Prevalence and intensity of infection, metacyclogenesis and nuclear phenotypes in Panstrongylus megistus (Burmeister, 1835) after ingestion of Trypanosoma cruzi (Chagas, 1909) II and subjection to heat shock / Prevalência e intensidade de infecção, metaciclogênese e fenótipos nucleares em Panstrongylus megistus (Burmeister, 1835) após ingestão de Trypanosoma cruzi (Chagas, 1909) II e choque de temperatura

This study aimed to contribute to our knowledge of the parasite-vector interaction associated with Trypanosoma cruzi (Chagas, 1909) infection in Panstrongylus megistus (Burmeister, 1835), an important vector of Chagas' disease in Brazil. The prevalence and intensity of T. cruzi infection, the incidence of metacyclogenesis and the frequency of nuclear phenotypes in Malpighian tubules were investigated in nymphs of P. megistus, reared at 28 °C and subjected to heat shock (40 °C, 1 hour) two days after infection with T. cruzi II (Y strain). Following the 45-day post-infection period, the frequency of epimastigotes was much higher than that of trypomastigotes in both heat-shocked and non-shocked insects, and the prevalence of infection was not altered by heat shock. Fewer epimastigotes and trypomastigotes were found in the infected insects subjected to the heat shock, indicating that the multiplication and metacyclogenesis of the parasites were affected by the stress. In infected specimens heat shock promoted an increased frequency of cell nuclei with heterochromatin decondensation, a cell survival response to stress, and did not affect insect survival. The effects of infection and heat shock, especially on the multiplication and metacyclogenesis of T. cruzi, and the observed resistance to heat shock developed by P. megistus nymphs are suggestive that they should be considered when adequate conditions for rearing these infected insects in the laboratory are pursued.

O presente estudo teve como objetivo contribuir para o conhecimento sobre a interação parasita-vetor associada à infecção por Trypanosoma cruzi (Chagas, 1909) em Panstrongylus megistus (Burmeister, 1835), importante vetor da doença de Chagas no Brasil. A prevalência e a intensidade da infecção por T. cruzi, a incidência de metaciclogênese e a frequência de fenótipos nucleares presentes em túbulos de Malpighi foram investigadas em ninfas de P. megistus criadas à temperatura de 28 °C e submetidas a choque térmico por 1 hora a 40 °C, dois dias após alimentação em camundongos infectados com T. cruzi II (linhagem Y). A análise realizada 45 dias pós-infecção revelou que tanto nos insetos submetidos ao choque térmico como nos respectivos controles a frequência de epimastigotos se apresentava muito maior do que a dos tripomastigotos; a prevalência da infecção não foi alterada pelo choque térmico. Menos epimastigotos e tripomastigotos foram encontrados nos insetos submetidos ao choque térmico, indicando que a multiplicação e a metaciclogênese dos parasitas possam ser afetadas com o estresse. Nos espécimes infectados, o choque térmico induziu aumento na frequência de núcleos com descompactação da heterocromatina, uma resposta de sobrevivência celular ao estresse, e não afetou a sobrevivência propriamente dita do inseto. Os efeitos da infecção e do choque térmico, especialmente sobre a multiplicação e a metaciclogênese de T. cruzi, e a resistência ao choque térmico desenvolvidos pelas ninfas de P. megistus são indicativos de que devam ser considerados quando se buscam condições adequadas de criação em laboratório de insetos infectados.

Apoptotic ratios and mitotic abnormalities in 17-β-estradiol-transformed human breast epithelial MCF-10F cells / Índices apoptóticos e anormalidades mitóticas em células epiteliais mamárias humanas MCF-10F transformadas pelo 17-β-estradiol

Treatment of human breast epithelial cells MCF-10F with 17-β-estradiol has been reported to result in E2-transformed cells which have given rise to highly invasive C5 cells that in turn generate tumors in SCID mice. From these tumors, various cell lines, among which C5-A6-T6 and C5-A8-T8, were obtained. Although different phases of the tumorigenesis process in this model have been studied in molecular biology and image analysis assays, no cytological data on apoptotic ratios and mitotic abnormalities have been established to accompany the various steps leading to 17-β-estradiol-treated MCF-10F cells to tumorigenesis. Here we detected that the apoptotic ratio decreases with the transformation and tumorigenesis progress, except for the tumor cell line C5-A8-T8, probably on account of its more intense proliferation rate and a more rapid culture medium consumption. Increased frequency of mitotic abnormalities contributed by triple- and tetrapolar metaphases, and by lagging chromosomes and chromosome bridges observed at the anaphase found by transformation and tumorigenesis progress. However, no difference was found under these terms when the C5-A6-T6 and C5-A8-T8 tumor cell lines were compared to each other. Present findings are in agreement with the nuclear instability and enrichment of dysregulated genes in the apoptotic process promoted by transformation and tumorigenesis in 17-β-estradiol-treated MCF-10F cells.

O tratamento das células epiteliais mamárias humanas MCF-10F com 17-β-estradiol tem sido relatado como resultando nas células transformadas E2, que deram origem às células C5, altamente invasivas, e que geraram tumores em camundongos SCID. A partir desses tumores foram originadas em cultura células tumorais, dentre as quais C5-A6-T6 e C5-A8-T8. Embora diversas fases do processo tumorigênico neste modelo tenham sido estudadas por ensaios de biologia molecular e análise de imagem, não foram ainda estimados dados citológicos referentes a índices apoptóticos e anomalias mitóticas que acompanhassem os vários passos que levam as células CF-10F tratadas com 17-β-estradiol à tumorigênese. Neste trabalho detectamos que o índice apoptótico decresce com a transformação e o avanço da tumorigênese, exceto na linhagem celular tumoral C5-A8-T8, provavelmente por causa de sua velocidade de proliferação mais intensa, que poderia levá-la a um consumo mais rápido do meio de cultura presente e à morte celular. Um aumento na frequência de anomalias mitóticas contribuídas por metáfases tripolares e tetrapolares e por pontes cromossômicas e cromossomos desgarrados, identificáveis na anáfase, foi observado com a transformação e o progresso da tumorigênese. Contudo não foram detectadas diferenças nesses parâmetros quando se compararam as linhagens tumorais C5-A6-T6 e C5-A8-T8 entre si. Os presentes achados estão de acordo com a instabilidade nuclear e o enriquecimento em desregulação de genes que atuam no processo apoptótico, promovidos pela transformação e tumorigênese nas células MCF-10F tratadas com 17-β-estradiol.