clínicos, relacionados aos efeitos colaterais da CF e motivos de atrasos na administração da pulsoterapia. Dados complementares foram extraídos dos prontuários. Resultados: 48 pacientes foram abordados em uma ou mais ocasiões durante a realização da pulso terapia de CF, totalizando 176 avaliações. A média de idade foi de 30,3 ± 10,3 anos, 95,8% eram do sexo feminino e a indicação mais freqüente da pulsoterapia foi a nefrite lúpica (91,6%). Por ocasião da avaliação inicial nos 48 pacientes, os efeitos colaterais registrados pelos pacientes desde o início do tratamento foram: náuseas e vômitos (85A%), queda de cabelo (75%), amenorréia (41,5%)e infecção (33,3%). Estes efeitos foram menos freqüentes nas avaliações prospectivas. As taxas de náuseas foram menores nos pacientes que tomavam doses maiores de prednisona (dose de prednisona E 5mg/dia: 93,6% de náuseas; 5-20mg prednisona/dia: 77,4%; > 20mg de prednisona/dia: 62,5%; p = 0,001). 60A% dos pacientes pensaram em desistir do tratamento em algum momento devido aos efeitos colaterais. Em 32,8% das avaliações (57/174) houve atraso na última administração de CFe os principais motivos foram pessoais (38,6%)e infecções (38,6%).Conclusões: Os efeitos colaterais associados a pulsoterapia de CF são muito freqüentes, embora nãomuito graves. A irregularidade na administração da CF por atraso é freqüente e são necessários estudosprospectivos para se avaliar o impacto destes atrasos no prognóstico dos pacientes.