Use of Propolis in Cancer Research.

Interest to develop new anticancer drugs and to design combination treatments with little or no secondary effects provides new scope for traditional phytochemicals in chemoprevention and therapy. Propolis is a known source of polyphenols, and flavonoids found in them have been widely studied as biochemical markers for botanical origin and in explaining their antioxidant capacity as a key factor in chemoprevention. Antimicrobial, anti-inflammatory and anticancer biological activities of propolis are known. Studies of cancer cells to measure the anticancer effect of propolis are designed with one carefully chosen component, and with extracts applied to cells in culture media. The antitumor effect of propolis and caffeic acid phenethyl ester (CAPE), bioactive compound of propolis extract, is seen to be associated with its ability to initiate apoptosis of cancer cells. Chrysin is a flavonoid of interest to identify signaling molecules related to cancer. As cancer cells develop multidrug resistance (MDR) during chemotherapy, this opens a new avenue of research on cellular mechanisms of propolis components in combined treatments designed to overcome MDR. ABBREVIATIONS: BRP;- Brazilian red propolis CA;- caffeic acid CAPE-; phenetyl caffeate COX;- cyclooxygenase COX-1;- cyclooxygenase-1 COX-2;- cyclooxygenase-2 EEP-; ethanolic extract of propolis GPE;- grape polyphenols HUVEC;- human umbilical vein endothelial cells IFNγ;- interferon γ IgG-; immunoglobulin IL-1β, IL-2, IL-6-; interleukin family, interleukin-2, interleukin-6 iNOS;- inducible nitric oxide synthase LPS;- lipopolysacharide MDR -; multidrug resistance MMPs;- metalloproteinases MoDCs-; monocyte-derived dendritic cells NADPH-oxidase;- nicotin adenin dinucleotide phosphate oxidase NF-kB-; nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B cells NO-; nitric oxide OSF-; oral submucous fibrosis RNS-; reactive nitrogen species ROS-; reactive oxygen species STAT3;- cytokine-activated transcription factor in Th17 TNBC-; triple negative breast cancer TNF-α-; tumor necrosis factor TRAIL-; tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand TSCCa-; tongue squamous cell carcinoma STAT 3-; signal transducer and activator of transcription 3 Th17-; T helper 17 cell UPLC–qTOF;-MS/MS;- ultra-performance liquid chromatography quadrupole time of flight mass spectrometry VEGF;- vascular endothelial growth factor.

Tratamientos analíticos de muestras de IFN alfa 2b h-rec, para su cuantificación por ELISA / Analyticaltreatments of rec-h alpha 2b interferon samples for their quantitation by ELISA

La obtención de interferón 2b humanos recombinante (IFN alfa 2b hr) en E. coli, en forma insoluble, hace necesario el estudio del ratamiento de las muestras para su cuantificación mediante un sistema inmunoenzimático tipo ELISA. De los sistemas analíticos ensayados para la extracción de proteina insoluble, el óptimo resultó una modificación del tapón L aemmli con un 1 % de SDS y 2,5 % de 2-merceptoetanol. Las proteinas de la cepa productora y la mayoría de los sistemas tampones empleados no influyeron sobre el reconocimiento inmunológico del interferón a diluciones mayores de 1/500

Control del proceso de purificación del factor de crecimiemto epidérmico humano recombinante (r-hEGF) mediante diferentes métodos analíticos / Control of the process of purification of the recombinant human epidermal growth factor with different analytical methods

Se aplicaron diferentes métodos analíticos al control del proceso de purificación del Factor de Crecimiento Epidérmico humano recombinante (r-hEGF). El radioinmunoensayo en fase liquida con anticuerpos policlonales permitió con sensibilidad de 0,5 ng/ml cuantificar la proteína durante el proceso de producción. Se demostró la factibilidad del uso de anticuerpos monoclonales en sistemas en solución y en fase sólida para sustitución de los anticuerpos policlonales. La separación con interacción hidrofóbica permitió la caracterización cromatográfica del r-hEGF evidenciando dos especies moleculares. Se estudió el comportamiento electroforético y se establecieron las condiciones óptimas para aplicar los sistemas elecforéticos en geles de poliacrilamida con dodecil sulfato de sodio (SDS-PAGE) como críterio de pureza del producto final

Purificación rápida de anticuerpos monoclonales empleando un gel TSK -butilo 650 (S) / Rapid purification of monoclonal antibodies using TSK -butil 650 (S) gel

Se evaluó la cromatografía hidrofóbica de alta resolución a nivel analítico como método alternativo en la purificación de anticuerpos monoclonales (AcM) anti interferón alfa 2b humano recombinante. Como soporte fue utilizado un gel TSK-butilo 650(S) de alta rigidez. Se optimizaron las condiciones de corrida para obtener la maxima pureza del AcM anti interferón alfa 2b recombinante CB-IFNA2.1. Resultó necesario modificar el gradiente de elución para purificar otros AcM del mismo isotipo y especificidad, evidenciándose que el gel de butilo muestra una capacidad adicional de diferenciación entre inmunoglobulinas del tipo IgG1. La eliminación de pasos de diálisis y de dasalinización, así como la alta pureza de los anticuerpos obtenidos son las principales características de la purificación utilizando este tipo de matriz