The conventional diagnosis challenge: Real-time PCR and nested PCR correlation with the scoring system for individuals at high-risk of Pneumocystis jirovecii pneumonia / Desafío diagnóstico: PCR anidada y en tiempo real frente a un sistema de puntuación en individuos con gran riesgo de neumonía por Pneumocystis jirovecii

Introduction. Pneumocystis jirovecii is an opportunistic fungus that affects mainly people living with HIV (CD4 cell count lower than 200 cells/ml) and other immunosuppressed patients. Since P. jirovecii does not grow on routine mycological media, diagnosis of P. jirovecii pneumonia relies on indirect evidence of its presence in respiratory samples. Objectives. To associate the results of direct immunofluorescence and two molecular methods with a score to predict P. jirovecii pneumonia in patients with AIDS. Materials and methods. A prospective study was conducted with 40 patients. A respiratory sample collected before treatment was subjected to direct immunofluorescence using the Merifluor kit, to nested PCR targeting the mitochondrial large subunit ribosomal RNA, and to the VIASURE real-time PCR kit. Results. These three techniques revealed P. jirovecii in 6, 12, and 15 samples, respectively. All positive samples by direct immunofluorescence were positive by nested PCR, and all positive samples by nested PCR amplified by real-time PCR. There was a statistically significant association between the P. jirovecii pneumonia score and the molecular methods. Two patients were early diagnosed and responded well to treatment. Conclusion. Molecular methods, especially real-time PCR, are recommended for early diagnosis of P. jirovecii pneumonia in AIDS patients.

Introducción. Pneumocystis jirovecii es un hongo oportunista que afecta principalmente a personas con HIV (recuento de CD4 menor de 200 células/ml) y a otros pacientes inmunosuprimidos. Como P. jirovecii no crece en los medios micológicos de rutina, el diagnóstico de neumonía por P. jirovecii se basa en la evidencia presente en muestras respiratorias. Objetivos. Asociar los resultados de la inmunofluorescencia directa y los de dos métodos moleculares con un puntaje para predecir la neumonía causada por P. jirovecii en pacientes con sida. Materiales y métodos. Se realizó un estudio prospectivo de 40 pacientes. Se recolectó una muestra respiratoria antes del inicio de tratamiento y se sometió a una prueba de inmunofluorescencia directa con el kit Merifluor, una PCR anidada para la amplificación de la subunidad larga del ribosoma mitocondrial y una PCR en tiempo real usando el kit VIASURE. Resultados. Estas tres técnicas evidenciaron la presencia de P. jirovecii en 6, 12 y 15 muestras, respectivamente. Todas las muestras positivas por inmunofluorescencia directa fueron positivas en la PCR anidada y todas las muestras positivas en la PCR anidada amplificaron por PCR en tiempo real. Se encontró una asociación estadística entre los valores de la neumonía causada por P. jirovecii y los métodos moleculares. Dos pacientes con diagnóstico temprano respondieron satisfactoriamente al tratamiento. Conclusión. Se recomiendan los métodos moleculares, especialmente la PCR en tiempo real, para el diagnóstico temprano de neumonía causada por P. jirovecii en pacientes con sida.

Investigação de surto de Histoplasmose pulmonar aguda entre bombeiros em Brazlândia, Distrito Federal, 2017 / Investigation of acute histoplasmosis outbreak among firefighters, Distrito Federal, 2017

Objetivos: Investigar o surto de histoplasmose em bombeiros no Distrito federal/DF, ocorrido em junho de 2017. Métodos: Realizou-se um estudo de coorte por meio das entrevistas realizadas com os bombeiros mediante um questionário semiestruturado. Considerou-se infectado o bombeiro que apresentou tomografia de tórax sugestiva de histoplasmose ou reagente nos testes de imunodifusão e/ou Western blot. Coletou-se amostra ambiental e realizou-se Nested PCR específico para Histoplasma capsulatum. Resultados: Entre 35 bombeiros, 94,3% eram homens; com a mediana de idade de 37 (24-45) anos, 28 foram classificados como infectados. A média de permanência dentro da caverna foi 25 minutos. O fator de risco associado à infecção foi o ato de entrar na caverna (RR=3,86; RA=71,6; p<0,02). Entre 14 amostras ambientais, 50% foram positivas para H. capsulatum. Conclusão: Confirmou-se o surto de histoplasmose de bombeiros em Brazlândia-DF, e foram tomadas ações como a interdição da caverna e o tratamento dos bombeiros.

Objectives: To nvestigate the outbreak of histoplasmosis in firefighters in Federal District/DF, which occurred in June 2017. Methods: A cohort study was conducted through interviews with firefighters by means of a semi-structured questionnaire. Firefighters who presented chest tomography suggestive of histoplasmosis or reacted to immunodiffusion and/or Western blot tests were considered infected. Environmental samples were collected and Nested PCR specific for Histoplasma capsulatum was performed. Results: Among 35 firefighters, 94.3% were men; with a median age of 37 (24-45) years, 28 were classified as infected. The average length of stay inside the cave was 25 minutes. The risk factor associated with infection was the act of entering the cave (RR = 3.86, RA = 71.6, p <0.02). Among 14 environmental samples, 50% were positive for H. capsulatum. Conclusion: The outbreak of histoplasmosis in firefighters in Brazlândia-DF was confirmed, and actions were taken such as banning the cave and treating the firefighters

Postpartum histoplasmosis in an HIV-negative woman: a case report and phylogenetic characterization by internal transcribed spacer region analysis

Abstract The present report describes the first case of postpartum disseminated histoplasmosis in a 24-year-old HIV-negative woman. On the tenth day after vaginal delivery, the patient presented with dyspnea, fever, hypotension, tachycardia, and painful hepatomegaly. Yeast-like Histoplasma capsulatum features were isolated in the buffy coat. The phylogenetic analysis demonstrated that the fungal isolate was similar to other H. capsulatum isolates identified in HIV patients from Ceará and Latin America. Thus, histoplasmosis development in individuals with transitory immunosuppression or during the period of immunological recovery should be carefully examined.

Molecular characterisation of Sporothrix schenckii isolates from humans and cats involved in the sporotrichosis epidemic in Rio de Janeiro, Brazil

An epidemic of sporotrichosis, a subcutaneous mycosis caused by the fungus Sporothrix schenckii, is ongoing in Rio de Janeiro, Brazil, in which cases of human infection are related to exposure to cats. In an attempt to demonstrate the zoonotic character of this epidemic using molecular methodology, we characterised by DNA-based typing methods 19 human and 25 animal S. schenckii isolates from the epidemic, as well as two control strains. To analyse the isolates, the random amplified polymorphic DNA (RAPD) technique was performed using three different primers, together with DNA fingerprinting using the minisatellite derived from the wild-type phage M13 core-sequence. The analyses generated amplicons with considerable polymorphism. Although isolates exhibited high levels of genetic relatedness, they could be clustered into 5-10 genotypes. The RAPD profiles of epidemic S. schenckii isolates could be distinguished from that of the United States isolate, displaying 20 percent similarity to each primer and 60 percent when amplified with the M13 primer. DNA fingerprinting of S. schenckii isolated from the nails (42.8 percent) and the oral cavities (66 percent) of cats were identical to related human samples, suggesting that there is a common infection source for animals and humans in this epidemic. It is clear that cats act as a vehicle for dissemination of S. schenckii.

Chronic disseminated histoplasmosis with lesions restricted to the mouth: case report

Reportamos um caso raro de histoplasmose crônica disseminada com diversas lesões ulceradas na cavidade oral de um paciente alcoólatra, sem o vírus da imunodeficiência humana, com nenhum outro sinal detectável ou sintomas de doença sistêmica ou manifestações extra-orais. Análise histopatológica revelou processo inflamatório crônico com granulomas contendo organismos fúngicos. O isolamento do Histoplasma capsulatum forneceu o diagnóstico definitivo. Tratamento com itraconazol resultou numa remissão completa das lesões orais. De acordo com nosso conhecimento, este é o segundo caso reportado de histoplasmose oral em um paciente HIV negativo descrito no Brasil.

Erythema nodosum: prospective study of 32 cases

O estudo de 32 casos de eritema nodoso permiti concluir que a rotina de investigacao e extremamente importante ja que em nosso estudo retrospectivo, o percentual de etiologia indeterminada foi de 69,4 (por cento) e neste prospectivo e de 21,8 (por cento). Em 10 casos (31,2 por cento) mais de um agente causal foi suspeitado.Infeccoes (bacteriana, helmintica, fungica e por protozoario) foram diagnosticados em 26 casos, tendo predominado a infeccao estreptococica com 12 casos. A associacao de eritema nodoso e histoplasmose capsulata e descrita pela primeira vez no Brasil. O eritema nodoso e sindrome complexa e deveria ser considerado sempre como manifestacao de doenca subjacente. A amostra de 32 pacientes exclusivamente do sexo feminino sendo que 26 em idade fertil sugere que varios processos (infeccoes e drogas) podem atuar em meio hormonal, particular e favorecedor, precipitando o quadro de eritema nodoso.

Gangrena de Fournier: a propósito de três casos / Fournier's gangrene: report of three cases

A gangrena de Fourier, descrita inicialmente por este autor em 1883, constitui uma condiçäo patológica relativamente rara em dias atuais, mas de elevada morbidade e taxa de mortalidade variando de 7 a 13 por cento. Säo apresentadas três casos desta doença, tratados no Serviço de Urologia do Hospital Universitário Gaffrée e Guinle da Universidade do Rio de Janeiro (UNI-RIO), em um lapso de tempo relativamente curto (entre julho de 1988 e março de 1989). Säo analisados os diferentes aspectos da doença, ressaltando os excelentes resultados obtidos com a terapêutica agressiva antibiótica e cirúrgica, instituída nos três casos