Occurrence of subtilase cytotoxin and relation with other virulence factors in verocytotoxigenic Escherichia coli isolated from food and cattle in Argentina

We investigated the presence of the gene of subtilase cytotoxin (SubAB), described in certain highly virulent verocytotoxigenic E. coli strains, in isolates from Argentina and its relation with other virulence factors. The gene subA was present in eae-negative strains mostly associated with saa, vt2 and ehxA genes.

Molecular characterization of Verocytotoxigenic Escherichia coli O157: H7 isolates from Argentina by Multiple-Loci VNTR analysis (MLVA)

The aim of this work was to adapt described MLVA protocols to the molecular typing and characterization of VTEC O157:H7 isolates from Argentina. Nine VNTR loci were amplified by PCR showing diversity values from 0.49 to 0.73. Nine MLVA profiles were observed and the cluster analysis indicated both unrelated and closely related VTEC O157:H7 strains. In spite of the limited number of isolates studied, the panel of VNTR used made it possible to perform a first approach of the high genetic diversity of native strains of O157:H7 by MLVA.

Recommendations for the detection of Leptospira in urine by PCR

No presente estudo, a PCR foi utilizada para detectar leptospiras em urina humana. Diversas abordagens para processamento de amostra foram avaliadas para otimizar a detecção de leptospiras em urina misturada com esta bactéria. Além disso, algumas mudanças na composição da mistura de reação foram analisadas. Não se observou amplificação em urina ácida, conseqüentemente, a neutralização da amostra imediatamente após a coleta é fortemente recomendada. PBS apresentou melhores resultados que Tris ou NaOH como reagentes neutralizadores. Congelamento e descongelamento de amostras antes do processamento produziram resultados negativos. Eliminação de células epiteliais, leucócitos e cristais por centrifugação a 3.000rpm, à temperatura ambiente, aumentou a sensibilidade. Ademais, ambas, a etapa de lavagem após a coleta de leptospiras por centrifugação e a inclusão de albumina de soro bovino a 0,1 por cento na mistura de reação minimizaram a interferência de outros compostos inibidores. Essas modificações contribuíram para melhorar a detecção de Leptospira em urina através da PCR.

Escherichia coli enterohemorragica y sindrome uremico hemolitico en Argentina / Enterohemorrhagic escherichia coli and hemolytic-uremic syndrome in Argentina

El síndrome urémico hemolítico (SUH) es un desorden multisistémico caracterizado por presentar insuficiencia renal aguda, anemia hemolítica microangiopática y trobocitopenia. Constituye la principal causa de insuficiencia renal aguda y la segunda causa de insuficiencia renal crónica y de transplante renal en niños en la Argentina. Actualmente, nuestro país presenta el registro más alto de SUH en todo el mundo, con aproximadamente 420 casos nuevos declarados anualmente y una incidencia de 12.2/100 000 niños menores de 5 años de edad. Se reconocen múltiples agentes etiológicos, aunque se considera a la infección por Escherichia coli enterohemorrágica (EHEC) como la principal etiología de SUH. La gran mayoría de brotes epidémicos y casos esporádicos en humanos se han asociado con el serotipo 0157:H7, aunque otros serotipos han sido también aislados, y éstos son un subgrupo de E.coli verocitotoxigénico (VTEC). El bovino es considerado el principal reservario de VTEC. El contagio al hombre frecuentemente se debe al consumo de alimentos cárneos y lácteos contaminados, deficientemente cocidos o sin pasteurizar, o al contacto directo con los animales o con sus heces, consumo de agua, frutas o verduras contaminadas. También puede producirse contagio mediante el contacto interhumano.

Dístrés respiratorio debido a hemorragia pulmonar por leptospirosis / [Respiratory distress due to pulmonary hemorrhage in leptospirosis]

Two patients who lived in Buenos Aires suburbs died from leptospirosis in July 2000 and March 2001. They developed a nonspecific febrile illness followed by hemorrhagic pneumonia and respiratory distress in absence of typical manifestations such as jaundice, nephropathy, thrombocitopenia or hemorrhages in other organs. In the house and surroundings of one patient rodents were captured and three strains of leptospira, serogroup Icterohaemorrhagiae were isolated. Laboratory guinea pigs were inoculated and they were sacrificed as soon as respiratory symptoms appeared. Necropsy showed primary lung injury, which was similar to the histopathological lesions found in one of the patients. Neither jaundice, nor renal damage was found. Pericardiac hemorrhages were considered as a possible cause of cardiopulmonary collapse. This clinical form has not been reported previously in this region, where conditions are indeed suitable for the human illness to appear.

Differentiation of pathogenic and non-pathogenic leptospires by means of the polymerase chain reaction

Utilizou-se a reacao em cadeia da polimerase (PCR) para identificar leptospiras patogenicas isoladas, na Argentina, de animais e do homem. Foram usados dois pares de primers (G1/G2; B64-I/B64-II), descritos anteriormente como apropriados para amplificar amostras pertencentes aos diferentes sorogrupos de Leptospira interrogans. Atraves deste metodo nao se detectaram as leptospiras saprofitas (L. biflexa) isolados de agua e solo. Este fato representa uma vantagem uma vez que possibilita a diferenciacao de leptospiras patogenicas das nao patogenicas em culturas. A sensibilidade da prova foi determinada, verificando-se que ela permitiu detectar 10 leptospiras por tubo de reacao. Os tamanhos dos fragmentos amplificados foram de 285 ou 360 pares de bases (bp), dependendo da amostra patogenica estudada

Desarrollo de un ensayo de dot-blot para la detección de adhesinas en Escherichia coli enterotoxigéna / Dot-blot immunoenzymatic reaction to detec adhesins from enteropathogenic Escherichia coli

Un método de detección de adhesinas K99, K88 y F41 de Escherichia coli enterotoxigénica ha sido desarrollado sobre membranas de nitrocelulosa, basado en la reacción inmunoenzimática de dot-blot. Suspensiones estandarizadas de este microorganismo, portando distintos tipos de adhesinas fueron sembrados en el papel y enfrentados a anticuerpos-sonda de especificidad probada y posteriormente a un conjugado peoxidasa-antianticuerpo. La prueba mostró ser de alta sensibilidad y específica del tipo de adhesina, pudiendo emplearse como ensayo diagnóstico en la detección de esos factores de virulencia

Relación entre la evolución del ciclo vital de Trichinella spiralis y la detección de respuesta inmune / Relationship between the course of vital cycle of Trichinella spirallis and the detection of immune response

Un lote de ratas albinas Winster de ambos sexos, fue infestado por vía oral con 1.200-1.500 larvas de Trichinella spiralis. Dos animales fueron sangrados a blanco semanalmente procesando sus sueros en forma individual por técnicas de precipitación en tubos capilares, hemaglutinación pasiva, precipitación en medio gelosado y aglutinación, en la búsqueda de anticuerpos específicos a lo largo de 54 semanas, siendo un extracto salino crudo y pequeños fragmentos de larvas, los antígenos empleados. Paralelamente, se hicieron seguimientos de la localización de larvas en músculo estriado y su enquistamiento. La respuesta celular se siguió durante todo el plan de experimentación, por medio de ensayos de blastogénesis de linfocitos de ratas infestadas, mostrando ser muy débil al tiempo de la migración larval. De las pruebas serológicas efectuadas, la precipitación en tubos capilares y aglutinación mostraron ser más precoces en la detección de anticuerpos circulantes, aunque la hemaglutinación es la más sensible. La distinta especificidad de los anticuerpos participantes en estas reacciones tal vez justifiquen esas diferencias. Tanto la respuesta humoral como la celular parecen llegar tardíamente para oponerse a la masiva invasión larval

Detección suero bovino de anticuerpos no aglutinantes dirigidos hacia antígenos acultos de Brucella abortus cepa 19 / Detection in bovine serun of non-agglutinating antibodies to occult antigenos of Brucella abortus strain 19

Bovinos hembras de raza Hereford, inoculados con Brucella obortus cepa 19 en fase lisa, elaboraron anticuerpos no aglutinantes que se unieron específicamente a la cepa rugosa 45/20. Los sueros de estos animales, adsorbidos con B. abortus cepa 19 hasta eliminación de los anticuerpos dirigidos contra antígenos de superfície de la cepa lisa, mostraron contener una población no aglutinante de anticuerpos que se unieron a la cepa rugosa 45/20, siendo detectados mediante reacción de Cooms hasta un límite de 1,5 ug. Al margens de los anticuerpos incompletos producidos hacia antígenos externos de cepas lisas de B. abortus, se pone en evidencia este tipo de anticuerpos, con especificidad por antígenos más profundos que también estarían presentes en la superficie de la cepa rugosa. Estos anticuerpos, cuya participación en la depuración sanguínea y degradación del agente etiológico de la brucelosis bovina sería poco significativa, están siendo estudiados minuciosamente con el objeto de establecer la importancia que pudieran tener en el diagnóstico y pronóstico de brucelosis