Dosagem de marcadores de lesão endotelial em pacientes com doença renal crônica em hemodiálise / Endothelial lesion markers dosage in chronic renal disease patients undergoing hemodialysis

INTRODUÇÃO: Pacientes com doença renal crônica (DRC) em diálise têm como principal causa de morte doença cardiovascular (DCV) aterosclerótica, tendo a inflamação e a disfunção endotelial relação direta com a aterosclerose. Além disso, a infecção pelo vírus da hepatite C (HCV), comum nestes pacientes, seria outro fator de piora do estado inflamatório. Níveis aumentados de marcadores de disfunção endotelial são encontrados em pacientes com DRC e hepatite C, e poderiam ser importantes marcadores de aterosclerose nestes indivíduos. OBJETIVO: Comparar atividade endotelial de pacientes em hemodiálise com e sem hepatite C. METODOLOGIA: Selecionamos 28 pacientes em hemodiálise que foram divididos em dois grupos: 1-HCV(+): 18 pacientes (anti-HCV[+] e PCR[+]) e 2-HCV(-): 10 pacientes (anti-HCV[-]). Antes da primeira diálise da semana foi coletada amostra de sangue para dosagem sérica de molécula de adesão intercelular-1 (ICAM-1), fator de crescimento vascular endotelial (VEGF), aspartato alanina aminotransferase (ALT) e tempo de atividade da protrombina (TAP) dos grupos. RESULTADOS: Os níveis de ICAM-1 foram elevados em 60,71 por cento, sendo maiores no grupo HCV(+), porém não estatisticamente significativos (p = 0,2024). Não houve correlação entre os níveis de ICAM-1 e tempo de diálise ou níveis de ALT em nenhum dos grupos. Já os níveis de VEGF foram normais em 92,85 por cento; apenas dois pacientes HCV(+) tinham níveis elevados. Também não houve correlação com tempo de diálise ou níveis de ALT em nenhum grupo. CONCLUSÃO: Pacientes em hemodiálise possuem elevada lesão endotelial, porém a presença de infecção crônica pelo HCV não se mostrou um fator agravante deste quadro. Este resultado pode ter ocorrido por conta do pequeno número de pacientes, sendo necessárias análises com maior número de indivíduos para conclusões mais definitivas.

INTRODUCTION: Chronic renal patients undergoing hemodialysis treatment have cardiovascular atherosclerotic disease as the main cause of death. Inflammation and endothelial dysfunction are directly associated with atherosclerosis. Furthermore, the infection resulting from hepatitis C virus, common among such patients, would be another worsening factor of the inflammatory state. Increased levels of endothelial dysfunction markers are found in chronic renal disease and hepatitis C, which could be important markers of atherosclerosis among these subjects. OBJECTIVE: To compare endothelial activity in patients undergoing hemodialysis with and without hepatitis C. METHODOLOGY: We selected 28 patients undergoing hemodialysis and classified them into two groups: 1-HCV(+): 18 patients (anti-HCV[+] and PCR[+]) and 2-HCV(-): 10 patients (anti-HCV[-]). Before the first weekly dialysis, blood samples from both groups were collected for ICAM-1, VEGF, ALT and TAP serum dosage. RESULTS: ICAM-1 levels were high in 60.71 percent. The highest levels were found in HCV(+) group, though not statistically significant (p = 0.2024). There was no correlation between ICAM-1 levels and the hemodialysis time or ALT levels in any group. On the other hand, VEGF levels were normal in 92.85 percent. Only two patients HCV(+) had high levels. There was also no correlation between VEGF levels and the dialysis time or ALT levels. CONCLUSION: Patients undergoing hemodialysis have high endothelial lesion, nevertheless, the presence of HCV chronic infection did not prove to be an aggravating factor. This result may be due to the small number of patients, hence further analyses with a larger sample are required for definitive conclusions.

Validação laboratorial de um método automatizado de dosagem da atividade de adenosina desaminase em líquido pleural e em líquido cefalorraquidiano / Laboratorial validation of an automated assay for the determination of adenosine deaminase activity in pleural fluid and cerebrospinal fluid

OBJETIVO: A incidência global de tuberculose reforça a necessidade de melhores ensaios para o diagnóstico desta doença, principalmente da tuberculose extrapulmonar. O objetivo do trabalho foi validar o desempenho de um método automatizado para a determinação da atividade de adenosina desaminase (ADA) no líquido pleural (LP) e no líquido cefalorraquidiano (LCR), comparando-o com um método convencional (Giusti modificado). MÉTODOS: Selecionaram-se 134 amostras da rotina laboratorial: 94 de LP e 40 de LCR. Foram realizadas as determinações da atividade de ADA através dos dois métodos. Calculou-se a precisão inter- e intra-ensaios, análise de regressão linear, testes de concordância simples e médias das diferenças. RESULTADOS: Os coeficientes de correlação para as amostras de LP e LCR foram, respectivamente, 0,96 e 0,95. A precisão interensaio foi determinada pela média de 21 amostras replicadas em ensaios diferentes para 3 níveis de atividade: baixa, média e alta. Os coeficientes de variação em porcentagem ( por centoCV) foram, respectivamente, 5,9, 8,1 e 5,8 para amostras de LP; e 21,9, 18,6 e 13,8 para amostras de LCR, respectivamente. A precisão intra-ensaio em por centoCV foi, respectivamente, 1,3 e 11,7 por cento para amostras de LP e LCR. A concordância entre os dois métodos em amostras de LP e LCR foi, respectivamente, 96,8 por cento e 100 por cento, considerando-se como valores de referência para o diagnóstico de TB 40 U/L (convencional) e 30 U/L (automatizado) em amostras de LP, e 9 U/L em amostras de LCR para os dois métodos. CONCLUSÕES: Os resultados validaram o método automatizado de determinação da atividade de ADA para o uso em amostras de LP e LCR como alternativa ao método convencional.

OBJECTIVE: The incidence of tuberculosis worldwide has emphasized the need for better assays designed to diagnose the disease, principally the extrapulmonary form. The objective of the present study was to validate the performance of an automated method for the determination of adenosine deaminase (ADA) activity in pleural fluid (PF) and cerebrospinal fluid (CSF), comparing it with a conventional method (the modified Giusti method). METHODS: In total, 134 samples were selected from among those tested in our laboratory: 94 PF samples and 40 CSF samples. The ADA activity was determined using the two methods. Inter- and intra-assay precision was determined, linear regression analysis was performed, simple concordance tests were conducted, and the means of the differences were calculated. RESULTS: The correlation coefficients for PF and CSF samples were, respectively, 0.96 and 0.95. Inter-assay precision was determined using 21 replicates at 3 different activity levels: low, medium and high. The percentage coefficient of variation ( percentCV) was, respectively, 5.9, 8.1 and 5.8 for PF samples, compared with 21.9, 18.6 and 13.8 for CSF samples. Intra-assay precision in percentCV was 1.3 and 11.7, respectively, for PF and CSF samples. The concordance between the methods in PF and CRF samples was, respectively, 96.8 percent and 100 percent, considering the reference values for the diagnosis of TB to be 40 U/L (conventional) and 30 U/L (automated) in PF samples, versus 9 U/L (for both methods) in CSF samples. CONCLUSIONS: The results validate the use of the automated method of determining ADA activity in PF and CSF samples as an alternative to the conventional method.

Marcadores de ativação endotelial e auto-anticorpos na artrite reumatóide / Markers of endothelial activation and autoantibodies in rheumatoid arthritis

A artrite reumatóide (AR) é uma doença crônica inflamatória, caracterizada pela produção de auto-anticorpos e participação do endotélio vascular em sua patogênese. OBJETIVOS: Analisar a correlação da molécula de adesão intercelular (ICAM-1), o fator de von Willebrand (vWF), o fator reumatóide (FR) e o anticorpo antipeptídeo citrulinado cíclico (anti-CCP) com parâmetros de atividade clínica, laboratorial e alterações radiológicas da AR. MÉTODOS: Em 38 pacientes e 24 indivíduos que não apresentavam artrite reumatóide foram dosados FR, anti-CCP, vWF e ICAM-1 no soro. A atividade da doença foi definida pelo escore do DAS-28. O Health Assessment Questionnaire (HAQ) definiu a capacidade funcional, e os critérios revisados do American College of Rheumatology, a classe funcional. Radiografias de mãos e punhos quantificaram o índice de Sharp modificado. RESULTADOS: A idade dos pacientes foi de 52 ± 12,5 anos e dos indivíduos que não apresentavam artrite reumatóide, de 49 ± 9,4 anos. O tempo de doença foi de 68 ± 66,6 meses. O vWF apresentou correlação significativa com o tempo de evolução da doença. Os auto-anticorpos tiveram correlação significativa com o índice de Sharp. A correlação do vWF e a ICAM-1 foi significativa com o DAS-28, mas apenas o vWF se correlacionou com o HAQ e com índice de Sharp. CONCLUSÃO: Esse estudo demonstrou que os auto-anticorpos não estão correlacionados com a atividade da doença, mas com seu prognóstico e sua gravidade por meio da relação destes com o índice de Sharp. O vWF apresentou correlação significativa com os parâmetros de atividade e gravidade da doença.

Rheumatoid arthritis (RA) is an inflammatory chronic disease characterized by the production of antibodies and participation of the vascular endothelium in its pathogenesis. OBJECTIVES: to analyze the correlation of serum levels of the intercellular adhesion molecule 1 (ICAM-1), von Willebrand factor (vWF), Rheumatoid factor (RF), and anti-cyclic citrulinated peptide (anti-CCP) with clinical, laboratory, and radiological parameters of RA. METHODS: Serum levels of ICAM-1, vWF, RF, and anti-CCP were measured in 38 RA patients and 24 controls. Disease activity was measured by the DAS-28 score and functional capa-city was assessed using the HAQ score. The American College of Rheumatism criteria defined the functional class. Hand and fist X-rays were analyzed using the Sharp's score. Statistical analysis utilized the chi-square, Student's "t", Kolmogorov-Smirnov, and Mann-Whitney tests, as appropriate, as well as the Spearman's correlation coefficient. RESULTS: Age range was from 52 ± 12.5 and 49 ± 9.4 years-old in RA and controls, respectively. Disease duration range was 68 ± 66.6 months. Serum vWF levels had a positive significant correlation to disease evolution, whereas RF and anti-CCP correlated to the Sharp score. Serum vWF and ICAM-1 levels correlated to DAS-28, while only vWF correlated with HAQ and Sharp scores. CONCLUSION: This study shows that RF and anti-CCP autoantibody levels are correlated to disease prognosis rather than activity. Serum vWF levels are positively correlated to both activity and severity parameters of the disease.