Efficacy of mouthrinses in reducing oral SARS-COV-2 load: a review

Abstract Accumulated evidence has shown that the oral cavity may be an important reservoir for SARS-CoV-2. Some authors have suggested that the use of mouthrinses could reduce SARS-CoV-2 viral load in the saliva. Thus, the aim of this review was to synthesize evidence about the efficacy of mouthrinses in reducing the salivary viral load of SARS-CoV-2. 2. Nine randomized controlled trials (RCTs) have investigated the efficacy of different mouthrinses in reducing salivary SARS-CoV-2 loads. Various active ingredients have been tested in these trials: 0.5%,1% and 2% povidone-iodine, 0.2% and 0.12% chlorhexidine (CHX), 0.075% cetylpyridinium chloride (CPC), 0.075% CPC with Zinc lactate, 1% and 1.5% hydrogen peroxide (HP), 1.5% HP + 0.12% CHX and ß-cyclodextrin and citrox. The studies reported an intra-group reduction in the salivary levels of the virus, when compared with the baseline. However, the majority of these trials failed to demonstrate a significant inter-group difference between active groups and the control group relative to the decrease in salivary SARS-CoV-2 loads. Although promising, these results should be confirmed by larger trials.

Influenza A and B in a cohort of outpatient children and adolescent with influenza like-illness during two consecutive influenza seasons

ABSTRACT Introduction Influenza is an important cause of morbimortality worldwide. Although people at the extremes of age have a greater risk of complications, influenza has been more frequently investigated in the elderly than in children, and inpatients than outpatients. Yearly vaccination with trivalent or quadrivalent vaccines is the main strategy to control influenza. Objectives Determine the clinical and molecular characteristics of influenza A and B infections in children and adolescents with influenza-like illness (ILI). Methods: A cohort of outpatient children and adolescents with ILI was followed for 20 months. Influenza was diagnosed with commercial multiplex PCR platforms. Results: 179 patients had 277 episodes of ILI, being 79 episodes of influenza A and 20 episodes of influenza B. Influenza A and B cases were mild and had similar presentation. Phylogenetic tree of influenza B viruses showed that 91.6% belonged to the B/Yamagata lineage, which is not included in trivalent vaccines. Conclusions: Influenza A and B are often detected in children and adolescents with ILI episodes, with similar and mild presentation in outpatients. The mismatch between the circulating influenza viruses and the trivalent vaccine offered in Brazil may have contributed to the high frequency of influenza A and B in this population.

Processo de socialização na formação identitária do estudante de medicina / Socialization process in the identity development of the medicine student / Proceso de socialización en la formación de la identidad del estudiante de medicina

Resumo Este artigo teve por objetivo evidenciar e analisar as mudanças relativas às expectativas do tornar-se médico ao longo da graduação em medicina. Fizeram parte da pesquisa, realizada entre abril e junho de 2018, estudantes de medicina matriculados na primeira, quinta, oitava e décima segunda fases de uma instituição pública de Ensino Superior de Santa Catarina. Após aplicação de questionário, foram analisadas 145 respostas à seguinte pergunta: Por que você escolheu cursar medicina? Por meio de análise de conteúdo, evidenciou a presença crescente, no decorrer do curso, por aquilo que denominamos de 'retorno financeiro' e, de maneira inversa, o decrescente interesse por 'ajudar ao próximo'. Os resultados, analisados com base em teorias que abordam os processos de socialização e de formação identitária mostraram que, apesar de inseridos em realidades socioculturais distintas, os indivíduos se encontram envoltos por ritos e estereótipos comuns, socialmente convencionados por padrões social e historicamente construídos pelo processo de constituição da identidade médica.

Abstract The article had the goal of evidencing and analyzing the changes regarding the expectations involving becoming a doctor throughout Medicine undergraduate studies. Between April and June 2018, Medicine students enrolled in the first, fifth, eighth and tenth stages of a public higher education institution in the state of Santa Catarina, Brazil, took part in the study. After a questionnaire was applied, we analyzed 145 answers regarding the following question: Why did you choose to take Medicine course? Through content analysis, the data analysis evidenced a growing presence, throughout the course, of what we call 'financial return,' and, inversely, a decreasing interest in 'helping others.' The results, which were analyzed based on theories that approach the socialization and identity development processes, revealed that, in spite the fact that they are inserted into different sociocultural realities, the individuals find themselves involved with rituals and common stereotypes that are socially arbitrated by patterns that were socially and historically developed by the process of constitution of the medical identity.

Resumen Este artículo se planteó como objetivo evidenciar y analizar los cambios relacionados a las expectativas de convertirse en médico a lo largo de la carrera de medicina. El estudio, realizado entre abril y junio del 2018, incluyó a estudiantes de medicina de una institución pública de Enseñanza Superior del Estado de Santa Catarina, Brasil, matriculados respectivamente en los períodos primero, quinto, octavo y duodécimo. Después de aplicar el cuestionario se analizaron 145 respuestas a la siguiente pregunta: ¿Por qué usted eligió cursar medicina? Los datos analizados por medio del análisis de contenido mostraron un aumento a lo largo de la carrera por lo que se conoce como 'retorno de la inversión' y una disminución del interés en 'ayudar al prójimo'. Los resultados, analizados con base en teorías que abordan los procesos de socialización y de formación de la identidad, mostraron que a pesar de estar inmersos en diferentes realidades socioculturales, los individuos se encuentran rodeados por rituales y estereotipos comunes, aceptados socialmente por las normas sociales y construidos históricamente por el proceso de constitución de la identidad médica.

Educação Médica no Brasil: uma Análise Histórica sobre a Formação Acadêmica e Pedagógica / Brazilian Medical Education: a Historical Analysis of Academic and Pedagogical Education

RESUMO O presente ensaio apresenta uma breve análise histórica da educação médica no Brasil por meio de sua evolução acadêmica e pedagógica. Evidenciam-se, nas últimas décadas, novos modelos de ensino como opção para a formação de profissionais médicos, estando estes envolvidos com os conceitos contemporâneos de saúde e doença, voltados ao atendimento das demandas sociais, suscitadas nacional e internacionalmente. Neste ensaio abordaremos os seguintes focos de estudo: (a) ensino superior e escolas médicas no Brasil, (b) arquitetura curricular na educação médica: desafios e possibilidades e (c) reflexos das mudanças curriculares e das metodologias ativas no perfil do médico formado. Acerca de mudanças na formação profissional médica, chegamos à conclusão de que mudanças nas arquiteturas curriculares parecem não bastar, como agentes isolados, na alteração do perfil dos profissionais. No Brasil, ainda são escassos os estudos acerca do médico formado pelos diferentes métodos e currículos, ficando em aberto a discussão acerca da eficiência transformadora das arquiteturas curriculares distintas.

ABSTRACT This essay presents a brief historical analysis of medical education in Brazil throughout its academic and pedagogical evolution. In order to meet social demands and the contemporary concepts of health and sickness, new models of education have emerged in recent decades, as options for the training of medical professionals, both nationally and internationally. In this essay, we focus on the following topics: a) higher education and medical schools in Brazil, b) curricular architecture in medical education: challenges and possibilities; and c) reflections on curricular changes and active methodologies in the profile of the graduate physician. Regarding the changes in medical professional training, we come to the conclusion that changes in curricular architectures do not appear to be sufficient, in themselves, to change the profile of professionals. In Brazil, there are very few studies about physicians trained by the different methods and curricula, and the discussion about the transformative efficiency of the different curricular architectures remains unresolved.

Human polyomaviruses JC and BK in the urine of Brazilian children and adolescents vertically infected by HIV

The aim of this study was to characterize the urinary excretion of the BK (BKV) and JC (JCV) human polyomaviruses in a cohort of human immunodeficiency virus (HIV)-infected children and adolescents. One hundred and fifty-six patients were enrolled: Group I included 116 HIV-infected children and adolescents [median age = 11.4 years (y); range 1-22 y]; Group II included 40 non-HIV-infected healthy controls (median age = 11.37 y; range 7-16 y). Single urine samples from both groups were screened for the presence of JCV and BKV DNA by polymerase chain reaction at enrolment. The overall rate of JCV and BKV urinary excretion was found to be 24.4 percent and 40.4 percent, respectively (n = 156). Group I had urinary excretion of JCV and BKV in 27.6 percent and 54.3 percent of subjects, respectively. In contrast, Group II showed positive results for JCV in 17.5 percent of subjects and for BKV in 12.5 percent of subjects (p Pearson JCV = 0.20; p Pearson BKV < 0.0001). In Group I, there was no association between JCV/BKV shedding and age, gender or CD4 values. Patients with an HIV viral load < 50 copies/mL had a lower excretion of BKV (p < 0.001) and a trend of lower JCV excretion (p = 0.07). One patient in Group I (1/116, 0.9 percent) showed clinical and radiological features consistent with progressive multifocal leukoencephalopathy, suggesting that children with HIV/polyomavirus coinfection should be kept under surveillance.

Identification of respiratory virus in infants with congenital heart disease by comparison of different methods / Identificação de vírus respiratórios em crianças com cardiopatia congênita por comparação de diferentes métodos

Respiratory virus infections are the main cause of infant hospitalization and are potentially severe in children with congenital heart disease (CHD). Rapid and sensitive diagnosis is very important to early introduction of antiviral treatment and implementation of precautions to control transmission, reducing the risk of nosocomial infections. In the present study we compare different techniques in the diagnosis of respiratory viruses in CHD infants. Thirty-nine samples of nasopharyngeal aspirate were obtained from CHD infants with symptoms of respiratory infection. The Multiplex PCR (Seeplex® RV 12 ACE Detection) driven to the detection of 12 respiratory viruses was compared with the direct immunofluorescence assay (DFA) and PCR, both targeting seven respiratory viruses. The positivity found by DFA, Multiplex and PCR was 33.3 percent, 51.3 percent and 48.7 percent, respectively. Kappa index comparing DFA and Multiplex, DFA and PCR and PCR and Multiplex PCR was 0.542, 0.483 and 0.539, respectively. The concordance between techniques was considered moderate. Both Multiplex PCR (p = 0.001) and PCR (p = 0.002) detected significantly more respiratory virus than DFA. As the performance of the tests may vary, the combination of two or more techniques may increase diagnostic sensitivity favoring the diagnosis of co-infections, early introduction of antiviral therapy and implementation of appropriate measures.

Infecções respiratórias virais são a principal causa de hospitalização infantil e podem ser extremamente graves em crianças com cardiopatia congênita. O diagnóstico rápido e sensível é importante para a introdução precoce de tratamento antiviral e implantação de precauções para controle da transmissão, reduzindo o risco de infecções nosocomiais. Neste estudo, comparamos o desempenho de diferentes técnicas no diagnóstico de vírus respiratórios em crianças com cardiopatia congênita e sintomas respiratórios. Trinta e nove amostras de aspirado de nasofaringe foram obtidas de crianças com sintomas de infecção respiratória. Ensaio de PCR Multiplex que detecta 12 vírus respiratórios (Seeplex® RV 12 ACE Detection) foi comparado à Imunofluorescência Direta (IFD) e à PCR específica, ambas direcionadas a sete vírus. A positividade da IFD foi 33,3 por cento, do Multiplex foi 51,3 por cento e da PCR 48,7 por cento. O índice kappa comparando IFD e Multiplex, IFD e PCR, e PCR e Multiplex foi, respectivamente, 0,542, 0,483 e 0,539, sendo a concordância considerada moderada. O Multiplex e a PCR detectaram significantemente mais vírus que a IFD (p < 0,0001 e 0,002, respectivamente). Como o desempenho dos testes varia o uso de mais de uma técnica pode aumentar a sensibilidade diagnóstica favorecendo a introdução precoce de terapia antiviral e implantação de medidas profiláticas.

The monitoring of hematopoietic stem cell transplant donors and recipients from endemic areas for malaria / Monitoramento de doadores e receptores provenientes de áreas endêmicas para malária em transplante de células-tronco hematopoiéticas

Malaria is an unusual complication after hematopoietic stem cell transplantation in non-endemic countries. However, transplant candidates, recipients and donors living in endemic regions frequently report previous episodes of malaria. This fact could represent an important risk for immunosuppressed recipients that could develop severe malaria cases. We report a case of hematopoietic stem cell transplant (HSCT) in which the donor had a history of previous malaria, and close monitoring was performed before and after procedure by parasitological and molecular tests. The donor presented Plasmodium vivax in thick blood smears one month after transplant and was treated according to Brazilian Health Ministry guidelines. The polymerase chain reaction (PCR) was able to detect malaria infection in the donor one week earlier than thick blood film. Even without positive results, the recipient was pre-emptively treated with chloroquine in order to prevent the disease. We highlight the importance of monitoring recipients and donors in transplant procedures with the aim of reducing the risk of malaria transmission.

A malária é complicação incomum após o transplante de células-tronco hematopoiéticas em países endêmicos. No entanto, candidatos a transplantes, receptores e doadores que vivem em regiões endêmicas frequentemente relatam episódios anteriores de malária. Este fato pode representar um risco importante para receptores imunossuprimidos, que podem desenvolver casos de malária grave. Relatamos um caso de transplante de células-tronco hematopoiéticas (TCTH) em que o doador teve história de malária anterior e um monitoramento por meio de exames parasitológicos e moleculares foi realizado antes e após o procedimento. O doador apresentou Plasmodium vivax na gota espessa um mês após o transplante e foi tratado de acordo com as orientações do Ministério da Saúde brasileiro. A reação em cadeia da polimerase (PCR) foi capaz de detectar a infecção por malária no doador uma semana mais cedo do que a gota espessa. Mesmo sem resultados positivos, o receptor foi preventivamente tratado com cloroquina, a fim de prevenir as formas sanguíneas assexuadas. Destacamos a importância do monitoramento de receptores e doadores em procedimentos de transplante, com o objetivo de reduzir o risco de transmissão da malária.

Consenso brasileiro em transplante de células-tronco hematopoéticas: comitê de hemoglobinopatias / Brazilian consensus meeting on stem cell transplantation: hemoglobinopathies comittee

Os distúrbios hereditários das hemoglobinas são as doenças genéticas mais frequentes do homem e mais difundidas no mundo, abrangendo sobretudo continentes como África, Américas, Europa e extensas regiões da Ásia. Estima-se que haja 270 milhões de portadores de hemoglobinopatias no mundo, dos quais 80 milhões são portadores de talassemia. Aproximadamente 60 mil crianças nascem anualmente no mundo com talassemia e 250 mil com anemia falciforme, dando uma frequência de 2,4 crianças afetadas para cada 1.000 nascimentos. No Brasil, a doença falciforme é a doença hereditária monogênica mais comum, estimando-se que haja entre 20 a 30 mil pacientes portadores desta doença. O transplante de células-tronco hematopoéticas alogênico (TCTH alo) é atualmente a única modalidade terapêutica capaz de curar pacientes com hemoglobinopatias. Neste artigo discutiremos os dados disponíveis na literatura e sugerimos os critérios para a indicação do TCTH nas hemoglobinopatias.

Hemoglobinopathies are the most prevalent genetic diseases in man. Most cases are described in Europe, Africa and in the Americas. About 270 million hemoglobinopathy carriers are alive today with 80 million being carriers of thalassemia. We estimate that, throughout the world, about 60,000 children are born annually with thalassemia and 250,000 with sickle cell disease with an estimated frequency of 2.4 children in every 1000 births. Sickle cell disease is the most common monogenic hereditary disease in Brazil with a total of from 20,000 to 30,000 patients. Allogeneic stem cell transplantation is the only curative approach. Here we describe published data and propose criteria to indicate stem cell transplantation in thalassemia and sickle cell disease patients.

Recomendações no manejo das complicações infecciosas no transplante de células-tronco hematopoéticas / Management of infectious complications after hematopoietic stem cell transplant

A infecção em receptores de transplante de células-tronco hematopoéticas (TCTH) está relacionada a altas taxas de morbidade e mortalidade. O tipo de transplante, a fonte de célula-tronco hematopoética, a utilização de doadores alternativos e outras medidas relacionadas ao procedimento influenciam diretamente no tipo e na intensidade da imunossupressão, modificando o risco de desenvolver uma infecção. Nesta seção são discutidas as estratégias para monitorização, diagnóstico e tratamento das infecções em receptores de TCTH em três fases: na fase pré-transplante, durante a fase de neutropenia, e na fase pós-pega do enxerto.

Infectious complications following stem cell transplantation are frequent and associated with high morbidity and mortality. Several factors related to the transplant procedure, such as type of transplant, the source of stem cells, the utilization of alternative donors are important determinants of the immune status of the host, and impact on the risk of infection. In this section we will discuss the different approaches for monitoring patients at risk and diagnosing and treating infectious complications in three time periods: before transplant, during neutropenia, and after engraftment.

Transplante de células-tronco hematopoéticas em crianças e adolescentes com leucemia aguda: experiência de duas instituições brasileiras / Hematopoietic stem cell transplantation in children and adolescents with acute leukemia: experience of two Brazilian institutions

O transplante de células-tronco hematopoéticas (TCTH) é o tratamento de escolha para leucemias agudas de alto risco. Apesar da melhora na sobrevida destes pacientes, a recidiva continua sendo a maior causa de óbito pós-transplante de células-tronco hematopoéticas. O objetivo deste trabalho foi analisar os resultados dos transplantes realizados em crianças com leucemia aguda em duas instituições brasileiras. Realizou-se estudo retrospectivo de 208 pacientes transplantados entre 1990-2007. Mediana de idade: 9 anos; 119 pacientes com leucemia linfoide aguda (LLA) e 89 com leucemia mieloide aguda (LMA). Doença precoce: CR1 e CR2. ... 14/195 pacientes tiveram falha primária de pega (8 por cento). Não houve diferença na sobrevida global e sobrevida livre de recaída entre pacientes com leucemia linfoide aguda e leucemia mieloide aguda, entre transplantes aparentados e não aparentados, tampouco entre as fontes de células utilizadas. O desenvolvimento da doença do enxerto contra hospedeiro (DECH) aguda ou crônica também não influenciou a sobrevida global e sobrevida livre de recaída. Pacientes com leucemia linfoide aguda condicionados com irradiação corporal total (TBI) apresentaram melhor sobrevida global e sobrevida livre de recaída (p<0,001). Cento e dezoito pacientes morreram entre 1-1.654 dias pós-transplante de células-tronco hematopoéticas (M:160). Mortalidade relacionada a transplante (MRT) (dia+100): 16 por cento. Incidência cumulativa de recaída: 40 por cento (3 anos). Pacientes com doença avançada tiveram menor sobrevida global e sobrevida livre de recaída (três anos)(p<0,001). Na análise multivariada, o status da doença foi o principal fator associado ao aumento da sobrevida global e sobrevida livre de recaída. Nossos resultados mostram que é possível se atingir uma boa sobrevida para pacientes com doença precoce e também mostram a baixa eficácia naqueles com doença avançada.

Hematopoietic Stem Cell transplantation (HSCT) is the treatment of choice for patients with high-risk leukemia. In spite of this, relapse remains a major cause of death of these patients. Our objective was to analyze the outcomes of patients with acute leukemia submitted to hematopoietic stem cell transplantation in two Brazilian institutions... There were no differences in the overall survival and event free survival between patients with acute lymphocytic leukemia and acute myeloid leukemia, between sources of cells used or between those who developed acute or chronic graft-versus-host disease (GVHD). When comparing transplants from related and unrelated donors, there was no difference in the overall survival. Patients with acute lymphocytic leukemia receiving the total body irradiation (TBI) conditioning regimen had better overall survival and event free survival (p<0.001). One hundred and eighteen patients died between 0 and 1654 days after hematopoietic stem cell transplantation (M: 160 days). Transplantation-related-mortality (TRM) at D+100 was 16 percent and cumulative incidence of relapse was 40 percent (3 years). Patients with advanced disease had lower 3-year overall survival and event free survival (p<0.001). Multivariate analysis showed that disease status was the most significant factor associated with higher event free survival and overall survival . Our results show that children and adolescents transplanted with early disease can achieve considerable overall survival and also highlights the inefficacy of hematopoietic stem cell transplantation for patients with advanced disease.

Epidemiology of neglected tropical diseases in transplant recipients: review of the literature and experience of a Brazilian HSCT center / Epidemiologia das doenças tropicais negligenciadas em receptores de transplantes: revisão da literatura e experiência de um centro brasileiro

The rising success rate of solid organ (SOT) and haematopoietic stem cell transplantation (HSCT) and modern immunosuppression make transplants the first therapeutic option for many diseases affecting a considerable number of people worldwide. Consequently, developing countries have also grown their transplant programs and have started to face the impact of neglected tropical diseases (NTDs) in transplant recipients. We reviewed the literature data on the epidemiology of NTDs with greatest disease burden, which have affected transplant recipients in developing countries or may represent a threat to transplant recipients living in other regions. Tuberculosis, Leprosy, Chagas disease, Malaria, Leishmaniasis, Dengue, Yellow fever and Measles are the topics included in this review. In addition, we retrospectively revised the experience concerning the management of NTDs at the HSCT program of Amaral Carvalho Foundation, a public transplant program of the state of São Paulo, Brazil.

O sucesso crescente dos transplantes de órgãos sólidos (TOS) e de células tronco-hematopoiéticas (TCTH) e as novas drogas imunossupressoras fizeram dos transplantes a primeira opção terapêutica para muitas doenças que afetam milhares de pessoas em todo o mundo. Também os populosos países em desenvolvimento investiram no crescimento de seus programas de transplante e desde então começaram a vivenciar o impacto das doenças tropicais negligenciadas (DTNs) nestes pacientes. Revisamos os dados da literatura sobre a epidemiologia das DTNs de maior impacto clinico e social que afetam receptores de transplante de países em desenvolvimento, ou que podem representar um risco para receptores de transplante vivendo em outras regiões não afetadas por estas doenças. Tuberculose, hanseníase, doença de Chagas, malaria, leishmaniose, dengue, febre amarela e sarampo são os tópicos incluídos nesta revisão. Além disso, revisamos retrospectivamente a experiência referente ao manejo das DTNs do Serviço de Transplante de Medula Óssea da Fundação Amaral Carvalho, atualmente o maior centro de TCTH alogênico do Brasil.

Comparison of direct immunofluorescence, conventional cell culture and polymerase chain reaction techniques for detecting respiratory syncytial virus in nasopharyngeal aspirates from infants / Comparação entre imunofluorescência direta, cultura convencional de células e reação em cadeia de polimerase para detectar vírus respiratório sincicial em lavados de nasofaringe de crianças

A total of 316 samples of nasopharyngeal aspirate from infants up to two years of age with acute respiratory-tract illnesses were processed for detection of respiratory syncytial virus (RSV) using three different techniques: viral isolation, direct immunofluorescence, and PCR. Of the samples, 36 (11.4 percent) were positive for RSV, considering the three techniques. PCR was the most sensitive technique, providing positive findings in 35/316 (11.1 percent) of the samples, followed by direct immunofluorescence (25/316, 7.9 percent) and viral isolation (20/315, 6.3 percent) (p < 0.001). A sample was positive by immunofluorescence and negative by PCR, and 11 (31.4 percent) were positive only by RT-PCR. We conclude that RT-PCR is more sensitive than IF and viral isolation to detect RSV in nasopharyngeal aspirate specimens in newborn and infants.

Um total de 316 amostras de lavado de nasofaringe obtidas de crianças em acompanhamento ambulatorial com até dois anos de idade durante episódio de doença aguda do trato respiratório foram processadas para detecção do vírus sincicial respiratório (VSR) utilizando três diferentes técnicas: isolamento viral, imunofluorescência direta e reação em cadeia por polimerase (RT-PCR). Destas amostras, 36 (11,4 por cento) foram positivas para o VSR. A RT-PCR foi a técnica mais sensível, com positividade em 35 (11,1 por cento) das amostras, seguindo-se a imunofluorescência direta (25/316, 7,9 por cento) e o isolamento viral (20/315, 6,3 por cento) (p < 0,001). Uma amostra foi positiva pela imunofluorescência e negativa pela RT-PCR, e 11/36 (31,4 por cento) foram positivas somente pela RT-PCR. Concluímos que a RT-PCR é mais sensível que a imunofluorescência e o isolamento viral para detecção do VRS em amostras de aspirado de nasofaringe de recém-nascidos e lactentes.

Optimization of the Sybr Green real time PCR for the detection of Human Herpes Virus type 6 (HHV-6) / Otimização da PCR em tempo real - Sybr Green para detecção do Herpes Vírus Humano tipo 6 (HHV-6)

HHV-6 is the etiological agent of Exanthem subitum which is considered the sixth most frequent disease in infancy. In immuno-compromised hosts, reactivation of latent HHV-6 infection may cause severe acute disease. We developed a Sybr Green Real Time PCR for HHV-6 and compared the results with nested conventional PCR. A 214 pb PCR derived fragment was cloned using pGEM-T easy from Promega system. Subsequently, serial dilutions were made in a pool of negative leucocytes from 10-6 ng/µL (equivalent to 2465.8 molecules/µL) to 10-9 (equivalent to 2.46 molecules/µL). Dilutions of the plasmid were amplified by Sybr Green Real Time PCR, using primers HHV3 (5' TTG TGC GGG TCC GTT CCC ATC ATA 3)'and HHV4 (5' TCG GGA TAG AAA AAC CTA ATC CCT 3') and by conventional nested PCR using primers HHV1 (outer): 5'CAA TGC TTT TCT AGC CGC CTC TTC 3'; HHV2 (outer): 5' ACA TCT ATA ATT TTA GAC GAT CCC 3'; HHV3 (inner) and HHV4 (inner) 3'. The detection threshold was determined by plasmid serial dilutions. Threshold for Sybr Green real time PCR was 24.6 molecules/µL and for the nested PCR was 2.46 molecules/µL. We chose the Real Time PCR for diagnosing and quantifying HHV-6 DNA from samples using the new Sybr Green chemistry due to its sensitivity and lower risk of contamination.

HHV-6 é o agente etiológico do Exantema Súbito e considerado a sexta doença mais comum na infância. Em indivíduos imunocomprometidos, a reativação da infecção latente pode causar doença aguda ou morte. Padronizamos PCR em Tempo Real utilizando a química Sybr Green na detecção do HHV-6 e comparamos os resultados com a PCR convencional. Um fragmento de 214 pb foi clonado através do kit pGEM-T do sistema Promega. Com este clone, foram feitas diluições seriadas em um pool de leucócitos negativos a partir de 10-6 ng/µL (equivalente a 2465,8 moleculas/µL) até 10-9 (equivalente a 2,46 moleculas/µL). As diluições foram amplificadas por PCR em Tempo Real utilizando Sybr Green, com primers HHV3 5' TTG TGC GGG TCC GTT CCC ATC ATA 3' e HHV4 5' TCG GGA TAG AAA AAC CTA ATC CCT 3' e pelo método convencional, PCR nested usando primers HHV1 (externo): 5' CAA TGC TTT TCT AGC CGC CTC TTC 3'; HHV2 (externo): 5' ACA TCT ATA ATT TTA GAC GAT CCC 3', HHV3 (interno) e HHV4 (interno): 5' TCG GGA TAG AAA AAC CTA ATC CCT 3'. O limite de detecção foi determinado pelas diluições seriadas do plasmídio contendo um fragmento de HHV6: para o ensaio com Sybr Green, foi de 24,6 moleculas/µL e para a PCR nested, 2,46 moleculas/µL. Elegemos o PCR em Tempo Real - Sybr Green como método diagnóstico e quantitativo do HHV-6 devido a sua boa sensibilidade e menor risco de contaminação.

Impact of cytomegalovirus and grafts versus host disease on the dynamics of CD57+CD28-CD8+ T cells after bone marrow transplant

OBJECTIVES: The present study aimed to evaluate the dynamics of CD28 and CD57 expression in CD8+ T lymphocytes during cytomegalovirus viremia in bone marrow transplant recipients. METHODS: In a prospective study, blood samples were obtained once weekly once from 33 healthy volunteers and weekly from 33 patients. To evaluate the expression of CD57 and CD28 on CD8+ T lymphocytes, flow cytometry analysis was performed on blood samples for four months after bone marrow transplant, together with cytomegalovirus antigenemia assays. RESULTS: Compared to cytomegalovirus-seronegative healthy subjects, seropositive healthy subjects demonstrated a higher percentage of CD57+ and a lower percentage of CD28+ cells (p<0.05). A linear regression model demonstrated a continuous decrease in CD28+ expression and a continuous increase in CD57+ expression after bone marrow transplant. The occurrence of cytomegalovirus antigenemia was associated with a steep drop in the percentage of CD28+ cells (5.94 percent, p<0.01) and an increase in CD57+ lymphocytes (5.60 percent, p<0.01). This cytomegalovirus-dependent effect was for the most part concentrated in the allogeneic bone marrow transplant patients. The development of acute graft versus host disease, which occurred at an earlier time than antigenemia (day 26 vs. day 56 post- bone marrow transplant), also had an impact on the CD57+ subset, triggering an increase of 4.9 percent in CD57+ lymphocytes (p<0.05). CONCLUSION: We found continuous relative changes in the CD28+ and CD57+ subsets during the first 120 days post- bone marrow transplant, as part of immune system reconstitution and maturation. A clear correlation was observed between the expansion of the CD57+CD28-CD8+ T lymphocyte subpopulation and the occurrence of graft versus host disease and cytomegalovirus viremia.

Respiratory syncytial virus rhinosinusitis in intensive care unit patients

This study reported a case of rhinosinusitis for Respiratory Syncytial Virus in Intensive Care Unit patient. The settings were Intensive Care Unit at Hospital das Clínicas, University of São Paulo Medical School, São Paulo, Brazil. One female HIV-infected patient with respiratory failure and circulatory shock due to splenic and renal abscesses, who developed rhinosinusitis caused by RSV and bacteria. Respiratory viruses can play a pathogenic role in airways infection allowing secondary bacterial overgrowth.

Reimmunization after bone marrow transplantation: current recommendations and perspectives

Pacientes submetidos ao transplante de medula óssea, alogênico ou autogênico, perdem sua memória imunológica de exposição a agentes infecciosos e a vacinas adquiridas durante sua vida e necessitam eventualmente serem revacinados. Toxóide difteriano, tetânico e pertussis (crianças < de 7 anos), Haemophilus influenza do tipo B (Hib) conjugada, polissacáride pneumocócica - valência 23, vacina inativada de influenza, vacina de pólio inativada e vacinas vivas atenuadas de sarampo-caxumba- rubéola são as vacinas comumente recomendadas em um programa de vacinação de TMO. No entanto, o momento, número de doses e/ou o tempo de duração da imunidade após a vacinação ainda não se encontram estabelecidos. Os protocolos de vacinação entre os vários centros de TMO variam e inexistem dados que propiciem sólidas recomendações. O uso de outras vacinas e perspectivas de diferentes protocolos de vacinação são discutidos nesta revisão.

Phialemonium curvatum infection after bone marrow transplantation

We report a case of cutaneous infection caused by Phialemonium curvatum GAMS et COOKE, 1983, after bone marrow transplantation. The genus Phialemonium was created by GAMS & MCGINNIS in 1983 including three new species: Ph. obovatum, Ph. curvatum and Ph. dimorphosporum, and represents an intermediate genus between Acremonium and Phialophora. Nowadays, the genus Phialemonium is considered to be a pheoid fungus which may cause the eventual lesions observed in pheo- and hyalohyphomycosis. Species of this genus have been described as opportunistic agents in humans and animals, mainly as a result of immunosuppression. In the present case, the patient had multiple myeloma and received an allogenic bone marrow transplant from his HLA-compatible brother. Two months after transplantation, he developed purplish and painful nodular lesions on the right ankle. Some of these lesions drained spontaneously and apparently hyaline mycelial filaments were observed, whose culture was initially identified as Acremonium sp. Subsequent studies showed that the fungus was Phialemonium curvatum. The infection was treated with amphotericin B, followed by ketoconazole. The patient was submitted to surgical debridement followed by two skin grafts to repair the bloody area. The duration of the treatment was 4 months and secondary prophylaxis with ketoconazole alone was maintained for one additional month. No recurrence was observed after discontinuation of treatment. The authors comment on the pathogenicity of the genus Phialemonium

Scedosporium apiospermum sinusitis after bone marrow transplantation: report of a case

Paciente portador de leucemia mieloide cronica, com irma HLA-compativel foi submetido a transplante alogenico de medula ossea. No dia +90 pos-TMO foi diagnosticado doenca do enxerto contra o hospedeiro (DECH) extensa e iniciado protocolo alternado de imunossupressao com altas doses de ciclosporina A e prednisona. O seguimento ambulatorial foi complicado, com granulocitopenia intermitente e quadros frequentes de sinusite e pneumonia. Um ano apos o transplante, o paciente apresentou rouquidao e voz anasalada. Foi realizada uma biopsia de corda vocal mas nenhum agente infeccioso pode ser identificado. Na diminuicao das doses das drogas imunossupressoras, houve piora da DECH cronica e foi reiniciado esquema de doses altas no dia +550. Tres meses apos, permanecendo o quadro de DECH fora do controle, foi tentado imunossupressao com azatioprina sem sucesso...