Da biópsia para o microscópio: processamento tecidual em odontologia

Objetivo: O objetivo desta revisão de literatura é descrever as etapas fundamentais do processamento tecidual para microscopia óptica com coloração de hematoxilina e eosina (HE) de interesse na odontologia. Revisão de Literatura: O processamento tecidual para coloração com HE é constituída basicamente por 7 etapas sequenciais. Imediatamente após a biópsia, o espécime é fixado em formol a fim de interromper a autólise tecidual. Em seguida, na etapa de clivagem, a peça sofre redução de tamanho para facilitar a penetração do agente fixador. Caso a amostra seja dente ou tecido ósseo, ela passa por um processo de descalcificação prévio à clivagem. Nas etapas de processamento e inclusão ocorre remoção de líquidos do interior das células para que em seu lugar entre parafina, e o tecido é incluido em um molde para formar um bloco rígido de parafina, o qual será cortado na fase de microtomia. Finas secções teciduais são então aderidas a uma lâmina, coloridas e seladas. Conclusão: Um ótimo resultado na obtenção de lâminas histológicas depende da execução correta de todas as etapas do processamento tecidual, sendo também influenciado pelos cuidados do cirurgião-dentista com a amostra a ser enviada ao laboratório.

Aim: The aim of this literature review is to describe the fundamental steps of tissue processing for optical microscopy with hematoxylin and eosin (HE) staining of interest in dentistry. Literature Review: Tissue processing for HE staining basically consists of 7 sequential steps. Immediately after the biopsy, the specimen is fixed in formaldehyde to stop tissue autolysis. Then, in the cleavage stage, it undergoes size reduction to facilitate the penetration of the fixing agent. If the sample is a tooth or bone tissue, it goes through a decalcification process prior to cleavage. In the processing and inclusion stages, liquids are removed from the interior of the cells so that paraffin enters in its place, and the tissue is included in a mold to form a rigid block of paraffin, which will be cut in the microtomy phase. Thin tissue sections are then adhered to a slide, colored and sealed. Conclusion: An excellent result in obtaining histological slides depends on the correct execution of all stages of the tissue processing, and is also influenced by the dentist's care with the sample to be sent to the laboratory.

Reação liquenoide oral ao amálgama: uma lesão ainda vista / Oral lichenoid reaction to amalgam: a lesion still seen

O amálgama dental ainda é amplamente utilizado na prática odontológica, apesar do acordo assinado na Convenção de Minamata, na qual 140 países comprometeram-se a reduzir o uso do mercúrio. O uso desse material restaurador pode desencadear reações liquenoides orais (RLO) cujas lesões apresentam semelhanças clínicas e histológicas com líquen plano oral (LPO), dificultando o diagnóstico. Aqui relatamos o caso de uma paciente do sexo feminino, de 72 anos, que foi encaminhada com uma lesão na mucosa bucal esquerda, com 10 meses de evolução e queixa de dor. A lesão era adjacente ao segundo molar inferior esquerdo que tinha uma restauração de amálgama. A paciente não apresentava doença sistêmica ou hábitos deletérios e não estava usando drogas continuamente. O diagnóstico clínico presuntivo foi RLO versus LPO. Sessenta dias após a substituição da restauração do amálgama, observou-se a regressão completa da lesão e o diagnóstico final de RLO foi realizado. A avaliação clínica associada aos resultados obtidos após a substituição do material suspeito pode ser suficiente para estabelecer o diagnóstico, embora em alguns casos seja necessária a avaliação histopatológica.

Dental amalgam is still widely used in dental practice, despite the agreement signed at the Minamata Convention, in which 140 countries have committed to reducing the use of mercury. The use of this restorative material may trigger oral lichenoid reactions (OLR) whose lesions show clinical and histological similarities with oral lichen planus (OLP), making diagnosis difficult. Here we report the case of a female patient, 72-year-old, who was referred with a lesion in the left buccal mucosa, with 10 months of evolution and complaint of pain. The lesion was adjacent to the second lower left molar which had an amalgam restoration. The patient had no systemic disease or deleterious habits and was not using drugs continuously. The presumptive clinical diagnosis were OLR versus OLP. Sixty days after the replacement of amalgam restoration the complete regression of the lesion was observed and the final diagnosis of OLR was done. Clinical assessment associated with the results obtained after the replacement of suspect material may be sufficient to establish the diagnosis, although in some cases it may be necessary histopathological evaluation.

Decanoato de nandrolona no hemograma e nas células mononucleares da medula óssea de ratos Wistar hígidos / Nandrolone decanoate in the hemogram and bone marrow mononuclear cells of healthy Wistar rats

O decanoato de nandrolona (DN), um estimulante do sistema hematopoético, caracteriza-se por ser um medicamento acessível aos proprietários de animais com escassos recursos econômicos. Assim, este estudo objetivou avaliar o efeito de diferentes doses do DN no hemograma e na quantificação e a viabilidade das células mononucleares (CM) da medula óssea (MO), juntamente com a marcação das células hematopoéticas CD34+ de ratos Wistar saudáveis. Para isso, 48 animais foram separados em seis tratamentos, de forma aleatória, com oito animais cada. Os grupos foram constituídos por: G1 - controle (solução fisiológica); G2 - controle diluente (somente veículo oleoso de origem vegetal); G3 - 0,42mg kg-1 de DN; G4 - 1,8mg kg-1 de DN; G5 - 4,6mg kg-1 de DN; e G6 - 10,0mg kg-1 de DN. O fármaco foi aplicado semanalmente por três semanas. Os parâmetros hematológicos e medulares avaliados não tiveram diferença significativa entre os grupos, o que pode ter sido influenciado pela condição da MO ou pelo intervalo entre as doses. De acordo com os resultados obtidos e nas condições em que esta pesquisa foi desenvolvida, pode-se concluir que o DN não altera o hemograma, a quantificação e a viabilidade das CM e a marcação de CD34+ em ratos wistar saudáveis.

Nandrolone Decanoate (ND), a hematopoietic system stimulant, is characterized as an accessible medicament for low-income pet owners. The aim of this research is to study the effect of different ND doses in the blood cytological parameters and the quantification and viability of the bone marrow (BM) mononuclear cells (MC), together with the labeling of CD34+ hematopoietic stem cells of healthy Wistar rats. Forty eight animals were randomly separated into six different groups of treatment, each composed of eight animals. These groups were divided in: G1 - control group (physiologic solution); G2 - diluent control (only vegetal oily vehicle); G3 - ND 0.42mg kg-1; G4 - ND 1.8mg kg-1; G5 - ND 4.6mg kg-1 and G6 - ND 10.0mg kg-1. The drug was weekly applied for three weeks. The hematologic and medullar analyzed parameters showed no significant difference between the groups, which may have been influenced by the BM conditions or by the applications frequency. According to the results obtained and according to the conditions under which this research was developed, it can be concluded that ND did not affect the blood cytological parameters, quantification and viability of MC and CD34+ labeling in healthy Wistar rats.

Hipoadrenocorticismo primário em um cão / Primary hipoadrenocorticism in a dog

O presente relato descreve um caso de hipoadrenocorticismo primário em uma fêmea canina, com seis anos de idade, sem raça definida, atendida no Hospital de Clínicas Veterinárias da Universidade Federal de Santa Maria. O cão apresentava letargia, vômito, anorexia, fraqueza, tremores, poliúria e polidipsia. Há um mês o animal estava sendo tratado para insuficiência renal crônica sem melhora clínica. Nos exames laboratoriais, evidenciaram-se anemia normocítica normocrômica, azotemia, hiponatremia, hipercalemia, hipercalcemia e hiperfosfatemia e, por meio de radiografia, foi observada microcardia. O diagnóstico foi confirmado pelas alterações eletrolíticas, principalmente por diminuição da relação sódio:potássio e pelo teste de estimulação com corticotrofina, que resultou em baixa concentração plasmática de cortisol pós-estimulação. Após o diagnóstico, iniciou-se terapia com acetato de fludrocortisona, com melhora significativa dos sinais clínicos depois de dois meses de tratamento.

This study describes a primary hypoadrenocorticism in a mixed-breed six years old bitch examined at the Federal University of Santa Maria Veterinary Hospital. The animal presented lethargy, vomiting, anorexia, weakness, shaking, polyuria and polydipsia. During a month the animal was medicated for chronic renal failure, showing no clinical progress. Laboratory exams evidenced a normocytic normochromic anemia, azotemia, hyponatremia, hyperkalemia, hypercalcemia and hyperphosphatemia. Microcardia was observed on radiographic exam. The diagnosis was confirmed by altered electrolytic pattern, mainly by sodium:potassium ratio and by corticotrophin stimulation test, which resulted in low plasma cortisol. After the diagnosis fludrocortisone acetate therapy has begun, showing a clinical evolution after two months treatment.

Perfil eletroforético das proteínas séricas de frangos de corte alimentados com dietas contendo aflatoxinas e/ou argila clinoptilolita natural / Electrophoresis profile of serum proteins in broilers fed with diets containing aflatoxins and/or natural clinoptilolite clay

O objetivo do presente trabalho foi avaliar o perfil eletroforético das proteínas séricas de frangos de corte alimentados com dietas contendo aflatoxinas e/ou argila clinoptilolita natural. Foram utilizados 528 frangos de corte, machos, da linhagem Ross, distribuídos em seis tratamentos com 4 repetições cada: T1 - testemunha (ração sem aflatoxinas ou clinoptilolita), T2 - ração com 5ppm de aflatoxinas, T3 - ração com 0,25 por cento de clinoptilolita, T4 - ração com 5ppm de aflatoxinas e 0,25 por cento de clinoptilolita, T5 - ração com 0,5 por cento de clinoptilolita e T6 - ração com 5ppm de aflatoxinas e 0,5 por cento de clinoptilolita. Os animais ficaram alojados em 24 boxes, e submetidos aos tratamentos do 1° ao 42° dia, quando foram sacrificados. Foram analisadas as proteínas totais, as frações albumina, alfa 1, alfa 2, beta e gama. Com exceção das médias da fração gama, o teste de Tukey revelou diferenças significativas (P<0,05) nas médias de todas as proteínas totais e frações protéicas nos tratamentos onde as aflatoxinas estavam presentes. A ação das aflatoxinas nas proteínas totais ocorre na síntese de albumina e globulinas (frações alfa e beta). As gamaglobulinas não são afetadas pelas aflatoxinas. Em relação ao controle, as aves alimentadas com dietas com aflatoxinas e clinoptilolita apresentaram baixos (P<0,05) níveis de proteína total, albumina e globulinas (alfa e beta). Conclui-se que as aflatoxinas alteram o perfil eletroforético e que a clinoptilolita adicionada na ração não é capaz de evitar essas alterações.

This study was aimed at evaluating the electrophoresis profile of serum protein in broilers fed with diets containing aflatoxins and natural clinoptilolite clay. Five hundred and twenty eight male broilers Ross were distributed in six treatments and each one with 4 replications: T1 - control (without aflatoxins or clinoptilolite), T2 -5ppm of aflatoxins, T3 -0.25 percent of clinoptilolite, T4 -5ppm of aflatoxins and 0.25 percent of clinoptilolite, T5 -0.5 percent of clinoptilolite and T6 - 5ppm of aflatoxins and 0.5 percent of clinoptilolite. The broilers were allocated in 24 boxes and submitted to a treatments for 42 days, when they were slaughtered. Total proteins, albumin fractions, alpha 1, alpha 2, beta and gamma were analyzed. Except gamma fraction the Tukey test showed differences (P<0.05) on serum total proteins and proteins fractions in all treatments which aflatoxin was present. The clinoptilolite did not modify (P<0.05) the serum proteins. The control broilers fed with diets containing aflatoxins and clinoptilolite presented low levels (P<0.05) of total protein, albumin, and globulins (alpha and beta fractions). In conclusion, aflatoxins change the electrophoresis profile and clinoptilolite is not able to protect avoid these changes.

Reticulócitos e hematócrito de cães pré e pós esplenectomia parcial / Reticulocytes and hematocrit of dogs before and after partial splenectomy

Os reticulócitos são células eritróides que exibem RNA residual e são liberados da medula óssea em resposta à hipoxia tecidual. Após sua liberação da medula óssea, ficam temporariamente seqüestrados no baço, onde adquirem forma de eritrócitos maturos. Além disso, o baço também é responsável pelo armazenamento do sangue e seus elementos. A esplenectomia é indicada para casos de torção ou ruptura esplênica, esplenomegalia sintomática e massas esplênicas. Este estudo tem como objetivo avaliar a resposta dos reticulócitos e do hematócrito em cães submetidos à remoção parcial do baço. Para isso, foram utilizados nove cães, sem raça definida, machos e fêmeas. As coletas foram feitas uma hora antes e 48, 96, 144 e 168 horas após o procedimento cirúrgico. Os resultados demonstraram que o hematócrito diminuiu significativamente após a esplenectomia parcial. O valor máximo de reticulócitos foi alcançado 96 horas após a cirurgia, a partir daí houve um declínio na quantidade de reticulócitos na corrente sangüínea, permanecendo, porém, em número superior à condição pré-esplenectomia parcial.

The reticulocytes are erythroid cells that exhibit residual RNA, being released from bone marrow by erythropoietin stimulus in response to tissue hypoxia. After its release from bone marrow, they are temporarily sequestred in the spleen, where they acquire form of mature erythrocytes. Besides, the spleen is also responsible for storage of the blood and their elements. The splenectomy is indicated in cases of splenic torsion or rupture, symptomatic splenomegaly, and splenic masses. This study aimed to evaluate the response of reticulocytes and of hematocrit in dogs submitted to partial splenectomy. Nine mongrel males and female dogs were used. The samples were obtained one hour before the surgery and 48, 96, 144 and 168 hours after this procedure. The findings demonstrated that the hematocrit decreases significantly after the partial splenectomy. Highest values reticulocytes were reached 96 h after the surgery, followed by a decline in number, nevertheless, the counting was higher than moments before of the partial splenectomy.