Rabbit IgG antibodies against Phospholipase A2 from Crotalus durissus terrificus neutralize the lethal activity of the venom

Crotalus durissus terrificus (C.d.t.) (South American rattlesnake) venom possesses myotoxic and neurotoxic activities, both of which are also expressed by crotoxin, the principal toxin of this venom. Crotoxin contains a basic phospholipase A2 (PLA2) and a non toxic acidic protein, crotapotin. We have produced and investigated the ability of IgG antibodies raised in rabbits against PLA2 to neutralize the lethality of the whole venom. PLA2 was isolated by gel filtration chromatography (Sephadex G-75). Specific antibodies were obtained by subcutaneous and intramuscular inoculation of PLA2 (700 µg) with Freund adjuvant. Groups of six mice (20 + 2 g) were inoculated with 0.5 ml i.p. of C. d. t. venom (4 µg) or a mixture of venom that had been preincubated with the desired volume of IgG antibodies. Mortality, recorded 24 and 48 h after inoculation, showed that IgG anti-PLA2 were more effective than anticrotalic serum in neutralizing the lethal activity. These results demonstrate that it could be possible to obtain an anti-venom made by specific antibodies with a high level of protection against the lethal component of C.d.t. venom, and/or the inclusion of these antibodies as a supplement in heterologous anti-venoms

El veneno de Crotalus durissus terrificus (C.d.t.) (Cascabel de Sud América) posee actividad miotóxica y neurotóxica, actividades que también exhibe el complejo crotoxina, principal componente tóxico de este veneno. El complejo crotoxina está constituido por una fosfolipasa A2 básica (PLA2) y una proteína acídica no tóxica, el crotapotín. En este trabajo se estudió la capacidad neutralizante de anticuerpos IgG anti-PLA2 sobre la letalidad inducida por el veneno entero. El antígeno PLA2, fue aislado por cromatografía de filtración en gel (Sephadex G-75). Se inocularon conejos machos por vía subcutánea e intramuscular, con 700 µg de PLA2 y adyuvante para la obtención de anticuerpos específicos. La capacidad neutralizante del antisuero se analizó en ratones por inoculación con diluciones de veneno entero preincubado con un volumen adecuado de anticuerpos IgG anti-PLA2. Se inocularon ratones controles con 0.5 ml i.p. de veneno (4 µg.ml-1). El número de muertes fue contabilizado a las 24 y 48 h posteriores a la inoculación, demostrándose que la capacidad neutralizante de los anticuerpos IgG anti-PLA2 fue superior a la obtenida con el antiveneno crotálico. Los resultados obtenidos demuestran la potencial aplicación de antivenenos constituidos por anticuerpos específicos contra PLA2, y/o la inclusión de estos anticuerpos como suplementos en antivenenos polivalentes

Inmunofluorescencia con Crithidia luciliae para la deteccion de anticuerpos anti-adn: imagenes atipicas y su relacion con enfermedad de chagas y leishmaniasis: imagenes atipicas y su relacion con enfermedad de chagas y leishmaniasis / Immunofluorescence assay with Crithidia luciliae for the detection of anti-DNA antibodies: atypical images and their relationship with Chagas' disease and leishmaniasis

Los anticuerpos anti-ADN nativo pueden detectarse por inmunofluorescencia indirecta con Crithidia luciliae, observándose tinción fluorescente anular del kinetoplasto que contiene ADN de doble cadena. En algunos casos pueden observarse imágenes fluorescentes en flagelo, membrana y corpúsculo basal, consideradas atípicas. Como C. luciliae pertenece a la familia Trypanosomatidae, que incluye patógenos para el hombre como Trypanosoma cruzi y Leishmania spp., se consideró que las imágenes atípicas pudieran deberse a reacciones cruzadas. Se realizaron estudios serológicos para Chagas a 105 muestras provenientes de zona endémica (Corrientes) y no endémica (Buenos Aires) para T. cruzi que presentaban imágenes atípicas con C. luciliae. La serología para Chagas resultó positiva en el 64.7% de las muestras de Buenos Aires y en el 78.3% de las de Corrientes que presentaban frente a C. luciliae imagen conjunta de membrana y flagelo. No presentaron la imagen conjunta ninguna de las muestras de dadores de sangre normales, ni de pacientes con enfermedades del tejido conectivo, excepto dos con lupus que también eran chagásicos. Todas las muestras de pacientes chagásicos analizadas frente a C. luciliae presentaron la imagen conjunta. Se estudiaron también 46 muestras de pacientes con leishmaniasis, 28 de ellos coinfectados con T. cruzi. La imagen conjunta se observó en el 88.0% de las muestras de leishmaniásicos y en el 78.5% de las de coinfectados. Los resultados sugieren que C. luciliae podría ser un sustrato alternativo, económico y de bajo riesgo para el diagnóstico serológico de enfermedad de Chagas, aunque no discrimina la infección por Leishmania. El hallazgo de la imagen conjunta en la detección de anti-ADN nativo señala la conveniencia de realizar en esos pacientes, estudios clínicos y de laboratorio para enfermedad de Chagas y leishmaniasis.

Asociacion de Sida y Leishmaniosis tegumentaria americana en Argentina / American tegumentary leishmaniasis associated with AIDS in Argentina

Las migraciones a pequeños municipios y áreas rurales de personas infectadas con HIV contribuye a la diseminación progresiva del sida y a la asociación con otras infecciones prevalentes en áreas endémicas, como las parasitosis. Esta asociación significa un importante desafío para la salud pública, ya que frecuentemente ambas infecciones se potencian. En este trabajo presentamos el primer paciente autóctono con sida asociado a leishmaniosis mucocutánea procedente de la zona de Orán, donde a mediados de los 80 se desarrolló un brote epidémico de leishmaniosis que a la fecha supera más de 2000 casos confirmados parasitológicamente en nuestro Instituto. Recientemente informamos la existencia de 2 especies (Leishmania (V.) braziliensis y L. (L.) amasonensis) como las causantes de leishmaniosis tegumentaria americana en la zona. Queremos llamar la atención de los profesionales de la salud sobre la posibilidad de coinfección HIV-Leishmania, recomendando que en pacientes de áreas endémicas con antecedentes de úlceras cutáneas indoloras o incluso cicatrizales, se investigue, entre otras enfermedades, la leishmaniosis.

Parasitosis zoonoticas transmitidas por perros en el chaco salteño / Zoonotic parasitoses transmitted by dogs inte Chaco Salteno, Argentina

Los geohelmintos zoonóticamente importantes que parasitan al perro constituyen un relevante problema de salud pública, destacándose entre ellos Toxocara canis y Ancylostoma spp. Debido a que los agentes sanitarios comunicaban que un número de niños presentaban lesiones replantes de piel, eosinofilia persistente y hepatomegalia, se llevó a cabo un estudio epidemiológico en dos poblaciones ubicadas en el Chaco salteño, selva xerófila, agreste, en donde convicen estrechamente el hombre con la más variada gama de animales. A una muestra de 98 niños se les determinaron valores hematimétricos y anticuerpos anti-Toxocara por microELISA con un equipo comercial (BioLab), que utiliza antígeno metabólico excretorio-secretorio de larvas L2 de Toxocara canis. Los valores hetatimétricos no mostraron grandes alteraciones, excepto em 36 niños (36.7 por ciento) que presentaron eosinofilia igual o superior al 10 por ciento. Se encontró que el 20.4 por ciento (20/98) de los niños estudiados tenían anticuerpos (Acs) contra el antígeno (Ag) de Toxocara canis y que el 55.6 por ciento (20/36) de los niños con eosinofilia presentaban Ac anti-Toxocara. Se investigaron además, 106 muestras de heces de un número indeterminado de perros recogidas en el domicilio y peridomicilio de los niños. Se emplearon 3 técnicas de diagnóstico coproparasitológico: examen en fresco, centrifugación y flotación, realizándose recuento de huevos. De las 106 muestras analizadas, 82 (77.4 por ciento) resultaron positivas. El 69.8 por ciento (74/106) fueron positivas para Ancylostoma spp y el 17.2 por ciento (19/106) para Toxocara canis. Otros parásitos encontrados fueron Giardia spp 14.5 por ciento. Trichuris vulpis 7.6 por ciento. Género Endamoeba, 2.8 por ciento y Taenia spp 1.9 por ciento. Se encontró un promedio de 200 huevos de T. canis y de 3871 huevos de Ancylostoma spp./gramo de heces. Se destaca la necessidad de implementar medidas de control sanitario y educación para la salud, indispensable para la prevención y control de estas parasitosis.

Estudio de casos de leishmaniasis en la provincia de Salta: evidencias de infeccion mixta por Trypanosoma cruzi y Leishmania spp / Study of cases of leishmaniasis in the Province of Salta: evidences of mixed infection with Trypanosoma cruzi and Leishmania spp

En numerosas regiones del Continente Americano y aun de Argentina existe superposición de áreas endémicas de dos importantes parasitoses como son la enfermedad de Chagas y la leishmaniasis. Los parásitos causantes de ambas pertenecen a la misma familia (Trypanosomatidae) por lo que el diagnóstico serológico diferencial con antígenos convencionales se ve dificultado por la existencia de fenómenos de reactividad cruzada. En este trabajo estudiamos pacientes provenientes de una zona endémica para ambas parasitosis (Tartagal-Orán, Salta) que consultaron por lesiones cutáneas o mucoctáneas compatibles con leishmaniasis. El estudio de los sueros, utilizando Ag complejos de Leishmania, mostró inusualmente altos porcentajes de positividad para pacientes leishmaniásicos. El análisis empleando pruebas convencionales frente a Ag heterólogos complejos de T. cruzi, reveló que la mayoría daban positivas estas reacciones. La utilización de 2 técnicas no convencionales para el diagnóstico de enfermedad de Chagas, permitó dividir los pacientes en 2 grupos: 1. Con evidencias de infección por T. cruzi: aquellos que dieron positivo en ELISA utilizando un Ag específico purificado con un Ac monoclonal (Ag163B6) o que presentaban un patrón de bandas característico de pacientes chagásicos por "immunoblotting" frente a epimastigotes; 2. Pacientes sin evidencias de infección por T. cruzi: aquellos negativos para ambas técnicas. Se pudo comprobar así que más del 50 por ciento de los leishmaniásicos presentaba fuertes evidencias de una infección concomitante con T. cruzi. Además, el alto grado de reactividad cruzada quedó de manifesto en el grupo de pacientes sin evidencia de infección por T. cruzi, ya que el 60 por ciento dio positivas al menos 2 reacciones convencionales considerándoselos por ende como chagásicos, pero dieron negativas ambas reacciones específicas. Estos resultados destacan la importancia de contar con Ag definidos y técnicas apropriadas para el diagnóstico serológico diferencial de estas parasitosis, lo cual cobra mayor importancia en las zonas donde ambas son endémicas.