Trypanosoma cruzi: circulating polysaccharide factors excreted in vitro and in vivo

Se detectó un factor antigénico, temoestable y soluble en ácido tricloroacético (TCA) en el sobrenadante de cultivo de epimatigotes de Trypanosoma cruzi en fase logarítmica y en los sueros de pacientes con enfermedad de Chagas aguda. Este antígeno fue revelado en la mambrana de superficie de fibroblastos de ratas cuando fueron infectados con trypomastigotes, utilizando la técnica de inmunofluorescencia indirecta. El sobrenadante de cultivo de epimastigotes en medio GLSH libre de células a 28-C fue acidificado a pH5, calentado a ebullición 30 min y luego precipitado con TCA, centrifugado y el sobrenadante tratado con éter de petróleo. La solución extraída fue dializada, concentrada, liofilizada y purificada por cromatografía de afinidad. El eluido fue liofilizado y este material fue denominado factor antígeno excretado (EF). Un antisuero hiperinmune contra estos factores antígenos fue obtenido en conejos. El 76,6% de los sueros correspondientes a pacientes con Chagas agudo demostraron poseer el EF por técnica de inmunodifusión doble (Tabla 1). Monocapas de fibroblastos de ratas infectados previamente con 3 ml de trypomastigotes en una concentración de 5 x 10**6 células/ml sometidas a una inmunofluorescencia indirecta con el antisuero hiperinmune demostraron la presencia del EF en las membranas celulares de fibroblastos infectados y no infectados..

Complejos inmunes circulantes en los distintos estados evolutivos de la enfermedad de chagas / Circulating immune complexes in different developmental stages of Chagas' disease

En este trabajo se demuestra un aumento de los CIC en las fases agudas y crónica de la enfermedad de Chagas. Los complejos inmunes circulantes (CIC) fueron cuantificados por test del Clq marcado con 125I unido a los sistemas antígeno-anticuerpo y precipitados con polietilenglicol al 3% en los diferentes estados evolutivos de la patología. Las muestras de sangre fueron obtenidas de 31 pacientes con infección aguda y 10 individuos normales habitantes de la misma zona y edad similar; el grupo de pacientes con infección crónica estuvo integrado por 23 enfermos con cardiopatía demostrada por 23 enfermos con cardiopatía demostrada y 25 pacientes que no presentaron ningún síntoma y sus exámenes periódicos fueron siempre normales. La población control de este grupo fue constituida por 10 individuos normales con características etarias y de residencia similar. Todos los pacientes estudiados pertenecían a las provincias de Santa Fé y Santiago del Estero, República Argentina. Se demostró un incremento significativo de los CIC en la población de agudos (p<0,001) y en los infectados crónicos considerados en conjunto (p<0,05). Sin embargo, cuando los infectados crónicos cardiópatas fueron comparados con la población normal, no se obtuvieron diferencias significativas en los niveles de CIC (p<0,35); mientras que lo contrario sucedió cuando se comparó el grupo de infectados crónicos sin cardiopatía con los controles (p<0,01). Parecería importante la obtención de estos resultados diferenciado la población crónica en función de sus signos y síntomas clínicos, tal como lo efectuado en este trabajo. Distintos autores le han aribuido a los CIC un posible rol en la regulación de la respuesta inmune. Su demonstración en las distintas fases evolutivas de enfermedad de Chagas constituye un hecho a considerar. La demostración de sus aumentos en la poblacicón crónica sin alteraciones patológicas podría incentivar el estudio de los CIC como signo inmunológico a tener en cuenta en el curso de la evolución de infección a enfermedad. Mientras que en infectados agudos los altos niveles de los CIC inducen, además, a estudiarlos como causa inmunológica de algunos signos presentados por estos pacientes en el examen clínico

Anticuerpos específicos anti-Trypanosoma cruzi en niños con enfermedad de chagas aguda / Specific anti-trypanosoma cruzi antibodies in children with acute chagas' disease

El estudio describe la cinética de aparición de anticuerpos específicos en el suero de 30 niños con enfermedad de Chagas aguda durante los primeros 30 días de evolución de la sintomatología. Los resultados obtenidos con reacción de aglutinación directa reflejan una respuesta primaria clásica de producción de anticuerpos. Se observaron diferencias entre el dosaje de IgG e IgM respecto de los sueros normales. Se obtuvo una disminución de las fracciones del complemento principalmente el C1q, en la mayoría de los sueros estudiados. Se investigaron inmunocomplejos por tratamiento con polietilenglicol y la especificidad antigénica del anticuerpo involucrado quedó demostrado en 2 sueros. Para ello se utilizó una inmunodifusión doble enfrentando los precipitados obtenidos disociados con buffer glicina-ClH pH: 2,8, antisueros anti-IgG, anti-IgM y fracciones mitocondriales y solubles en distintas concentraciones. La reacción de identidad del antisuero anti-IgM la fracción soluble demuestra que la IgM es el anticuerpo del inmunocomplejo responsable de la especificidad antigénica. Es de suponer, entonces, que existen anticuerpos con distintas especificidades antigénicas que forman otros inmunocomplejos que podrían ser demostrados en el curso de la enfermedades de Chagas aguda. Este ensayo preliminar permitió detectar inmunocomplejos cuyos anticuerpos de tipo IgM demostraron especificidad para fracciones solubles y mitocondriales. Los valores bajos de C1q, más concentraciones altas de...

Evaluacion de una faccion antigenica especifica del Trypanosoma cruzi. / Evaluation of specific antigenic fraction of Trypanosoma cruzi

Distintos autores postularon una faccion antigenica especifica para el T. cruzi, que aparentemente fue encontrada en la superficie celular y membrana flagelar del T. cruzi.Nosotros hemos querido semicuantificar esta faccion, puesta de manifiesto por inmunoelectroforesis (arco 5) y relacionarla con nuestro patron serologico. Las distintas reacciones que lo comprenden, utilizan distintas fracciones antigermicas y tienen distintos principios biologicos. De esta manera, parecerian existir una asociacion entre la cantidad de arco 5 y titulos altos en los sueros por reaccion de aglutinacion directa. No sucedio lo mismo con inmunofluorescencia indirecta, ni en hemoaglutinacion pasiva. El estudio permitio observar distintos sistemas antigeno-anticuerpo cuando se enfrentan sueros de infectados chagasicos y extractos solubles de T. cruzi. Estos aparecen cualitativa y cuantitativamente en forma diferente en las placas de inmunoprecipitacion en los estados cronicos e agudos de la infeccion. En sueros de infectados en que el arco 5 no se observa, se postula que podrian existir otros sistemas antigeno-anticuerpos especificos para el T. cruzi. Se hace una evaluacion de la tecnica como posible metodologia diagnostica y su aplicacion mas importante