An experimental study to compare inflammatory response due to liquid or gas joint distension in horses submitted to arthroscopy / Estudo experimental para comparar a resposta inflamatória decorrente da distensão líquida ou gasosa em cavalos submetidos à artroscopia

PURPOSE: To assess comparatively the inflammatory response that follows CO2 or Ringer's lactate joint capsular distension of horses submitted to experimental arthroscopy METHODS: Each animal was submitted to a bilateral tarsocrural arthroscopy employing gas distention in one joint and fluid distention in the contralateral joint. Synovial fluid was evaluated at 0, six, 12, 24 and 48 hours post-operative. RESULTS: The use of CO2 for arthroscopy causes an acute and mild synovitis alike to the liquid capsular distension, showing similar synovial fluid increase of leukocytes, TP, and TNF-α. Although synovial fluid PGE2 content was higher in joints submitted to CO2 distension, lower levels of hemoglobin and leukocytes oxidative burst after surgery indicates that CO2 arthroscopy decreased intra-articular bleeding and activation of infiltrating leukocytes. CONCLUSIONS: The use of CO2 for arthroscopic examination causes acute and mild synovitis that is similar to the effects caused by the liquid capsular distension. CO2 also seems to decrease intra-articular bleeding and activation of leukocytes.

OBJETIVO: Avaliar comparativamente a resposta inflamatória decorrente da distensão líquida ou gasosa em cavalos submetidos ao exame artroscópico. MÉTODOS: Cada animal foi submetido a uma artroscopia bilateral tarsocrural empregando uma distensão com gás em uma articulação e líquido na articulação contralateral. O líquido sinovial foi avaliado as zero, seis, 12, 24 e 48 horas do pós-operatório. RESULTADOS: A utilização de CO2 para a artroscopia provoca uma sinovite aguda e leve tal como a distensão capsular por líquido, mostrando um aumento similar de leucócitos, TP (proteína total) e TNF-a. Embora no líquido sinovial a quantidade de PGE2 tenha sido maior nas articulações submetidas à distensão por CO2, níveis mais baixos de hemoglobina e explosão oxidativa de leucócitos após a cirurgia indica que a artroscopia com CO2 diminuiu o sangramento intra-articular e ativação de leucócitos. CONCLUSÕES: A utilização de CO2 para exame artroscópico provoca uma sinovite aguda e leve que são semelhantes aos efeitos causados pela distensão capsular por líquido. O CO2 também parece diminuir o sangramento intra-articular e a ativação de leucócitos.

Metabolismo oxidativo de leucócitos em animais infectados pelo Vírus da Leucemia Bovina / Oxidative burst of leukocytes from bovine leukemia Virus-Infected Cattle

A infecção pelo vírus da leucemia bovina (VLB) leva ao desenvolvimento de linfocitose persistente (LP) ou linfossarcomas, principalmente em rebanhos bovinos leiteiros. Entretanto, os eventos que induzem tais manifestações ou o efeito da infecção na função das diferentes populações de leucócitos são pouco conhecidos. Avaliou-se o efeito da infecção pelo VLB na produção intracelular de peróxido de hidrogênio (H2O2) em leucócitos circulantes, mensurada pela fluorescência produzida pela diclorodihidrofluoresceína, utilizando-se de citometria de fluxo. As células foram obtidas de cinco vacas soronegativas; cinco vacas infectadas pelo VLB, alinfocitóticas; e cinco vacas infectadas, manifestando LP. Verificou-se que a infecção pelo VLB não altera a porcentagem de leucócitos circulantes produzindo H2O2, com ou sem prévio estímulo por adição in vitro: de 12-miristato 13-acetato de forbol (PMA); de lipopolissacarídeos de Escherichia coli (LPS); ou Staphylococcus aureus. Todavia, a produção de H2O2 em leucócitos de animais apresentando LP, com ou sem estímulo, foi menor que aquela verificada em leucócitos de animais soronegativos e de animais soropositivos alinfocitóticos. Os estímulos aumentaram a porcentagem de leucócitos produzindo H2O2 e a produção intracelular média em animais soronegativos ou naqueles infectados alinfocitóticos. Contudo, em leucócitos de vacas soropositivas manifestando LP, a fagocitose de S. aureus não elevou a porcentagem de leucócitos produzindo H2O2. Também, apenas a adição de PMA elevou a produção intracelular de H2O2 em leucócitos de fêmeas soropositivas manifestando LP. Concluiu-se que bovinos infectados pelo VLB, manifestando LP, apresentam menor produção intracelular de H2O2, demonstrando vulnerabilidade funcional refletida por imunossupressão.

Widespread Bovine Leukemia Virus (BLV) infection leads to persistent lymphocytosis (PL) or lymphosarcoma, mainly in dairy herds. Nevertheless, neither the sequence of events that conducts to these symptoms, nor the effect of infection on function of different leukocyte populations, is well known. We evaluated the effect of BLV infection on immune response of cows through the analysis of hydrogen peroxide (H2O2) intracellular production of circulating leukocytes after in vitro stimuli with phorbol-12-myristate-13-acetate (PMA), Escherichia coli lipopolysaccharides (LPS), or Staphylococcus aureus. Cells were obtained from five BLV-non infected cows, five BLV-infected, non-lymphocytotic cows, and five BLV-infected cows with PL, and analyzed by flow cytometry. Intracellular production of H2O2 was measured by dichlorodihydrofluorescein diacetate dependent fluorescence. Results showed that BLV infection does not alter the percentage of H2O2-producing circulating leukocytes (H2O2-PCL), with or without previous stimuli. However, the average of H2O2 intracellular production, with or without previous stimuli, in leukocytes obtained from cows with PL was smaller than those from cells obtained from BLV-negative cows and from BLV-infected, non-lymphocytotic cows. Moreover, stimuli increased H2O2 intracellular production and the percentage of H2O2-PCL obtained from BLVnegative cows and from BLV-infected, non-lymphocytotic cows. Conversely, neither phagocytosis of S. aureus and stimulus with LPS increases H2O2 intracellular production, nor phagocytosis increases the percentage of H2O2-PCL, when leukocytes were obtained from cows with PL. Thus, results show that BLV-infected cattle, with PL, have an impaired H2O2 intracellular production, demonstrating functional vulnerability reflected by immunosuppression.

Avaliação do impacto da aplicação de manobra de hiperinsuflação pulmonar sobre a resposta inflamatória sistêmica e colapso pulmonar em pacientes submetidos a procedimentos cirúrgicos sob ventilação espontânea / Assessing the impact of lung hyperinflation maneuver on systemic inflammatory response and lung collapse in patients undergoing surgeries under spontaneous ventilation

JUSTIFICATIVA E OBJETIVOS: O uso de manobras de hiperinsuflação pulmonar (MHP) reverte atelectasias intraoperatórias. Contudo, pode induzir resposta inflamatória sistêmica de origem pulmonar. O objetivo deste estudo foi testar o impacto da aplicação de MHP sobre a resposta inflamatória sistêmica e sobre a estrutura pulmonar em pacientes submetidos à anestesia subaracnoidea. MÉTODO: Após aprovação do Comitê de Ética institucional e obtenção do consentimento escrito pós-informado, 20 pacientes submetidos a procedimentos cirúrgicos de pequeno e médio porte foram alea torizados em dois grupos: 1) Controle (GC) e 2) MHP (GMHP). Uma hora após a instalação do bloqueio espinhal, foi realizada MHP no GMHP aplicando-se pressão positiva nas vias aéreas em dois níveis (BIPAP) com pressão expiratória de 20 cmH2O e pressão inspiratória de 20 cmH2O durante 1 a 2 minutos. TNFα, IL-1, IL-6, IL-8, IL-10 e IL-12 foram medidos no sangue através de técnica de citometria de fluxo nos momentos basal, 90, 180 e 780 minutos. Os volumes e peso pulmonares foram computados a partir de tomografias computadorizadas obtidas imediatamente após a cirurgia. RESULTADOS: A aplicação de MHP resultou em redução da fração de parênquima pulmonar não aerado (7,5 ± 4,3 por cento no Grupo Controle versus 4 ± 2,1 por cento no Grupo MHP, p = 0,02), sem alterações nos volumes pulmonares. Foi observada elevação progressiva nos valores plasmáticos das interleucinas IL-1, IL-6, IL-8 e IL-10, similar nos dois grupos. Os níveis plasmáticos de TNFα e IL-12 foram indetectáveis durante o estudo. CONCLUSÕES: A aplicação de MHP única reduziu a fração de atelectasias, porém não amplificou a resposta inflamatória observada em pacientes com pulmões normais submetidos a cirurgias de pequeno e médio portes sob anestesia subaracnoidea.

BACKGROUND AND OBJECTIVES: Lung hyperinflation maneuvers (LHM) reverse intraoperative atelectasis; however, they can lead to pulmonary-induced systemic inflammatory response. The objective of this study was to determine the impact of LHM on systemic inflammatory response and lung structure in patients undergoing subarachnoid block. METHODS: After approval by the Ethics Committee of the institution and signing the informed consent, 20 patients undergoing small and medium surgical procedures were randomly separated into two groups: 1) control (CG), and 2) LHM (LHMG). One hour after the spinal anesthesia, LHM was performed in LHMG by applying bilevel positive pressure in the airways (BIPAP) with an expiratory pressure of 20 cmH2O and inspiratory pressure of 20 cmH2O for 1 to 2 minutes. Blood levels of TNFα, IL-1, IL-6, IL-8, IL-10, and IL-12 were determined by flow cytometry at baseline and at 90, 180, and 780 minutes. Lung volumes and weights were determined using CT scans obtained immediately after the surgery. RESULTS: The use of LHM resulted in a reduction in the fraction of non-aerated pulmonary parenchyma (7.5 ± 4.3 percent, in the Control Group, vs. 4 ± 2.1 percent, in the LHM Group, p = 0.02) without changing pulmonary volumes. A progressive increase in plasma levels of IL-1, IL-6, IL-8, and IL-10, similar in both groups, was observed. Plasma levels of TNFα and IL-12 were undetectable during the study. CONCLUSIONS: The use of LHM reduced the incidence of atelectasis, but it did not amplify the inflammatory response in patients with normal lungs undergoing small and medium surgeries under subarachnoid block.

JUSTIFICATIVA Y OBJETIVOS: El uso de maniobras de hiperinsuflación pulmonar (MHP), revierte las atelectasias intraoperatorias, pero puede conllevar a una respuesta inflamatoria sistémica de origen pulmonar. Los objetivos de este estudio fueron comprobar el impacto de la aplicación de MHP sobre la respuesta inflamatoria sistémica y sobre la estructura pulmonar en pacientes sometidos a la anestesia subaracnoidea. MÉTODO: Después de la aprobación del Comité de Ética institucional y de la obtención del consentimiento informado, 20 pacientes sometidos a procedimientos quirúrgicos de pequeño y mediano porte, se separaron aleatoriamente en dos grupos: 1) control (GC) y 2) MHP (GMHP). Una hora después de la instalación del bloqueo espinal, fue realizada MHP en el GMHP aplicando una presión positiva en las vías aéreas en los niveles (BIPAP) con una presión espiratoria de 20 cmH2O y una presión inspiratoria de 20 cmH2O durante 1 a 2 minutos. FNTα, IL-1, IL-6, IL-8, IL-10 y IL-12 se midieron en la sangre a través de la técnica de citometría de flujo en los momentos basal, 90, 180 y 780 minutos. Los volúmenes y el peso pulmonares fueron computados a partir de tomografías computadorizadas obtenidas inmediatamente después de la operación. RESULTADOS: La aplicación de MHP resultó en una reducción de la fracción del parénquima pulmonar no aerado (7,5 ± 4,3 por ciento en el Grupo Control vs 4 ± 2,1 por ciento en el Grupo MHP, p = 0,02), sin alteraciones en los volúmenes pulmonares. Se observó una elevación progresiva en los valores plasmáticos de las interleucinas IL-1, IL-6, IL-8 y IL-10, similar en los dos grupos. Los niveles plasmáticos de FNT< y IL-12 no se detectaron durante el estudio. CONCLUSIONES: La aplicación de MHP única redujo la fracción de atelectasias, sin embargo, no amplificó la respuesta inflamatoria observada en pacientes con pulmones normales sometidos a cirugías de pequeño y mediano porte bajo anestesia subaracnoidea.

Influência da leucose enzoótica bovina na função fagocítica de leucócitos circulantes em animais manifestando linfocitose persistente / Influence of enzootic bovine leukosis on phagocytic function of circulating leukocytes from animals with persistent lymphocytosis

Avaliou-se, por citometria de fluxo, a fagocitose de Staphylococcus aureus conjugados com iodeto de propídio (IP), por leucócitos circulantes obtidos de cinco fêmeas bovinas negativas no sorodiagnóstico para a Leucose Enzoótica Bovina (LEB); de cinco fêmeas infectadas, manifestando linfocitose persistente (LP); e de cinco fêmeas infectadas, porém alinfocitóticas. Observou-se que, entre as amostras dos animais soronegativos, a porcentagem média de células realizando fagocitose (12,90%) não diferiu da observada entre as células dos animais alinfocitóticos (14,70%). Contudo, ambas foram maiores (p=0,047) que aquela verificada entre as células obtidas de animais manifestando LP (7,20%). Além disso, a intensidade média de fagocitose (caracterizada pela intensidade de fluorescência do IP, em valores arbitrários), verificada em leucócitos de animais manifestando LP (17,43) foi menor (p<0,001) que a observada em leucócitos de animais alinfocitóticos (29,50), e que a observada em leucócitos de animais soronegativos (25,18), que não diferiram entre si. Assim, os resultados permitem-nos alvitrar que há alteração na função fagocítica de leucócitos circulantes em animais infectados pelo vírus da LEB, manifestando LP.

This study evaluated the phagocytosis of propidium iodide-labeled Staphylococcus aureus (PI-Sa) by circulating leukocytes obtained from five Enzootic Bovine Leukosis (EBL)-negative cows, five naturally EBL-infected, non-lymphocytotic cows, and five EBL-positive cows with persistent lymphocytosis (PL), analyzed by flow cytometry. Among cells obtained from EBL-infected cows, presenting PL, the percentage of leukocytes carrying out phagocytosis (7.20%), was smaller (p=0.047) than that verified among cells obtained from non-infected (12.90%), and from BLV-infected, non-lymphocytotic cows (14.70%). Furthermore, leukocytes obtained from EBL-infected cows, presenting PL, showed smaller phagocytosis intensity (characterized by the intensity of propidium iodide fluorescence) than leukocytes obtained from non-infected and from EBL-infected, non-lymphocytotic, cows (p<0.001). Therefore, results show a decreased phagocytic function among circulating leukocytes obtained from BLV-infected, lymphocytotic cows.