Detección de micobacterias en muestras clínicas mediante la Reacción en Cadena de la Polimerasa / Detection by polimerase chain reaction of mycobacteria in clinical samples

Introducción. Las micobacteriosis constituyen un importante problema de salud a nivel mundial, siendo aún mayor en pacientes con el Síndrome de Inmunodeficiencia Adquirida (SIDA). En este trabajo utilizamos la Reacción en Cadena de la Polimerasa (RCP) para el diagnóstico de las principales micobacteriosis, y comparamos los resultados obtenidos con los del diagnóstico convencional.Material y métodos. Se procesaron cepas controles y 15 muestras: 14 esputos y 1 líquido cefalorraquídeo provenientes de pacientes con sospecha clínica de tuberculosis. El procesamiento de las muestras para la RCP se realizó por calentamiento. Se emplearon oligonucleótidos que amplifican un fragmento del gen de la proteína de 65 kDa de los complejos Mycobacterium tuberculosis y Mycobecterium avium intracellulare (MAI).Resultados. Ocho muestras resultaron positivas a la RCP revelada por electroforesis sobre gel de agarosa, y 7 resultaron negativas. Los resultados de la RCP y del cultivo micobacteriológico coincidieron en 10 casos.Discusión. La RCP es una técnica que reduce a horas el tiempo de diagnóstico de micobacteriosis.

Detección de Escherichia coli toxigénica (LT) mediante la reacción en cadena de la polimerasa

Se describe en este trabajo la detección de Escherichia coli enterotoxigénica LT(+). Este método está basado en la amplificación de un fragmento de DNA de 400 pares de bases mediante la reacción en cadena de la polimerasa (PCR). Los oligonucleótidos fueron diseñados por los autores y los patrones característicos se observaron cuando las muestras fueron sometidas a una electroforesis en gel de agarosa al 2 %. La PCR tuvo resultados positivos con las cepa de colección Escherichia coli O:149 K: 88 (LT+) y con 20 cepas aisladas de pacientes con diarreas agudas. Se observaron resultados negativos con Escherichia coli O:101 K:99 NM (ST+), Vibrio cholerae 01 y Acromons hydrophila.

In this paper it is described the detection enteroxigenic Escherichia coli LT (+). This method is based on the amplification of a DNA fragment of 400 pairs of bases by polymerase chain reaction (PRC). The oligonuclotides were designed by the authors and the characteristic patterns were observed when the samples were submitted to an electrophoresis in an Agarose gel at 2 %. The PCR had positive results with the strains of Escherichia coli 0:149 K; 88 (LT+) collection and with 20 strains isolated from patients with acute diarrhea. Negative results were found in Escherichia coli 0:101 K:99 NM (ST+), Vibrio cholerae 01 and Aeromonas hydrophilia.