Leishmaniasis en el Ecuador: diagnóstico de la leishmaniasis cutánea con la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) en comparación con las técnicas convencionales / Leishmaniasis in Ecuador: diagnosis of the cutaneous leishmaniasis with relation in chain of the polymerase (PCR) in comparison with the conventional techniques

En este estudio se evaluó el diagnóstico de la leishmaniasis cutánea por el laboratorio mediante la técnica de la Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) en comparación con los métodos actualmente recomendados: examen microscópico en frotis, cultivo en medio específico e histopatología en biopsia. El estudio se realizó en 72 individuos con lesiones cutáneas sospechosas de infección por Leishmania spp., procedentes del cnatón El Carmen, provincia de Manabí, Ecuador. La PCR, con oligonucleótidos específicos para el complejo braziliensis fue más sensitiva (90.9 por ciento) que cualquiera de los otros 3 métodos empleados. el cultivo en medio Novy-MacNeal-Nicolle (NNN), en el que 19 por ciento de muestras de desecharon por contaminación bacteriana o micótica, alcanzó el 45.5 por ciento de sesitividad...

Identificación de las especies ecuatorianas de Leishmania por ELISA, utilizando anticuerpos monoclonales

Ciento veinte stocks de Leishmania, aislados de humanos, reservorios y vectores en 40 áreas diferentes de 13 provincias del Ecuador, fueron clasificados en 7 grupos por medio de la técnica de ELISA y 9 anticuerpos monoclonales específicos de especie. Ochenta y nueve de 125 aislamientos fueron identificados como L. (V) panamensis, 15 como L. (L) mexicana, 4 como L (L) amazonensis, 4 como L (V) brazilensis, 3 como L (L) major-like y 3 como L. (V) equatorensis. No se pudo determinar claramente la clasificación de 7 aislamientos.

Estudio comparativo entre el diagnóstico convencional y el basado en PCR de la leishmaniasis cutánea en el Ecuador

Reportamos aquí los resultados de un ensayo preliminar desarrollado en un área endémica de leishmaniasis cutánea del Ecuador. Se comparó el valor diagnóstico de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) específica para el complejo Leishmania (V) brazilensis con el de 3 métodos rutinariamente recomendados: examen microscópico de frotis dérmico teñido, cultivo in vitro de tejidos del paciente y examen histopatológico. El resultado de este ensayo demostró que PCR fue consistentemente más sensible que los otros 3 métodos usados ordinariamente. Los resultados de PCR fueron obtenidos mucho más rápidos que los de cultivo e histopatología. La sensibilidad del examen de frotis, que es simple, barato y convencional, alcanza solamente 37.5 por ciento...

Estudio sobre el tratamiento oral de la leishmaniasis cutánea con un derivado de la artemisina, al artesunato (Plasmotrim) en el Ecuador

Nuestro trabajo anterior reveló que las drogas antimaláricas, mefloquina (mephaquin) y artesunato (plasmotrim), son eficaces para la terapia oral de pacientes con leishmaniasis cutánea. A fin de determinar si estas drogas tienen efectos similares o diferentes es necesario desarrollar investigaciones más detalladas, basadas en casos adicionales de tratamiento, especialmente con el artesunato. Con este propósito, tratamos a 15 pacientes con leishmaniasis cutánea con artesunato. En el tratamiento se utilizó la siguiente dosificación: 1) para adultos con 45-59 kg de peso, y niños con más de 45 kg y/o mayores de 12 años, 100 mg de Plasmotrim (media tableta) después del desayuno y merienda por 10 días; y 2) para adultos...

Similaridad karyotipo de aislamientos de Leishmania de pacientes, flebotominos, y un perro doméstico, identificando la cepa L mexicana como el agente causal de la leishmaniasis cutánea en los Andes ecuatorianos

Los karyotipos DNA de Leishmania, aislados en 3 comunidades diferentes de los Andes ecuatorianos fueron examinados por electroforesis en gel agarosa de campo pulsado. La similaridad en el karyotipo fue detectada en 12 aislamientos; 4 aislamientos humanos y uno canino, aislados en Paute, 4 aislamientos y 1 de flebotomino aislados en Huigra, y 2 aislamientos de flebotominos en Alausí. Las distancias horizontales entre Paute y Alausí, y entre Alausí y Huigra, son de alrededor de 80 km y 20 km respectivamente. El patrón de banda de el DNA cromosómico de estos aislamientos, se caracterizó por una cadena cromosómica ordenada, especialmente por la presencia de 4 cromosomas de bajo peso molecular de 220, 250 y 325 kilobases...

Anticuerpos monoclonales específicos de especies desarrollados contra Leishmania (Viannia) equatorensis

Se obtuvieron anticuerpos monoclonales contra promastigotes de Leishmania (Viannia), que fue recientemente descrita como una nueva especie (Grimaldi et al., 1992) Ratones BALB/c fueron inmunizados con homogenados de L. (v) equatorensis (promastigotes) obtenidos de un cultivo in vitro de 10 días. La fusión de células esplénicas inmunizadas con células de mieloma P3-X63-Ag8,6.5.3 resultó en la producción de 6 anticuerpos monoclonales (AcMs) contra L. (v) equatorensis. Entre estos, 5, AcMs 9F4, 7H6, 3A7, 8C1 y 1G5 se revelaron como específicos contra L (v) equatorensis por medio de ELISA contra un panel cruzado de cepas de Leishmania. Estos AcMs constituirán, por tanto, un útil incremento para el panel de ancicuerpos...

Estudios de la composición de la fauna flebotomínica y su actividad de picadura al hombra en área endémica de leishmaniasis del Ecuador

Los aspectos biológicos de varias especies antropofilicas de flebotominos fueron examinados en dos áreas endémicas de leishmaniasis. En el sitio de estudio I (350m-600m sobre el nivel del mar) localizado en la estribación andina, se examinaron cuidadosamente la densidad de población, actividad de picadura e índice de infección natural con promastoigotes de Leishmania, y los resultados obtenidos fueron comparados con los de 1983, y 1991/1993. Los datos revelaron que hubo una gran diferencia entre los dos sitios de estudio (1983 y 1991/1993). En el sitio de estudio II (400m s.n.m), localizado en la cordillera de la región costera del Pacífico, la composición de especies y la actividad de picadura fueron examinadas...

Investigación sobre la infección natural de flebotominos, Lutzomya spp., con Leishmania en un área endémica, km 101, Provincia de Manabí, Ecuador

Seis especies antropofílicas de Lutzomya, Lu. gomezi, Lu hartmanni, Lu serrana, Lu. trapidoi, Lu shannoni y Lu. panamensis, fueron examinadas en busca de su infección natural con promastigotes de Leishmania, en un área endémica de esta enfermedad, Km 101 (vía Manta-Quevedo), Provincia de Manabí. Un total de 2,530 ejemplares fueron disecados, pero no se encontró infección natural. En el texto, el ciclo de transmisión de leishmaniasis en el área fue brevemente discutido.

Evaluación de ELISA en el diagnóstico de leishmaniasis en el Ecuador

El presente estudio fue diseñado para evaluar ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) como método diagnóstico para la leishmaniasis cutánea en el Ecuador. Se obtuvieron 95 sueros de los habitantes con lesiones cutáneas, en 3 áreas endémicas, San Plácido, Calceta y Junín, en la provincia de Manabí. En base a las manifestaciones químicas, se los dividió en 4 grupos; 11 tenían úlceras leishmaniásicas activas, 13 tenían cicatrices leishmaniásicas sin registro de tratamiento, 27 tenían lesiones leishmaniásicas y habían sido tratados, después de 1991, por nosotros, y 44 fueron considerados como no leishmaniásicos. Los sueros de estos individuos fueron sometidos a ELISA. Los antígenos para ELISA fueron preparados...

Investigación seroepidemiológica de la lepra en áreas endémicas de leishmaniasis cutánea en el Ecuador

Se realizaron exámenes serológicos para lepra en áreas endémicas de leishmaniasis cutánea, utilizando los sueros colectados durante un estudio de leishmaniasis y otras enfermedades parasitarias del Ecuador. No hubo correlación entre los índices de prevalencia de la lepra y los índices seropositivos de los anticuerpos (anticuerpos anti-PGL-I y LAM-B) en los individuos habitantes de algunas provincias de Ecuador. Los índices de positividad de los anticuerpos anti PGL-I de los pacientes leprosos y sus familiares en los Ranchos, provincia de Manabí, fueron relativamente altos (84.6 por ciento, 11/13), en comparación con los de los sujetos de otras áreas del Ecuador (42.2 por ciento, 154/365). Hemos sugerido que la investigación seroepidemiológica de los familiares de los pacientes leprosos podría ser útil...

Un estudio seroepidemiológico de los caninos en un área endémica de leishmaniasis andina en el Ecuador

Los perros domésticos son considerados como un hospedador reservorio importante de la leishmaniasis andina, al igual que los roedores silvestres en el Ecuador. Cincuenta y ocho perros domésticos en Alausí, una población de las tierras altas andinas del Ecuador, fueron examinados utilizando métodos serológicos y parasitológicos. diecinueve (32.8 por ciento) de los 58 perros, mostraron un valor de ELISA alto comparado con aquellos de control. Sin embargo, no se asiló parásitos de Leishmania en cultivos de aspirados de hígado de estos perros.

Un estudio preliminar de la leishmaniasis andina en Alausí y Huigra, Provincia de Chimborazo, Ecuador

Se reportan aquí casos autóctonos de leishmaniasis andina en las comunidades de Alausí y Huigra, a 2,300 m y 1,300 m sobre el nivel del mar respectivamente, en la provincia del Chimborazo en Ecuador. Cuatro pacientes con lesiones cutáneas activas positivas para Leishmania fueron examinados de 1991 a 1992. Estos pacientes no habían visitado otras áreas endémicas de Leishmania. Los parásitos aislados de sus lesiones fueron inoculados en hámsters y medios de cultivo, y el proceso de identificación se inició; sin embargo, L. mexicana ya ha sido reportada de Alausí, y se considera que debe ser la especie involucrada. Los promastigotes también fueron aislados de un flebotomio hembra (Lutzomya ayacuchensis). 23 (18.9 por ciento)...

Caracterización de cepas de Trypanosoma cruzi de Paraguay usando análisis con enzimas de restricción del ADN del Kinetoplasto / Annual Reports 1991 / Characteization of Trypanosoma cruzi isolates from Paraguay using restriction enzyme analysis of Kinetoplast DNA

Strains of Trypanosoma cruzi isolate in Paraguay from patients and vectors were examiqned by restriction endonuclease analysis of K-DNA using Eco RI, Hae III, Hinf I, Msp I. Four different types of schizodeme profiles were identified in 11 isolates. The firs group has much simpler profiles than ther groups. There were Homogeneous profiles in the 3 other gruops, however, the profiles could be distinguished from each other. Standard striansfrom Brasil, Chile and Colombia were included in the schizodeme comparison. The schizodeme profiles of group 1 from Paraguay can not be matched with any of the standard strains in this study. Those of group 3 and 4 shared more features with those of Brazilian standard strains (Brazilian Z2)

Un nuevo ensayo de aislamiento de leishmania de animales domésticos y silvestres en Ecuador

A fin de identificar los hospedadores reservorios animales en diferentes áreas endémicas de leishmaniasis humana, 194 animales domésticos y silvestres fueron examinados en busca de parásitos. Por el método de punción hepática, 14 (7,2 por ciento) del total, resultaron positivos con protozoarios. Una cepa de perro doméstico de los Andes fue identificada como L. pifanoi (más tarde identificada como Le. mexicana) (Tesh y Grimaldi, comunicación personal). Otras sin embargo, permanecen inidentificadas, en busca de un método preciso de caracterización, utilizando electroforesis de isoenzimas (Kreutzer, comunicación personal).

Reciente caracterización de leishmania aislada de humanos y animales de Ecuador, utilizando análisis de enzima de restricción del DNA del kinetoplasto

Se realizaron aislamientos de parásitos Leishmania de humanos y animales silvestres en focos endémicos de leishmaniasis del Ecuador. Después de varios pases de cultivos in vitro, los parásitos fueron examinados por medio de análisis de restricción de enzimas del DNA del kinetoplasto, conocido como schizodeme analysis. El DNA del kinetoplasto fue obtenido a partir de aislamientos ecuatorianos de Leishmania y digeridos con las endonucleasas de restricción MSp I y RSaI. De los resultados de patrones fragmentados, fueron identificados tres aislamientos obtenidos de tres especies de mamíferos silvestres. Sciurus vulgaris, Potos flavus y tamandúa tetradactyla fueron identificados como L. amazonensis. Los resultados fueron paralelos...

Respuestas de pruebas intradérmicas con antígeno parcialmente purificado obtenido de promastigotes de leishmania panamensis en la leishmaniasis cutánea activa

El presente estudio fue diseñado para evaluar los antígenos preparados a partir de promastigotes de Leishmania panamensis para evaluar el skin test en pacientes con leishmaniasis cutánea. El antígeno crudo preparado (CA) utilizado el sobredadante del centrifugado de homogenado de parásito a 10,000 xg. El extracto soluble fue luego sometido a 4 preparaciones, denominadas FA-1 a Fa-4, con la ayuda de un Sephacryl S-200 de filtración en gel. Los parásitos enteros (5x10 parásitos por examen) preparados en salina fenolizada, fueron utilizados como un antígeno para Montenegro (MA). El skin test intradérmico fue hecho en 17 pacientes con leishmaniasis cutánea activa causada por Le. braziliensis (complejo). El radio positivo...

Estrategias para la identificación de los flebotominos y los parásitos de leishmania infectantes, utilizando pruebas específicas de DNA para futuras investigaciones epidemiológicas utilizando una técnica de biología molecular en Ecuador y Paraguay

La utilización de pruebas específicas de DNA para detectar e identificar parásitos de Leishmania, al igual que especies de flebotominos, puede ser de gran utilidad incluso para el trabajo de campo, debido a la rápida y certera identificación de los vectores y los parásitos infectantes. Una serie de procedimientos para la preparación de las pruebas de DNA específicas para especies que pueden ser utilizadas en las investigaciones epidemiológicas del futuro sobre leishmaniasis en Ecuador y Paraguay, están brevemente sumarizadas en este texto.

Leishmania: aislamiento de leishmania de animales silvestres y domésticos

Con el objetivo de identificar a los animales reservorios de la leishmaniasis ecuatoriana en la costa y en la sierra, hemos examinado a 167 animales distribuidos en 17 especies de mamíferos, a través del cultivo in vitro e inoculación en animales de laboratorio (hámsters) de homogeneizados correspondientes a sus órganos internos (hígado y bazo). Tres individuos de tres diferentes especies. Potos flavus y Sciurus vulgaris de Palenque, Prov. de Los Ríos, y Tamandua tetradactyla de Echeandía, Prov. de Bolívar, resultaron positivos (con infección natural) con parásitos de leishmania. Las dos últimas especies son por primera vez incriminadas como reservorios de leishmania en el Ecuador. No se encontró infección natural...

Tipificación de stocks de leishmania utilizando anticuerpos monoclonales

Seis aislamientos de leishmania obtenidos de humanos y animales silvestres fueron identificados a nivel de subespecie, en base a su comportamiento frente a anticuerpos monoclonales específicos, mediante enlace con los mismos por radioinmuno ensayo. Tres stocks aislados de lesiones ulcerosas de seres humanos fueron identificados como L. braziliensis panamensis. Los organismos aislados de animales salvajes (Tamandua tetradactyla, Potos flavus y sciurus vulgaris) fueron todos identificados como L. mexicana amazonensis. De los resultados obtenidos se deduce que estas dos especies de leishmania están distribuidas en buena parte de las áreas endémicas de esta enfermedad en el estudio es el primer trabajo de tipificación...

Evaluación de la intradermo reacción y ELISA en el estudio epidemiológico de la leishmaniasis

El presente estudio fue diseñado para evaluar individual y comparativamente, la intradermo reacción y ELISA, como elementos de diagnóstico en el muestreo de la leishmaniasis cutánea y mucocutánea del Ecuador. El antígeno para la intradermo reacción fue preparado fragmentando promastigotes de L. braziliensis. Un estudio preliminar de intradermo reacción utilizando este antígeno, fue desarrollado en 63 individuos con lesiones dérmicas activas, junto a la prueba de ELISA. Los grados de positividad de ambas pruebas fueron significativamente altos en aquellos individuos cuyas lesiones fueron positivas para el parásito, demostrando alta sensibilidad y especificidad en los pacientes con leishmaniasis. Un estudio epidemiológico...