The effect of testosterone replacement on intramedullary, inguinal and visceral fat in ovariectomized rats / Efeito da reposição de testosterona na gordura intramedular, inguinal e visceral em ratas ovariectomizadas

Abstract Objective The present article aims to evaluate the impact of testosterone treatment on the expansion of visceral, subcutaneous and intramedullary adipose tissue of ovariectomized rats and the visceral and subcutaneous fat expression of peroxisome proliferator-activated receptors (PPARs) gamma. Methods In total 48 female Wistar rats were castrated and randomly divided into 6 treatment groups: group E2 was submitted to estradiol 5 μg/day; group T, to testosterone 5 μg/day; group E2+ T, to estradiol 5 μg/day + testosterone 5 μg/day; group TT, to testosterone 30 μg/day; group E2+ TT, to estradiol 5 μg/day+ testosterone 30 μg/day; and placebo was administered to group P. After 5 weeks, the rats were euthanized, the inguinal and visceral adipose tissues were harvested, weighted, and had their PPAR gamma expression evaluated by reverse transcription quantitative polymerase chain reaction (RTqPCR). The right femurs were harvested and histologically prepared to performthe number count of the intramedullary adipocytes. Results The expansion of visceral fat tissue was much higher in the TT group when compared with other treated groups (p < 0.001). The TT group also showed a higher expansion of inguinal fat (p < 0.01), and groups E2 +T and E2+ TT presented lower growth compared to the P group (p < 0.01). The number of femur intramedullary adipocytes only showed significant differences between groups TT and E2 + TT (p < 0.05). The expression of PPAR gamma showed no differences among the groups. Conclusion The use of testosterone in high doses leads to an important expansion in both visceral and inguinal adipose tissues. Association with estradiol exerts an expansion-repressive effect on the visceral and inguinal adipose tissues.

Resumo Objetivo Este artigo tem como objetivo avaliar o impacto do tratamento com testosterona na expansão dos tecidos adiposos visceral, subcutâneo e intramedular de ratas ovariectomizadas e a expressão de receptores ativados por proliferadores de peroxissoma (RAPPs) gama nas gorduras visceral e subcutânea. Métodos No total, 48 ratas Wistar foram castradas e divididas aleatoriamente em 6 grupos de tratamento: o grupo E2 recebeu estradiol 5 μg/dia; o grupo T, testosterona 5 μg/dia; o grupo E2 + T, estradiol 5 μg/dia + testosterona 5 μg/dia; o grupo TT, testosterona 30 μg/dia; o grupo E2 + TT, estradiol 5 μg/dia + testosterona 30 μg/dia; e o grupo P recebeu placebo. Após 5 semanas, as ratas foram submetidas a eutanásia, o tecido adiposo inguinal e visceral foi coletado, pesado, e se avaliou a expressão dos RAPP gama por reação em cadeia da polimerase via transcriptase reversa quantitativa (RCP-TRq). Os ossos do fêmur direito foram colhidos e processados histologicamente para contagem de números de adipócitos intramedulares. Resultados A expansão do tecido adiposo visceral foi muito maior no grupo TT quando comparado a outros grupos tratados (p < 0,001). O grupo TT também apresentou maior expansão da gordura inguinal (p < 0,01), e os grupos E2 +T e E2 + TT apresentaram menor crescimento em relação ao grupo P (p < 0,01). O número de adipócitos intramedulares no fêmur mostrou apenas diferenças significativas entre os grupos TT e E2 + TT (p < 0,05). A expressão de RAPP gama não mostrou diferenças entre os grupos. Conclusão O uso de testosterona emaltas doses leva a uma importante expansão nos tecidos adiposos visceral e inguinal. A associação com o estradiol exerce um efeito repressivo de expansão nos tecidos adiposos visceral e inguinal.

Effect of testosterone on proliferation markers and apoptosis in breasts of ovariectomized rats / Efeito da testosterona em marcadores de proliferação e apoptose em mamas de ratas ovariectomizadas

Abstract Objective To investigate the action of testosterone (T), isolated or associated with estradiol benzoate (EB), on the proliferation markers and apoptosis of breasts of ovariectomized rats. Methods A total of 48 castrated female Wistar rats were divided into 6 groups, and each of them were submitted to one of the following treatments for 5 weeks: 1) control; 2) EB 50 mcg/day + T 50 mcg/day; 3) T 50mcg/day; 4) EB 50 mcg +T 300 mcg/day; 5) T 300 mcg/day; and 6) EB 50 mcg/day. After the treatment, the mammary tissue was submitted to a histological analysis and immunoexpression evaluation of proliferation markers (proliferating cell nuclear antigen, PCNA) and apoptosis (caspase-3). Results There was a statistically significant difference among the groups regarding microcalcifications and secretory activity, with higher prevalence in the groups treated with EB. There was no difference among the groups regarding atrophy, but a higher prevalence of atrophy was found in the groups that received T versus those that received EB +T. There was a difference among the groups regarding the PCNA (p = 0.028), with higher expression in the group submitted to EB +T 300 mcg/day. Regarding caspase-3, there was no difference among the groups; however, in the group submitted to EB +T 300 mcg/day, the expression was higher than in the isolated T group. Conclusion Isolated T did not have a proliferative effect on the mammary tissue, contrary to EB. Testosterone in combination with EB may or may not decrease the proliferation, depending on the dose of T.

Resumo Objetivo Investigar a ação da testosterona (T) isolada ou associada ao benzoato de estradiol (EB) na proliferação e apoptose de mamas de ratas ovariectomizadas. Métodos Um total de 48 ratas Wistar castradas foram divididas em 6 grupos, e cada um foi submetido a um dos seguintes tratamentos durante 5 semanas: 1) controle; 2) BE 50 mcg/dia + T 50mcg/dia; 3) T 50 mcg/dia; 4) BE 50 mcg + T 300mcg/dia; e) T 300 mcg/dia; e f) BE 50 mcg/dia. Após o tratamento, o tecido mamário foi submetido a análise histológica e avaliação de imunoexpressão de marcadores de proliferação (antígeno nuclear de células proliferantes, PCNA) e apoptose (caspase-3). Resultados Houve diferença estatisticamente significante entre os grupos com relação às microcalcificações e à atividade secretora, com maior prevalência nos grupos tratados com BE. Não houve diferença entre os grupos quanto à atrofia, mas houve maior prevalência de atrofia nos grupos que receberam T versus os que receberam BE+ T. Houve diferença entre os grupos quanto ao ANCP (p= 0,028), com maior expressão no grupo BE+ T 300 mcg/dia. Com relação à caspase-3, não houve diferença entre os grupos, mas, no grupo BE+ T 300 mcg/dia, a expressão foi maior do que no grupo de T isolada. Conclusão A T isolada não apresentou efeito proliferativo do tecido mamário, contrariamente ao EB. A T em associação ao EB pode diminuir ou não a proliferação, a depender da dose de T.