Development of an enzyme immunoassay for poliovirus antigens

An indirect solid-phase enzyme immunoassay (EIA) was developed for the detection of poliovirus antigen. Virus antigen was obtained in LLC-MK2 cell cultures and used to prepare antibodies in rabbit and guinea pig. Antibodies were evaluated by double immunodiffusion and neutralization test. Optimal concentrations of guinea pig and rabbit immunoglobulins were determined by checkerboard titration. Microtitre plates were coated with 15.0 µg/ml guinea pig anti-polio immunoglobulin and rabbit anti-polio immunoglobulin at the concentration of 7.94 µg/ml was used as detecting antibody. The standard curve with eight different antigen concentrations in eight replicates resulted in a coefficient of variation (CV) between 2.1 percent to 7.8 percent. The dose-response relationship was determined by simple linear regression with a coefficient of correlation (R²) equal to 96.4 percent. The assay detected a minimum of 2.3 µg/ml poliovirus antigen.

O trabalho apresenta o desenvolvimento de um ensaio imunoenzimático indireto para a detecção de antígeno de poliovírus. O antígeno viral foi obtido em cultura de células LLC-MK2 e usado para imunização de coelho e cobaia. Os soros hiperimunes foram avaliados por imunodifusão dupla e teste de neutralização. Após padronização, o soro de captura, produzido em cobaia, foi usado na concentração protéica de 15.0 µg/ml para sensibilizar microplacas de poliestireno e o soro de coelho (detector) foi usado na concentração de 7.94 µg/ml. A curva padrão resultante da utilização de oito diferentes concentrações do antígeno padrão definiu um coeficiente de variação de 2.1 por cento a 7.8 por cento. A relação dose-resposta foi determinada por regressão linear simples com o estabelecimento do coeficiente de correlação (R²) igual a 96.4 por cento. O ensaio possibilitou a detecção mínima de 2.3 µg/ml de antígeno de poliovírus.

Incidence of group A rotavirus in urban and rural areas of the city of Londrina-Brazil, from 1995 to 1997

Os rotavírus säo patógenos comuns e causam diarréia aguda em crianças e animais jovens. Neste trabalho avaliamos a participaçäo do vírus na diarréia de populaçäo humanas das áreas urbana e rural da cidade de Londrina, Paraná. Foram analisadas 905 amostras fecais de indivíduos com diarréia aguda, senso 686 e 219 amostras das zonas urbanas e rural, respectivamente. Trinta eoito amostras (4,2 por cento) foram consideradas positivas pelas técnicas de eletroforese em gel de poliacrilamida do RNA viral e aglutinaçäo passiva de látex, das quais 36 da área urbana e dois da área rural. Das amostras positivas, 17 foram genotipadas por RT-PCR tendo sido caracterizadas 16 cepas G1 e uma consideradas mistura dos gfenótipos G1 e G3

Cell propagation of rotavirus from feces of diarrheic piglets

O trabalho descreve o isolamento no Brasil de rotavírus em fezes de leitöes com diarréia provenientes de rebanhos da Regiäo Sudeste brasileira. Cinco amostras foram isoladas em culturas de células MA-104 a partir de 103 amostras examinadas, e apresentaram efeito citopático (CPE) característico em diferentes passagens e o antígeno viral foi detectado no citoplasma das células infectadas, por imunofluorescência (IF). A presença do rotavírus foi ainda monitorada por microscopia eletrônica (EM), eletroforese em gel de poliacrilamida (PAGE) e ensaio imunoenzimático (EIA)

Detection of rotaviral antigen by immunoprecipitation in agarose gel

Cento e setenta e seis amostras fecais diarreicas originárias de crianças abaixo de dois anos de idade, acometidas de diarréia aguda, foram estudadas quanto à presença de antígeno de rotavírus, pela técnica de imunoprecipitaçäo em gel de agarose. A especificidade da técnica foi confirmada atavés da observaçäo do material eluído, das linhas de precipitaçäo, através da microscopia eletrônica, por coloraçäo negativa. Destas amostras, 53,4% (94/176) foram positivas pela reaçäo de dupla-difusäo (DD) e 65,3% (115/176) pela reaçäo de contraimunoeletroforese (CIEOP). Esses resultados demonstraram a utilidade dos métodos para o estudo rotineiro do antígeno viral. A diferença na positividade dos métodos näo é estatisticamente significante (p> 0,1). Erro Padräo do Total. Sugerimos, portanto, que no método de DD pode ser usado em variadas condiçöes de laboratório por sua simplicidade e baixo custo operacional

Detection of astrovirus-like in diarrhoeic stool and its coexistence with rotavirus

É apresentado neste trabalho um caso clínico de diarréia aguda prolongada em uma criança subnutrida e desidratada de 5 meses de idade. O estudo virológico por microscopia eletrônica mostrou que a criança eliminava, pelas fezes aquosas, vírus semelhante, morfologicamente, ao astrovírus e rotavírus. A presença destes vírus foi observada 12 dias após o início da diarréia. A imunomicroscopia eletrônica realizada com o soro da criança mostrou agregados de ambos os vírus. Näo foram detectadas bactérias ou parasitas enteropatogênicos. Os Autores sugerem que este pode ser um caso de infecçäo mista de vírus semelhante ao astrovírus e rotavírus

Vaccinia virus-induced unsaturation of C18 fatty acids in vero cells

As alteraçöes na saturaçäo de ácidos graxos de dexoito carbonos de cultura de células foram estudadas após a infecçäo com o vírus Vaccinia. O estudo por cromatografia líquido-gasosa mostrou que o vírus produz uma relativa diminuiçäo na saturaçäo dos ácidos graxos C18. Este efeito foi observado 2 horas após a infecçäo com alta multiplicidade de infecçäo. As alteraçöes nas propriedades de membrana de células hospedeiras causadas pela dessaturaçäo de ácidos graxos, säo discutidas em termos de efeito citopático e permeabilidade celular