Suscetibilidade da linhagem de células Vero a cepas vacinais do vírus do sarampo / Susceptibility of Vero cell line to vaccine strains of the measles vírus

A suscetibilidade da linhagem de células Vero ao vírus do sarampo é bem conhecida e sua utilizaçäo no controle da potência da vacina contra o sarampo é amplamente difundida. Com o objetivo de comparar a suscetibilidade de células Vero empregadas em titulaçöes, amostras provenientes de dois laboratórios controladores (Vero IB e Vero INCQS), foram testadas frente a três cepas vacinais: Moraten Schwarz e Biken CAM-70. Foram titulados 72 lotes de vacinas contra o sarampo, sendo 25 produzidos com a cepa Moraten, 24 com a cepa Schwarz e 23 com a cepa Biken CAM-70. A análise estatística dos resultados obtidos nas titulaçöes, feita através dos testes Limites para uma Média e "t" de Student, mostrou que para as cepas Moraten e Biken CAM-70, as diferenças de títulos näo foram estatisticamente significantes, o mesmo näo ocorrendo com a cepa Schwarz, para a qual as células Vero IB se mostraram mais sensíveis

Identificaçäo de micoplasmas pela inibiçäo de crescimento de amostras isoladas de culturas celulares / Identification of mycoplasthe growth inhibition of samples isolated from cell cultures

As culturas celulares devem ser continuamente monitoradas quanto à presença de micoplasmas, pois, embora às vezes eles passem despercebidos, podem causar alteraçöes cromossômicas, interferir na replicaçäo viral, na produçäo de anticorpos e interferon. A Organizaçäo Internacional em Micoplasmologia (IOM) recomenda o isolamento e a identificaçäo de micoplasmas, visando detectar as prováveis origens da infecçäo e melhorar a qualidade das culturas. Assim, foram analisadas pela inibiçäo de crescimento, 37 amostras pertencentes a 27 linhagens celulares contaminadas por micoplasmas. Em nenhuma amostra foi observada a ocorrência de duas espécies. Foram identificados 18 (48,65%) Mycoplasma arginini, 15 (40,55%) Acholeplasma laidlawii, dois (5,40%) Mycoplasma orale, sendo que duas amostras (5,40%) näo foram identificadas. Considerando as espécies caracterizadas na pesquisa, os autores sugerem: a) a adoçäo do teste de isolamento de micoplasmas em caráter de rotina; b) o aprimoramento das técnicas de assepsia e desinfecçao; c) a eliminaçäo da pipetagem bucal; d) a utilizaçäo de soros e de outros componentes de meios de cultura de qualidade certificada; e) o questionamento da presença de micoplasmas quando linhagens celulares säo permutadas pelas instituiçöes; f) a avaliaçäo cautelosa de resultados obtidos quando se utilizam culturas infectadas por esse microrganismo

Micoplasma como contaminante de culturas celulares mantidas em laboratòrios de instituiçöes particulares e oficiais / Mycoplasma contamination of cell cultures maintained in laboratories of private, government and college institutions

Foi realizado estudo sobre a incidência de contaminaçäo por micoplasma em 29 tipos de linhagens celulares pertencentes a sete laboratòrios de instituiçöes particulares, oficiais e de ensino superior. Utilizando o método de cultivo direto e oito passagens seriadas em meios específicos, líquido e sòlido, verificou-se que, do total de 106 amostras, 48 apresentaram-se contaminadas por micoplasma (45,28%), o que constitui elevado índice de contaminaçäo. O fato indica que testes periòdicos para a determinaçäo da presença de micoplasma nas culturas em utilizaçäo é recomendável e que as culturas contaminadas devem ser eliminadas para evitar a disseminaçäo do microorganismo. Outras medidas preventivas devem ser adotadas, como a eliminaçäo da pipetagem bucal, execuçäo de técnicas assépticas mais estritas no manuseio das células, controle dos soros de origem animal, da tripsina e de outros componentes dos meios de cultura utilizados em cultura celular. O estudo mostrou que, ao invés das oito passagens seriadas propostas inicialmente, cinco foram suficientes para a detecçäo dos micoplasmas, o que representa economia de tempo e de materiais de custo elevado, reduzindo de 848 para 530 o número de passagens e a duraçäo do teste, de oito para cinco semanas .

Solucoes de sorbitol-gelatina e de acido glutamico-lactose na estabilizacao de preparacoes referencia do virus do sarampo / Sorbitol-gelatin and glutamic acid-lactose solutions as stabilizers of reference measles virus preparations

The study described in this article was carried out for the purpose of evaluating the protective effects of two stabilizing solutions- sorbitol-gelatin and glutamic acid-lactose- on freeze-dried measles virus (Schwartz strain) with a view to the production of reference preparations in working lots. The effect of storage at -20 C and -70 C on the potency of stabilized virus suspensions, whether or not freeze-dried, was evaluated over a period of 21 months; the samples were concurrently titered for potency with a standard virus obtained from a laboratory authorized by the World Health Organization. After comparing and commenting on the different phases of the study, the types of cells and stabilizing media used, how the suspensions were stored, the titering of the stabilized viruses, etc., the authors conclude that they have demostrated a more satisfactory stabilization (r= -0.01) of freeze-dried virus suspensions stored at -20 C by sorbitol-gelatin, which is therefore regarded as an effective stabilizer for the preparation of freeze-dried reference measles virus in working lots

Seringas hipodérmicas descartáveis versus reutilizáveis: estudo de possíveis efeitos sobre o vírus da vacina viva, atenuada contra o sarampo / Disposable vs. reusable hypodermic syringes: study of feasible effects upon the virus of the live, attenuated measles vaccine

Objetivou-se verificar entre seringas hipodérmicas descartáveis e reutilizáveis qual interfere mais com o vírus vivo presente na vacina contra o sarampo. Vacinas pertencentes a dois lotes foram reconstituídas com os dois tipos de seringas, de modo a formarem dois pools distintos, mantidos à temperatura de +2 a+8-C e protegidos da luz. De cada lote foram realizadas, no mínimo, seis titulaçöes em paralelo, com amostragem a cada hora, de zero a seis horas após reconstituiçäo. A análise estatística dos resultados obtidos nas titulaçöes, feita pelo sistema de retas de regressäo demonstrou que embora as vacinas manipuladas com ambos os tipos de seringas apresentassem um decréscimo de título estatisticamente significativo com o decorrer das horas, ele foi bem mais acentuado para as vacinas reconstituídas com seringas reutilizáveis. A menor interferência das descartáveis no título da vacina viva, atenuada contra o sarampo, demonstrou que a preconizaçäo e uso desse tipo de seringas pela Secretaria de Estado da Saúde de Säo Paulo é o ideal e recomendável, por preservar mais a vacina desde a reconstituiçäo até sua administraçäo e, conseqüentemente, a sua eficácia na prevençäo dessa infecçäo

Avaliaçäo das condiçöes de estocagem de vacinas vivas, atenuadas contra o sarampo, em postos de vacinaçäo credenciados e em centros de saúde do Estado de Säo Paulo (Brasil) / Evaluation of storage conditions of live, attenuated vaccines against measles, in authorized vaccination centers and health services of the State of Säo Paulo (Brazil)

Para avaliar as condiçöes de estocagem de vacinas vivas, atenuadas contra o sarampo, da rede de vacinaçäo do Estado de Säo Paulo (Brasil), foram visitados 71 Postos de Vacinaçäo Credenciados particulares (PVC), assim como 117 Centros de Saúde oficiais (CS), sobre os quais interessava saber a respeito da qualidade da estocagem a frio. Os parâmetros adotados foram: a) temperatura das geladeiras de uso (+2 a +8-C) e de estoque (< +8-C); b) validade do produto; c) título das vacinas conservadas nestas geladeiras, avaliado pela inoculaçäo de diluiçöes das amostras de vacinas em células Vero; d) proteçäo à luz. dos CS pesquisados, 85,33% apresentaram geladeiras com temperatura de acordo com a recomendada e 100% das vacinas neles estocadas com título e validade satisfatórios. Nos PVC foram encontrados, com maior frequência, lotes de vacina fora do prazo de validade (14,49%), com títulos abaixo do mínimo requerido (3,53%) e geladeiras de uso e de estoque com temperaturas inadequadas (33,80%). Necessário se faz que as condiçöes de estocagem das vacinas contra o sarampo (temperatura e proteçäo à luz), prevalentes no momento, sejam melhoradas e que as bulas passem a acompanhar o produto a eles entregue, para que os responsáveis pela vacinaçäo obedeçam as recomendaçöes do laboratório producto com relaçäo às condiçöes de estocagem, validade e administraçäo do imunobiológico, uma vez que a pesquisa revelou que estas näo säo observadas com o rigor necessário