Toxocara canis 30-35 kDa excretory-secretory antigen is an important marker in mice challenged by inocula containing different parasite load levels

ABSTRACT The Western-blotting technique was applied to identify antigenic fractions of excretory-secretory Toxocara canis antigen recognized by IgG antibodies throughout an experimental infection in mice challenged by different inocula. Mice were inoculated with 5, 50 and 500 embryonated eggs and serum samples were collected 15, 30, 60, 90 and 120 days post-infection. Serum samples were analyzed using an excretory-secretory Toxocara antigen. Antibodies recognized antigenic fractions from 30 to 90 kDa. The protein fraction of 30-35 kDa was the most frequently recognized regardless of the size of inoculum and the stage of infection represented by the different collection times, but the antigenic recognition was more evident in groups infected with 50 and 500 eggs. This study presents an antigenic panel of the excretory-secretory antigen of T. canis and suggests that the 30-35 kDa antigenic fraction is a promising marker of the infection and should be further explored in future studies on experimental toxocariasis.

Membrane fractions from Strongyloides venezuelensis in the immunodiagnosis of human strongyloidiasis / Frações de membrana de Strongyloides venezuelensis para o imunodiagnóstico da estrongiloidíase humana

Strongyloides venezuelensis is a parasitic nematode of rodents frequently used to obtain heterologous antigens for the immunological diagnosis of human strongyloidiasis. The aim of this study was to evaluate membrane fractions from S. venezuelensis for human strongyloidiasis immunodiagnosis. Soluble and membrane fractions were obtained in phosphate saline (SS and SM) and Tris-HCl (TS and TM) from filariform larvae of S. venezuelensis. Ninety-two serum samples (n = 92) were obtained from 20 strongyloidiasis patients (Group I), 32 from patients with other parasitic diseases (Group II), and 40 from healthy individuals (Group III), and were analyzed by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Soluble fractions (SS and TS) showed 90.0% sensitivity and 88.9% specificity, whereas the membrane fractions (SM and TM) showed 95.0% sensitivity and 94.4% specificity. The present results suggest the possible use of membrane fractions of S. venezuelensis as an alternative antigen for human strongyloidiasis immunodiagnosis.

Strongyloides venezuelensis é um nematódeo parasita de roedores, frequentemente usado como antígeno heterólogo para o diagnóstico imunológico da estrongiloidíase humana. O objetivo deste estudo foi avaliar frações de membrana de S. venezuelensis para o imunodiagnóstico da estrongiloidíase humana. Para tanto, frações solúveis e de membrana foram obtidas em solução salina fosfato (SS e MS) e Tris-HCl (ST e MT) de larvas filarioides de S. venezuelensis. Amostras de soro de 92 indivíduos, sendo 20 com estrongiloidíase (Grupo I); 32 com outras parasitoses (Grupo II), e 40 indivíduos saudáveis (Grupo III), foram analisadas pelo teste Imunoenzimático (ELISA). As frações solúveis (SS e ST) apresentaram 90,0% e 88,9%, enquanto que as frações de membrana (MS e MT) demonstraram 95,0% e 94,4%, de sensibilidade e especificidade, respectivamente. Os resultados obtidos permitem indicar as frações de membranas como antígeno alternativo para o diagnóstico da estrongiloidíase humana.

Integrina beta1 no desenvolvimento das glândulas salivares humanas / Integrin beta1 in developing human salivary glands

INTRODUÇÃO: O desenvolvimento das glândulas salivares envolve um processo coordenado de interações moleculares complexas, nas quais as integrinas têm papel fundamental. As integrinas são uma família de receptores transmembrânicos, heterodímeros, compostos por duas subunidades: alfa e beta que estão ligadas de forma não covalente e dependentes de cations bivalentes. Estes heterodímeros medeiam sinais intra e extracelulares envolvidos na organização das células em tecidos e órgãos durante seu desenvolvimento. Em particular a integrina beta1 está envolvida na proliferação e diferenciação de células no desenvolvimento dos tecidos epiteliais. OBJETIVOS: Para compreender o papel da integrina beta1 no desenvolvimento das glândulas salivares humanas, estudamos a sua expressão por meio da hibridização in situ em tecido fetal humano em desenvolvimento. MATERIAL E MÉTODOS: A hibridização in situ com o método chromogenic in situ hibridization (CISH) foi utilizada para investigar a expressão genética da integrina beta1 em espécimes de glândulas salivares em desenvolvimento derivados de 30 fetos humanos em vários estágios gestacionais (de 825 semanas de vida intrauterina). Os resultados obtidos com a hibridização in situ foram relacionados com os aspectos morfológicos das glândulas salivares em desenvolvimento em cada fase da evolução da morfogênese glandular, por meio de análise qualitativa. RESULTADOS: Expressão da integrina beta1 foi detectada em raras células na fase prebotão. A expressão dessa molécula foi detectada em mais estruturas com a evolução do desenvolvimento morfogenético das glândulas salivares. CONCLUSÕES: A expressão a integrina beta1 parece ser regulada de forma temporoespacial e é associada ao estabelecimento do fenótipo maduro das glândulas salivares.

INTRODUCTION: Salivary gland development entails coordinated processes involving complex molecular interactions in which integrins have a fundamental role. The integrins are a family of heterodimeric transmembrane receptors comprising alpha and beta subunits that mediate intercellular and extracellular signals involved in the organisation of cells in tissues and organs during development. The beta1 integrin in particular have been implicated in proliferation and differentiation of cells involved in the development of epithelial tissues. OBJECTIVE: To understand the role of beta1 integrin in salivary gland development we have studied its expression in human foetal tissues. MATERIAL AND METHODS: In situ hybridisation CISH technique was used to compare the expression and localisation of integrin beta1 with differentiation markers in developing human salivary glands obtained from foetuses of 825 gestational weeks. RESULTS: Integrin beta1 first appeared during bud stage in a few cells and its distribution increased as salivary gland morphogenesis progressed. CONCLUSIONS: The developmentally regulated expression of integrin beta1 in association with the establishment of a mature phenotype of salivary glands is suggestive of its role in salivary gland morphogenesis.