Comparison of protocols for the extraction of genomic DNA from Sharpshooters (Hemiptera: Cicadellidae) for the detection of Xylella fastidiosa / Comparação de protocolos para a extração de DNA genômico de cigarrinhas (Hemiptera: Cicadellidae) para a detecção de Xylella fastidiosa

The bacterium Xylella fastidiosa, the causal agent of citrus variegated chlorosis (CVC), is dependent on vector insects for its spread and infection of citrus hosts. The insects, leafhoppers (Hemiptera: Cicadellidae) transmit the bacteria to healthy plants after feeding on infected plants. The objective of this study was to develop and compare methods for extracting genomic DNA from sharpshooters to detect X. fastidiosa. The DNA extraction from insects was performed according to a phenol-chloroform based DNA extraction in conjunction with two commercial kits, Dneasy® Plant Mini Kit and blood & tissue Dneasy® Handbook (Qiagen Inc., Valencia, CA, USA). The heads of the following species of sharpshooter were used: Dilobopterus costalimai, Acrogonia citrina, Oncometopia facialis, Bucephalogonia xanthophis, Macugonalia leucomelas and Homalodisca ignorata. Based on the numeric differences between independent samples, the results showed the use of the phenol:chloroform extraction method (36/50 positives) and the DNeasy® Plant Mini Kit (33/50) resulting in the most detections of X. fastidiosa from leafhopper samples. As these two methods detected Xylella in the greatest number of infected samples, they may be more efficient to use for detection purposes in leafhoppers.(AU)

A bactéria Xylella fastidiosa, agente causal da clorose variegada dos citros, é dependente da ação de insetos vetores para sua disseminação e infecção em plantas cítricas hospedeiras. Os insetos cigarrinhas (Hemiptera: Cicadellidae) transmitem a bactéria para plantas sadias depois de se alimentarem das plantas contaminadas. O objetivo deste trabalho foi desenvolver e comparar métodos de extração de DNA genômico de cigarrinhas a fim de detectar a bactéria X. fastidiosa. A extração de DNA foi realizada de acordo com protocolo à base de fenol-clorofórmio em conjunto com dois kits comerciais: Dneasy® Plant Mini Kit and Blood & Tissue Dneasy® Handbook (Qiagen Inc., Valencia, CA, USA). Utilizou-se a cabeça das seguintes espécies de cigarrinhas: D. costalimai, A. citrina, O. facialis, B. xanthophis, M. leucomelas e H. ignorata. Com base nas diferenças numéricas entre as amostras independentes, os resultados mostraram o uso do método de extração fenol-clorofórmio (36/50 positivos) e o kit comercial DNeasy® Plant Mini Kit (33/50) resultando nas maiores detecções de X. fastidiosa nas amostras de cigarrinhas. Como esses dois métodos detectaram a presença de X. fastidiosa no maior número de amostras infectadas, eles podem ser mais eficientes para o uso na detecção em cigarrinhas.(AU)

First Report of Citrus Aleurocanthus woglumi Ashby (Hemiptera: Aleyrodidae) in the State of Paraná, Brazil

The citrus blackfly Aleroucanthus woglumi Ashby, (Hemiptera Aleyrodidae) is an important pest that occurs in citrus groves, native to south-east Asia. In Brazil, according to the Ministry of Agriculture, this is a quarantine pest (A2) under official control IN 52, 2007 (MAPA) and is not widespread in the country. The insect can infest more than 300 host plants, including cultivated plants, ornamentals and weeds, but mostly occurs in the plants of the genus citrus. This paper is the first report of citrus blackfly in the State of Paraná.

Monitoramento populacional das cigarrinhas vetoras de Xylella fastidiosa, através de armadilhas adesivas amarelas em pomares comerciais de citros / Population monitoring of leafhopper vectors of Xylella fastidiosa, through yellow sticky traps in commercial citrus orchards

A Clorose variegada dos citros (CVC) é uma doença causada pela bactéria de xilema Xylella fastidiosa Wells. A disseminação ocorre por meio de insetos vetores pertencente à ordem Hemiptera, família Cicadellidae (subfamília Cicadellinae), os quais transmitem a bactéria depois de se alimentarem em plantas contaminadas. Neste trabalho, objetivou-se identificar e monitorar as espécies de cigarrinhas vetoras em um pomar comercial no município de Paranavaí, Paraná. O experimento foi realizado em um talhão comercial de laranja doce (Citrus sinensis (L.) Osbeck), variedade Pera, com 1.000 plantas de dez anos de idade. A amostragem foi realizada por meio de armadilhas adesivas amarelas, distribuídas na área periférica e central do pomar, com duas repetições por rua amostrada. As etiquetas foram distribuídas entre a 5ª e 30ª plantas em 10 ruas, totalizando 20 armadilhas que foram renovadas no pomar, a cada trinta dias, durante o período de avaliação que foi entre junho de 2005 e setembro de 2006. As principais espécies de Cicadellinae capturadas foram Acrogonia citrina Marucci & Cavichioli, Dilobopterus costalimai Young e Macugonalia cavifrons Stal. Essas espécies apresentaram ocorrência constante e frequência de 3,97 por cento, 4,2 por cento, 13,0 por cento respectivamente, em relação ao total de cigarrinhas coletadas.

Citrus variegated chlorosis (CVC) is the disease caused by the bacteria Xylella fastidiosa Wells. Dissemination occurs through insect vectors belonging to the order Hemiptera, family Cicadellidae (subfamily Cicadellinae), which transmit the bacteria after feeding on infected plants. The objective of this study was to identify the species of insect vectors in an orchard in the municipality of Paranavaí, in the State of Paraná. The experiment was conducted in a commercial stand of sweet orange (Citrus sinensis (L.) Osbeck), Pêra variety with 1,000 10-year-old plants. Monitoring was performed using yellow sticky traps, distributed in the central and peripheral areas of the orchard with two traps on each one. The stickers were distributed between the 5th and 30th plant in each 10 rows, totaling 20 traps in the orchard and renewed every thirty days during the evaluation period, which was between June 2005 and September 2006. The main species caught were Cicadellinae Acrogonia citrina Marucci & Cavichioli Dilobopterus costalimai Young and Macugonalia cavifrons Stal. These species occurred constantly, with frequencies of 3.97 percent, 4.2 percent, and 13.0 percent respectively, compared to the total leafhoppers collected.

Populational fluctuation of vectors of Xylella fastidiosa, wells in sweet orange [Citrus sinensis (L. ) Osbeck] varieties of northwest Paraná State, Brazil

The aim of the present study was to assess the population flutuation of the sharpshooters species subfamily Cicadellinae belonging to the tribes Cicadellini and Proconiini, in sweet orange [Citrus sinensis( L). Osbeck] commercial orchards of the northwest region of Paraná State , Brazil. Samplings were carried out the employing every time 24 yellow sticky cards. Identification of the species showed that the most representative were Dilobopterus costalimai of the Cicadellini tribe and Acrogonia citrina of the Proconiini tribe.

A Clorose variegada dos citros (CVC) é uma importante doença que ocorre nos citros, cujo agente causal é a bactéria Xylella fastidiosa, Wells. A bactéria depende, obrigatoriamente, de insetos vetores para sua disseminação, que são as cigarrinhas sugadoras do xilema (Hemiptera: Cicadellidae, Cicadellinae). No presente estudo objetivou-se avaliar a flutuação populacional de espécies de cigarrinhas nas diferentes variedades de laranja doce [Citrus sinensis (L.) Osbeck], Natal, Pêra, Valência e Folha Murcha, em um pomar comercial localizado na região Noroeste do Paraná, no período de janeiro de 2000 a dezembro de 2002. Amostragens quinzenais foram realizadas com o uso de armadilhas adesivas amarelas, num total de 24 armadilhas em cada avaliação. Após a identificação das espécies observou-se, que as mais representativas foram Dilobopterus costalimai da tribo Cicadellini e Acrogonia citrina da tribo Proconiini, sendo que a variedade de laranja Pêra apresentou o maior número de espécies vetoras durante os anos avaliados.