Detección de anticuerpos contra trypanosoma cruzi en Somoto, Nicaragua, medianta ELISA indirecto e IFI en muestras de sangre en papel de filtro / Trypanosoma cruzi antibody detection in eight rural communities of Somoto, Nicaragua, through indirect ELISA and indirect immunofluorescence in blood samples collected on filter paper

Se estandarizó un inmunoensayo enzimático en fase sólida (ELISA) para estudiar la presencia de anticuerpos contra Trypanosoma cruzi en personas asintomáticas que viven en un área endémica de enfermedad de Chagas en Nicaragua. El ensayo fue estandarizado para el análisis de muestras de sangre colectadas en papel de filtro como método simple de transporte de muestras de sangre. Se realizó un estudio previo en el que se estudiaron por ELISA 18 muestras de suero total y 18 eluidos de sangre de pacientes con enfermedad de Chagas crónica, 30 muestras de suero y 30 eluidos de sangre de personas sanas que se utilizaron como controles negativos y 14 muestras de suero y 14 eluidos de sangre de pacientes con leishmaniasis cutánea o visceral que se utilizaron para los estudios de reacciones cruzadas. Tanto con el suero total como con los eluidos de sangre, la prueba de ELISA proporcionó una sensibilidad de 100% y una especificidad de 90%; solo se observaron reacciones cruzadas con las muestras de pacientes con leishmaniasis visceral. El estudio poblacional incluyó a ocho comunidades rurales de Somoto, Nicaragua. Mediante un muestreo al azar se colectaron muestras de sangre en papel de filtro a 2 434 personas (1 335 del sexo masculino y 1 099 del sexo femenino) de las comunidades de Aguas Calientes, La Manzana, Los Canales, Santa Rosa, Las Playas, El Brocal, Santa Isabel y Santa Teresa. Las muestras fueron estudiadas por ELISA e inmunofluorescencia indirecta (IFI) encontrándose un total de 260 seropositivos por ELISA (10,7%), 207 de los cuales fueron también positivos por IFI (8,5%). La mayoría de los sueros seropositivos correspondieron a personas del sexo femenino con ambas técnicas, pero la diferencia entre hombres y mujeres no fue estadísticamente significativa. Los resultados obtenidos con ambas técnicas mostraron una excelente concordancia. Con respecto a la edad se observó una curva ascendente, con 5,4% de seropositivos por ELISA en individuos de 0­10 años y 42,7% en mayores de 50 años. La vasta mayoría de los individuos analizados fueron asintomáticos.

We standardized a solid-phase enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) in order to study the presence of Trypanosoma cruzi antibodies in asymptomatic persons who live in an area of Nicaragua endemic for Chagas' disease. The test was standardized to analyze filter-paper blood samples, which are easy to transport. In the first phase of our investigation, ELISA was used to study 18 samples of total serum and 18 eluates of blood from patients with chronic Chagas' disease; 30 samples of serum and 30 eluates of blood from healthy people, used as negative controls; and 14 samples of serum and 14 eluates of blood from patients with cutaneous or visceral leishmaniasis, which were used to study cross-reactions. Both with the total-serum and the blood-eluate samples, the ELISA test provided 100% sensitivity and 90% specificity. Cross-reactions in the patient samples were observed only with visceral leishmaniasis. The second phase of our investigation was a population study that included eight rural communities in the area of Somoto, Nicaragua. Through random sampling, filter-paper blood samples were collected from 2 434 people (1 335 men and 1 099 women) from the communities of Aguas Calientes, El Brocal, La Manzana, Las Playas, Los Canales, Santa Isabel, Santa Rosa, and Santa Teresa. Studied by ELISA and by indirect immunofluorescence (IIF), the samples included 260 found seropositive by ELISA (10.7%), of which 207 were positive according to IIF (8.5%). With both techniques, the majority of seropositives were among women, but the difference between men and women was not statistically significant. There was a high level of agreement between the results obtained with the two techniques. There was an upward trend with age, with 5.4% of those found seropositive by ELISA being persons 10 years of age or younger and 42.7% of those found seropositive being older than 50. The vast majority of the individuals analyzed were asymptomatic.

Respuesta inmune celular en enfermos con leishmaniasis atípica / Celular immune response in patients with atypical cutaneous leishmaniasis

Se estudió la respuesta inmune celular en 14 enfermos con leishmaniasis cutánea atípica (LCA), variante clínica reportada en Centroamérica, en particular en Honduras y Costa Rica en este año, en 16 enfermos con leishmaniasis cutánea localizada (LCL) y en 32 donantes de sangre en el Laboratorio de Inmunología del Centro Nacional de Diagnóstico y Referencia (CNDR) del MINSA, Managua, Nicaragua. Se estudió la cuantificación de los linfocitos T totales (CD3) y las subpoblaciones linfocitarias (CD4 y CD8) con anticuerpos monoclonales específicos por inmunofluorescencia indirecta. No se observaron diferencias significativas entre los valores de CD3 y CD4 entre los enfermos con LCA y los controles normales; sin embargo, sí un incremento significativo de las células CD8. Por otra parte, se observó una disminución significativa de los niveles de linfocitos CD3 y CD4 en los enfermos con LCL, no así de los niveles de CD8, en relación con los controles normales. Se observaron diferencias significativas de los niveles de las células CD3, CD4 y CD8 entre ambas formas clínicas de la enfermedad LCL y LCA. Se discute la importancia de la inmunodepresión de las células CD4 en la LCL y el posible comportamiento diferente de las células T en la LCA, con niveles normales de las células CD4 e incremento de la subpoblación citotóxica en una nueva variante clínica menos agresiva de la enfermedad

Evaluación de la respuesta inmune en enfermos con Leishmaniasis cutánea localizada en Nicaragua / Evaluation of the immune response in patients with cutaneous leishmaniasis located in Nicaragua

Se estudió la respuesta inmune en 16 enfermos con Leishmaniasis cutánea localizada (LCL) en fase crónica y activa de la enfermedad. Se observó que los niveles de IgG sérica de los enfermos se encuentran significativamente elevados en relación con los valores de referencia de los controles normales (p < 0,001), no así los niveles séricos de IgM, los niveles de inmunocomplejos circulantes y la actividad de la vía clásica del completamiento, que se mantienen dentro de los valores de referencia. Se observó inmunodeficiencia celular en los enfermos, caracterizada por la disminución significativa de los linfocitos CD3,CD4 y el índice CD4/CD8 (p < 0,001) en relación con los valores de referencia de los controles normales, se discute la importancia de estas alteraciones en la evaluación clínica de la enfermedad

Evaluación de la respuesta inmune en enfermos con leeishmaniasis cutáneas localizadas en Nicaragua

Se estudio la respuesta inmune en 16 enfermos con Leishmaniasis cutánea localizada (LCL) en fase crónica y activa de la enfermedad. Se observo que los niveles de IgG sérica de los enfermos se encuentran significativamente elevados en relación con los valores de referencia de los controles normales (P<0.001), no así los niveles séricos de IgH, los niveles de inmuno-complejo circulantes y la actividad de la vía clásica del complemento, que se mantienen dentro de los valores de referencia. Se observo inmunodeficiencia celular en los enfermos, caracterizada por la disminución significativa de los linfocitos CD3, CD4 y el índice CDH/CD8, los controles normales se discute la importancia de estas alteraciones en la evaluación de la enfermedad