RESUMO
As leucemias linfoblásticas agudas de célula T (LLAs-T) apresentam alta prevalência em países em desenvolvimento, justificando a realização de estudos exploratórios na população brasileira. Análises das alterações genético-moleculares têm permitido a identificação de elementos envolvidos na leucemogênese. A fusão SIL-TAL1, a expressão do gene HOX11L2, e as mutações do NOTCH1 são alterações genéticas comuns nas LLAs-T. Com o objetivo de testar a influência destas anormalidades no prognóstico das LLAs-T de pacientes brasileiros, nós analisamos uma série de 170 crianças e adultos jovens com LLA-T, com idades entre 1-21 anos, sendo 39 meninas e 131 meninos, diagnosticados entre 2001-2007. A metodologia incluiu imunofenotipagem para a definição do subtipo celular e para análise do status do CD10 e CD1a; RT-PCR para detecção do SIL-TAL1e do HOX11L2, PCR, DHPLC e seqüenciamento para a identificação de mutações no NOTCH1. O método de Kaplan-Meyer foi usado para estimar a sobrevida dos casos em 36 meses de acordo com o perfil dos marcadores analisados. Nossos resultados mostraram 36,4 % das amostras com CD10+ e 28,8 % com CD1a+. As freqüências do SIL-TAL1 e do HOX11L2 foram 24,4 % e 11,5 % respectivamente. Sobre as mutações do NOTCH1, o domínio PEST estava mutado em 8,8 % dos casos; o HD representou 16,2 % das mutações, enquanto a análise de ambos os domínios juntos demonstrou 57,4 % das mutações. Interessantemente, duas irmãs com LLA-T (não-gemelares) foram analisadas para o NOTCH1, vimos que ambas apresentaram mutações nos domínios HD e PEST nas mesmas regiões. A análise das células do SP dos pais destas irmãs não demonstrou mutações no NOTCH1. Com estes resultados, nós podemos afirmar que estas mutações são somáticas. O impacto de cada marcador na sobrevida não foi estatisticamente significante. Através destes resultados vê-se que é necessário continuar este estudo com um número maior de casos analisados para o NOTCH1, para que, assim, possamos avaliar melhor o impacto destes marcadores na patogênese das LLAs-T.
T acute lymphoblastic leukemias (T-ALL) subtype presents higher prevalence in developing countries, justifying exploring studies in a Brazilian population. The analyses of genetic-molecular alterations have allowed the identification of elements involved in leukemogenesis. The SIL-TAL1 fusion gene, the expression of HOX11L2 gene, and NOTCH1 mutations are the common genetic alterations found in T-ALL. In order to test the influence of such abnormalities on outcome of T-ALL in Brazilian patients, we carried out on analysis of a series of 170 children and young adults with T-ALL, age range 1-21 years old, being 39 girls and 131 boys consecutively diagnosed between 2001-2007. Methodology included immunophenotyping for subtype definition and analyses of CD10 and CD1a status; RT-PCR for molecular analyses of SIL-TAL1and HOX11L2, PCR, DHPLC and sequencing for NOTCH1 mutations detections. Kaplan-Meyer survival methodology was used to estimate the 36-months survival rate of T-ALL cases according to the markers analyzed. Our results show that CD10 was positive in 36.4 % of the samples and CD1a in 28.8 %. The frequency of SILTAL1 fusion gene and HOX11L2 were 24.4 % and 11.5 % respectively. Regarding NOTCH1mutations, the domain PEST was mutated in 8.8 % of the cases; the HD domain demonstrated 16.2 % of mutations, whereas the analysis of both domains together presented 57.4 % of mutations. Interesting, T-ALL in two sisters (non-twins) included in these analyses, demonstrated that they both had mutation in HD and PEST domains in the same region. The analysis of PB cells of both parents demonstrated any mutation in NOTCH1. With these results, we can confirm that NOTCH1 mutations are somatic. The impact of all markers in survival was not significant statistically. From these results it is necessary to continue the study with a larger number of cases analyzed to NOTCH1, so we can better evaluate the impact of each marker with the pathogenesis of T-ALLs.