Cell therapy in the treatment of bronchiolitis obliterans in a murine model / Terapia celular no tratamento da bronquiolite obliterante em modelo murino

OBJECTIVE: To evaluate the importance of stem cells derived from adipose tissue in reducing graft inflammation in a murine model of allogeneic heterotopic tracheal transplant. METHODS:We performed a heterotopic tracheal allografting in dorsal subcutaneous pouch and systemically injected 5x105 mesenchymal stem cells derived from adipose tissue. The animals were divided into two groups according to the time of sacrifice: T7 and T21. We also carried out histological analysis and digital morphometry. RESULTS:The T7 animals treated with cell therapy had median obstructed graft area of 0 versus 0.54 of controls (p = 0.635). The treated T21 subjects had median obstructed graft area of 0.25 versus 0 in controls (p = 0.041). CONCLUSION:The systemically injected cell therapy in experimental murine model of bronchiolitis obliterans did not reduce the severity of the allograft inflammation in a statistically significant way in seven days; Conversely, in 21 days, it increased the allograft inflammatory process.

OBJETIVO: Avaliar a importância das células-tronco derivadas de tecido adiposo na redução do processo inflamatório no enxerto em modelo murino de transplante traqueal heterotópico alogênico. MÉTODOS:Foi realizado alotransplante traqueal heterotópico em bolsa dorsal subcutânea e injetado 5x105 células-tronco mesenquimais, derivadas de tecido adiposo, sistemicamente. Os animais foram distribuídos em dois grupos, conforme o tempo de sacrifício: T7 e T21. Procedida a análise em HE e morfometria digital. RESULTADOS:Os T7 tratados com terapia celular apresentaram mediana de área obstruída do enxerto de 0 contra 0,54 dos controles (p=0,635). Os T21 tratados apresentaram mediana de área obstruída da luz do enxerto de 0,25 nos tratados e 0 nos controles (p=0,041). CONCLUSÃO: A terapia celular injetada sistemicamente em modelo experimental murino de bronquiolite obliterante não reduziu a gravidade do processo inflamatório no aloenxerto de forma estatisticamente significativa em sete dias; de modo contrário, em 21 dias, aumentou o processo inflamatório no aloenxerto.

Oxidative stress evaluation of ischemia and reperfusion in kidneys under various degrees of hypothermia in rats

PURPOSE:To design an animal model of ischemia-reperfusion (I/R) in kidneys and evaluate the role that predetermined ranges of local hypothermia plays on markers of stress-oxydative as well as on histologic sections. METHODS: Twenty eight male rats Wistar, under general anesthesia, undergone right nephrectomy (G0, control group) followed by left kidney ischemia during 40 min. Four temperatures groups were designed, with seven animals randomized for each group: normothermic (G1, ±37ºC), mild hypothermia (G2, 26ºC), moderate hypothermia (G3, 15ºC) and deep hypothermia (G4, 4ºC). Left kidney temperature was assessed with an intraparenchymal probe. Left nephrectomy was performed after 240 min of reperfusion. After I/R a blood sample was obtained for f2-IP. Half of each kidney was sent to pathological evaluation and half to analyze CAT, SOD, TBARS, NO3, NO2. RESULTS:Histopathology showed that all kidneys under I/R were significantly more injured than the G0 (p<0.001). TBARS had increased levels in all I/R groups compared with the G0 (p<0.001). CAT had a significant difference (p<0.03) between G1 and G4. Finally, no difference was found on SOD, NO3, NO2 nor on f2-IP. CONCLUSION: This model of I/R was efficient to produce oxidative-stress in the kidney, showing that 4ºC offered significant decrease in free radicals production, although tissue protection was not observed.

O modelo experimental de carcinogênese gástrica induzido por n-methyl-n-nitrosourea em ratos F344 e camundongos C3H é válido para os ratos Wistar? / Experimental model of gastric carcinogenesis with N-methyl-N-nitrosourea for F344 rats and C3H mices is valid for Wistar rats?

INTRODUÇÃO: O N-metil-N-nitrosourea (MNU) tem ação cancerígena direta, induzindo tumores em várias espécies em uma variedade de órgãos, incluindo o estômago de ratos. Tratamento do MNU na água de beber por 25-42 semanas, seletivamente, induz carcinoma gástrico glandular de ratos F344 e camundongos C3H. OBJETIVO: Estabelecer um modelo experimental para indução seletiva de câncer no estômago glandular de ratos Wistar com MNU. MÉTODOS: Um total de 48 ratos Wistar machos com oito semanas, foram utilizados no presente estudo. MNU (Sigma-Aldrich) foi dissolvido em DMSO e liberada água potável ad libitum por um período variando de 16 a 70 semanas. Após 16 semanas, quatro ratos foram selecionados aleatoriamente e mortos. Depois, de seis em seis semanas, quatro animais também foram mortos até 70 semanas. RESULTADOS: A taxa de sobrevivência foi superior a 90 por cento. Ocorreu a indução de dois adenocarcinomas, um carcinoma espinocelular e um sarcoma. A incidência de adenocarcinoma gástrico foi de 4,5 por cento (0,5 a 15). CONCLUSÕES: O modelo experimental de carcinogênese gástrica em ratos Wistar, utilizando MNU dissolvido na água, não mostrou viabilidade prática neste estudo, devido à baixa taxa de adenocarcinoma gástrico que ocorreu.

BACKGROUND: The N-methyl-N-nitrosourea (MNU) is a direct acting carcinogen, inducing tumors in several species in a variety of organs, including stomach of rats. Treatment of MNU in the drinking water for 25-42 weeks selectively induced glandular gastric carcinoma in F344 rats and C3H mice. AIM: To establish an experimental model for selective MNU induction of glandular stomach cancer in Wistar rats. METHODS: A total of 48 males eight-week-old Wistar rats were used in the present study. MNU (Sigma-Aldrich) was dissolved in DMSO and provided as the drinking water ad libitum for a period ranging from 16 to 70 weeks. After 16 weeks, four rats were randomly selected and killed. After every six weeks four animals were killed until 70 weeks. RESULTS: Survival rate was higher than 90 percent. It had the induction of two adenocarcinomas, one squamous cell carcinoma and one sarcoma. The incidence of gastric adenocarcinoma was 4.5 percent (0.5 to 15). CONCLUSIONS: The experimental model of gastric carcinogenesis in Wistar rats, using MNU dissolved in water, showed not practice viability in this study due to the low rate of gastric adenocarcinoma.

Experimental model of the formation of pelvic adhesions by videolaparoscopic in female rabbits / Modelo experimental de formação de aderências pélvicas por videolaparoscopia em coelhas

PURPOSE: To verify the frequency of postsurgical pelvic adhesion formation in an experimental animal model using videolaparoscopy. METHODS: Experimental study in a sample of 11 non-pregnant female rabbits, aged 5 to 7 months. After general anesthesia, access to the abdominal cavity was performed by an open puncture technique, with 10mm optics, placing two other 5 mm trochars under direct visualization, in the iliac fossae. Then a fragment of peritoneum was resected, followed by electrocauterization. In 21 days, the videolaparoscopy was repeated, and adhesion formation and score was looked at, with biopsies at the surgical site. RESULTS: 54 percent of adhesion formation was observed, and the median score of adhesions was 6 (minimum of 3 and maximum of 10), all of them found in the bladder and the anterior abdominal wall. CONCLUSION: The method used presents a high frequency of intra-abdominal adhesion formation.

OBJETIVO: Verificar a freqüência da formação de aderências pélvicas pós-cirúrgicas, em um modelo experimental animal, por videolaparoscopia. MÉTODOS: Estudo experimental, em uma amostra de 11 coelhas, não prenhas, com idade entre cinco e sete meses. Após anestesia geral, o acesso da cavidade abdominal foi efetuado por técnica de punção aberta, com óptica de 10 mm, colocando-se outros dois trocateres de 5 mm, sob visão direta, nas fossas ilíacas. Realizou-se, então, ressecção de fragmento de peritônio, seguida de cauterização com eletrocautério. Em 21 dias, foi repetida a videolaparoscopia, verificando-se a formação e escore de aderências e realizando-se biópsias do local da cirurgia. RESULTADOS: Observou-se 54,5 por cento de formação de aderências, sendo o escore total mediano de aderências seis (mínimo de três e máximo de 10), todas encontradas na bexiga e na parede abdominal anterior. CONCLUSÃO: O procedimento utilizado apresentou alta freqüência de formação de aderências intra-abdominais.

Anesthetic protocol for videolaparoscopic surgery in rabbits / Protocolo anestésico para cirurgia videolaparoscópica em coelhos

PURPOSE: To describe the anesthetic protocol and the intubation technique without visualizing the trachea in rabbits, in order to enable the videolaparoscopic surgical procedure. METHODS: The experiment was performed on 33 female rabbits (Oryctolagus cuniculus), aged from 5 to 7 months. It consisted of general anesthesia and endotracheal intubation by manual palpation of the trachea of the rabbits, without using the laryngoscope, orally, for later videolaparoscopic surgical access to the abdominal cavity. RESULTS: The mean values and standard deviation of vital parameters of the animals were 223.8±15.61 beats per minute for heart rate; 35±9 movements per minute for respiratory rate; 96.94±0.99 percent of oxymetry and 42.82±4.02 mmHg for capnometry; 16.7±4.3 minutes for pneumoperitoneum (duration of surgery) and 1 hour and 14±8.52 minutes for time of observation (from induction to recovery from anesthesia). All animals were intubated in at most three attempts. No animals were lost after the introduction of this anesthetic technique. CONCLUSION: This protocol proved adequate, safe and easy to perform, on rabbits submitted to videolaparoscopic surgery.

OBJETIVO: Descrever o protocolo anestésico e a técnica de intubação sem visualização da traqueia em coelhos, para viabilização de procedimento cirúrgico videolaparoscópico. MÉTODOS: O experimento foi realizado em 33 coelhas (Oryctolagus cuniculus), com idade entre 5 e 7 meses. Consistiu de anestesia geral e intubação endotraqueal por meio de palpação manual da traquéia das coelhas, sem o uso de laringoscópio, pela via oral, para posterior acesso cirúrgico videolaparoscópico da cavidade abdominal. RESULTADOS: Os valores médios e desvio padrão dos parâmetros vitais dos animais foram de 223,8±15,61 batimentos por minuto para freqüência cardíaca; 35±9 movimentos por minuto para frequência respiratória; 96,94±0,99 por cento de oximetria e 42,82±4,02 mmHg para capnometria; 16,7±4,3 minutos para o pneumoperitônio (tempo de cirurgia) e 1 hora e 14±8,52 minutos para o tempo de observação (desde a indução até a recuperação anestésica). Todos os animais foram intubados em, no máximo, três tentativas. Não houve perda de animais após a introdução dessa técnica anestésica. CONCLUSÃO: Este protocolo mostrou-se adequado, seguro e de fácil realização, para a aplicação em coelhos submetidos à cirurgia videolaparoscópica.

Considerações técnicas no treinamento de anastomoses microvasculares em laboratório de microcirurgia: [revisão] / Microvascular anastomosis in the laboratory - technical considerations: [review]

Anastomoses microvasculares são um procedimento cirúrgico complexo e um armamento essencial utilizado em diversas sub especialidades. A primeira etapa de treinamento em anastomose microcirúrgica deve ser sempre no laboratório. Este artigo é uma revisão sobre os fatores envolvidos no para a realização de anastomoses microvasculares. Instrumental cirúrgico, microscópio, estrutura do laboratório, procedimentos cirúrgicos, questões éticas e parâmetros radiológicos e histológicos são discutidos.