Detection of the main multiresistant microorganisms in the environment of a teaching veterinary hospital in Brazil / Detecção dos principais microrganismos multirresistentes no ambiente de um hospital veterinário de ensino no Brasil

Contamination of the veterinary hospital environment with multiresistant pathogens endangers not only hospitalized animals, but also the workplace safety of veterinarians and nurses, animal guardians and, when in case of a teaching hospital, veterinary students. The objective of this study was to map the main points of bacterial contamination of a veterinary teaching hospital in Brazil to identify multiresistant microorganisms and their antimicrobial resistance genes. Samples were collected from 39 different locations of a veterinary school hospital which comprised a pool according to each hospital environment. In certain environments, more than one pool has been collected. All samples were collected in quadruplicates for the selective isolation of the main multiresistant microorganisms: methicillin-resistant Staphylococcus (MRS), vancomycin resistant Enterococcus (VRE), cephalosporinases and/or extended-spectrum beta-lactamase-producing Gram-negative bacteria (ESBL) and Carbapenemase-producing (CP). After isolation and identification of isolates, multiplex-PCR reactions were performed to detect the main genes for each microorganism and antimicrobial susceptibility tests with the main antibiotics used for each bacterial group according to CLSI. Of the 39 veterinary teaching hospital sites collected, all (100%) had at least one of the microorganisms surveyed, and 17.95% (n=7) of the sites were able to isolate the four pathogens. From the 94 pools collected, it was possible to isolate MRS in 81.91% (n=77), VRE in 12.77% (n=12), cephalosporinases and/or ESBL in 62.77% (n=59) and CP in 24.47%. (n=23). Regarding MRS, the mecA gene was detected in all isolates. All isolated VREs were identified as Enterococcus faecalis and presented the vanA gene. Regarding cephalosporinases and/or ESBL, 89.83% (n=53) of the isolates presented the blaTEM gene, 57.63% (n=34) the blaOXA-1 gene, 37.29% (n=22) blaCTX-M gene from some group (1, 2, 9 ou 8/25) and 20.34% (n=12) the blaSHV gene. It was possible to identify the main microorganisms responsible for causing nosocomial infections in humans (VRE, MRS, ESBL and CP) in the veterinary hospital environment, suggesting a source of infection for professionals and students of veterinary medicine, placing a high risk for public health.(AU)

A contaminação do ambiente hospitalar veterinário com patógenos multirresistentes coloca em perigo não apenas os animais hospitalizados, mas também a segurança no local de trabalho de veterinários e enfermeiros, responsáveis por animais e, quando se tratar de um hospital de ensino, estudantes de veterinária. O objetivo deste estudo foi mapear os principais pontos de contaminação bacteriana de um hospital veterinário de ensino no Brasil, identificando microorganismos multirresistentes e seus genes de resistência antimicrobiana. As amostras foram coletadas em 39 locais diferentes de um hospital de escola veterinária, que compreendia um pool de acordo com o ambiente de cada hospital. Em certos ambientes, mais de um pool foi coletado. Todas as amostras foram coletadas em quadruplicados para o isolamento seletivo dos principais microorganismos multirresistentes: Staphylococcus resistente à meticilina (MRS), Enterococcus resistente à vancomicina (VRE), bactérias Gram-negativas produtoras de cefalosporinases e/ou beta-lactamase de espectro estendido (ESBL) e produtoras de carbapenemase (PC). Após o isolamento e identificação dos isolados, foram realizadas reações de PCR multiplex para detectar os principais genes de cada microorganismo e testes de susceptibilidade a antimicrobianos com os principais antibióticos utilizados para cada grupo bacteriano de acordo com o CLSI. Dos 39 locais do VCH coletados, todos (100%) possuíam pelo menos um dos microrganismos pesquisados e 17,95% (n=7) dos locais foram capazes de isolar os quatro patógenos. Dos 94 pools coletados, foi possível isolar MRS em 81,91% (n=77), VRE em 12,77% (n=12), ESBL em 62,77% (n=59) e carbapenemases em 24,47% (n=23). Em relação ao MRS, o gene mecA foi detectado em todos os isolados. Todos os VREs isolados foram identificados como Enterococcus faecalis e apresentaram o gene vanA. Em relação às cefalosporinases e/ou ESBL, 89,83% (n=53) dos isolados apresentaram o gene blaTEM, 57,63% (n=34) o gene blaOXA-1, 37,29% (n=22) o gene blaCTX-M de algum grupo e 20,34% (n=12) o gene blaSHV. Foi possível identificar os principais microrganismos responsáveis por causar infecções nosocomiais em humanos (VRE, MRS, ESBL e CP) no ambiente hospitalar veterinário, sugerindo uma fonte de infecção para profissionais e estudantes de medicina veterinária, colocando alto risco para a saúde pública.(AU)

Detection of the main multiresistant microorganisms in the environment of a teaching veterinary hospital in Brazil

ABSTRACT: Contamination of the veterinary hospital environment with multiresistant pathogens endangers not only hospitalized animals, but also the workplace safety of veterinarians and nurses, animal guardians and, when in case of a teaching hospital, veterinary students. The objective of this study was to map the main points of bacterial contamination of a veterinary teaching hospital in Brazil to identify multiresistant microorganisms and their antimicrobial resistance genes. Samples were collected from 39 different locations of a veterinary school hospital which comprised a pool according to each hospital environment. In certain environments, more than one pool has been collected. All samples were collected in quadruplicates for the selective isolation of the main multiresistant microorganisms: methicillin-resistant Staphylococcus (MRS), vancomycin resistant Enterococcus (VRE), cephalosporinases and/or extended-spectrum beta-lactamase-producing Gram-negative bacteria (ESBL) and Carbapenemase-producing (CP). After isolation and identification of isolates, multiplex-PCR reactions were performed to detect the main genes for each microorganism and antimicrobial susceptibility tests with the main antibiotics used for each bacterial group according to CLSI. Of the 39 veterinary teaching hospital sites collected, all (100%) had at least one of the microorganisms surveyed, and 17.95% (n=7) of the sites were able to isolate the four pathogens. From the 94 pools collected, it was possible to isolate MRS in 81.91% (n=77), VRE in 12.77% (n=12), cephalosporinases and/or ESBL in 62.77% (n=59) and CP in 24.47%. (n=23). Regarding MRS, the mecA gene was detected in all isolates. All isolated VREs were identified as Enterococcus faecalis and presented the vanA gene. Regarding cephalosporinases and/or ESBL, 89.83% (n=53) of the isolates presented the blaTEM gene, 57.63% (n=34) the blaOXA-1 gene, 37.29% (n=22) blaCTX-M gene from some group (1, 2, 9 ou 8/25) and 20.34% (n=12) the blaSHV gene. It was possible to identify the main microorganisms responsible for causing nosocomial infections in humans (VRE, MRS, ESBL and CP) in the veterinary hospital environment, suggesting a source of infection for professionals and students of veterinary medicine, placing a high risk for public health.

RESUMO: A contaminação do ambiente hospitalar veterinário com patógenos multirresistentes coloca em perigo não apenas os animais hospitalizados, mas também a segurança no local de trabalho de veterinários e enfermeiros, responsáveis por animais e, quando se tratar de um hospital de ensino, estudantes de veterinária. O objetivo deste estudo foi mapear os principais pontos de contaminação bacteriana de um hospital veterinário de ensino no Brasil, identificando microorganismos multirresistentes e seus genes de resistência antimicrobiana. As amostras foram coletadas em 39 locais diferentes de um hospital de escola veterinária, que compreendia um pool de acordo com o ambiente de cada hospital. Em certos ambientes, mais de um pool foi coletado. Todas as amostras foram coletadas em quadruplicados para o isolamento seletivo dos principais microorganismos multirresistentes: Staphylococcus resistente à meticilina (MRS), Enterococcus resistente à vancomicina (VRE), bactérias Gram-negativas produtoras de cefalosporinases e/ou beta-lactamase de espectro estendido (ESBL) e produtoras de carbapenemase (PC). Após o isolamento e identificação dos isolados, foram realizadas reações de PCR multiplex para detectar os principais genes de cada microorganismo e testes de susceptibilidade a antimicrobianos com os principais antibióticos utilizados para cada grupo bacteriano de acordo com o CLSI. Dos 39 locais do VCH coletados, todos (100%) possuíam pelo menos um dos microrganismos pesquisados e 17,95% (n=7) dos locais foram capazes de isolar os quatro patógenos. Dos 94 pools coletados, foi possível isolar MRS em 81,91% (n=77), VRE em 12,77% (n=12), ESBL em 62,77% (n=59) e carbapenemases em 24,47% (n=23). Em relação ao MRS, o gene mecA foi detectado em todos os isolados. Todos os VREs isolados foram identificados como Enterococcus faecalis e apresentaram o gene vanA. Em relação às cefalosporinases e/ou ESBL, 89,83% (n=53) dos isolados apresentaram o gene blaTEM, 57,63% (n=34) o gene blaOXA-1, 37,29% (n=22) o gene blaCTX-M de algum grupo e 20,34% (n=12) o gene blaSHV. Foi possível identificar os principais microrganismos responsáveis por causar infecções nosocomiais em humanos (VRE, MRS, ESBL e CP) no ambiente hospitalar veterinário, sugerindo uma fonte de infecção para profissionais e estudantes de medicina veterinária, colocando alto risco para a saúde pública.

Caracterização de Staphylococcus aureus isolados da barra de mão de carrinhos e alças de cestas de supermercados / Characterization of Staphylococcus aureus Isolated of shopping carts hand bars and handles of handheld shopping baskets in supermarkets

Staphylococcus aureus é um dos agentes patogênicos mais notórios, sendo responsável por 45% das toxinfecções em todo o mundo. Um dos grandes problemas atuais é o desenvolvimento de cepas resistentes a antibióticos. Considerando a importância da disseminação desses micro-organismos na comunidade, o presente trabalho teve por objetivo determinar a presença de Staphylococcus aureus na barra de mão dos carrinhos e alças de cestas de supermercados da cidade de Campo Mourão - PR, e caracterizar a susceptibilidade dos isolados à oxacilina. Foram analisadas 120 amostras, sendo 60 coletadas das barras de mão de carrinhos e 60 coletadas das alças de cestas. Esse micro-organismo foi isolado em 75 amostras (62,5%), sendo que, desse total, 35 amostras (46,7%) foram isoladas de carrinhos e 40 (53,3%) de cestas de compras. As amostras positivas para Staphylococcus aureus foram submetidas aos testes de susceptibilidade, pelo método de disco-difusão, à oxacilina (cefoxitina) e todas as amostras foram consideradas sensíveis a essa droga. Constatou que as barras de mãos e as alças de cestas de supermercados, podem ser consideradas como fômites, na disseminação de Staphylococcus aureus, sendo de extrema importância a higienização desses objetos, a fim de diminuir os riscos de contaminação na comunidade.

Staphylococcus aureus is one of the most notorious pathogens, accounting for 45% of intoxications worldwide. One of the major problems today is the development of antibiotic-resistant strains. Considering the importance of dissemination of these microorganisms in the community, this study aimed to determine the presence of Staphylococcus aureus in shopping carts hand bars and handles of handheld shopping baskets in supermarkets from the city of Campo Mourão ­ PR, and characterize the susceptibility of isolates to oxacillin. One hundred twenty samples, of which 60 collected from bars hand stands and collected 60 of the handles of baskets. This micro-organism was isolated in 75 samples (62.5%), and of this total, 35 samples (46,7%) were isolated from carts and 40 (53,3%) of shopping baskets. The positive samples for Staphylococcus aureus were submitted to susceptibility testing by the disk diffusion method to oxacillin (cefoxitin) and all samples were found to be sensitive to this drug. It found that the bars of hands and the handles of supermarket baskets can be considered as fomites in the dissemination of Staphylococcus aureus, being extremely important to sanitization these objects in order to reduce the risk of contamination in the community.

Alta prevalência de crianças portadoras de Streptococcus pneumoniae resistentes à penicilina em creches públicas / High prevalence of children colonized with penicillin-resistant Streptococcus pneumoniae in public day-care centers

OBJETIVOS: Investigar a prevalência de Streptococcus pneumoniae (pneumococos) na nasofaringe de crianças sadias atendidas em creches municipais da cidade de Umuarama (PR). Avaliar a susceptibilidade aos antimicrobianos dos pneumococos isolados. MÉTODOS: Secreção da nasofaringe de 212 crianças foi coletada no período de abril a outubro de 2008. Após semeadura dos espécimes em ágar sangue e incubação a 37 °C por 24-48 horas, as colônias suspeitas de pertencerem a S. pneumoniae foram identificadas pela α-hemólise, sensibilidade à optoquina e bile solubilidade. A susceptibilidade à penicilina foi investigada pelos testes de disco-difusão e de diluição. A susceptibilidade aos demais antimicrobianos indicados no tratamento das infecções pneumocócicas foi realizada por disco-difusão RESULTADOS: A prevalência de pneumococos na nasofaringe foi de 43,4 por cento (92/212), sendo maior em crianças com idade entre 2 e 5 anos (p = 0,0005). Não houve diferença significativa entre os sexos. Resistência intermediária e resistência plena à penicilina foram encontradas respectivamente em 34,8 (32/92) e 22,8 por cento (21/92) dos isolados. Sessenta e sete amostras (72,8 por cento) foram resistentes ao sulfametoxazol-trimetoprim, oito (8,7 por cento) à eritromicina e seis (6,5 por cento) à tetraciclina. Uma amostra apresentou resistência à clindamicina (1,1 por cento), e outra ao cloranfenicol (1,1 por cento). Todas as amostras foram sensíveis a levofloxacina, ofloxacina, rifampicina, telitromicina, linezolide e vancomicina. Nove amostras foram consideradas multirresistentes, por apresentarem resistência a três ou mais classes de antimicrobianos. CONCLUSÕES: O presente estudo registrou uma alta prevalência de crianças portadoras sadias de amostras de S. pneumoniae resistentes à penicilina que podem constituir importantes reservatórios desse patógeno na comunidade.

OBJECTIVES: To investigate the prevalence of Streptococcus pneumoniae (pneumococci) in the nasopharynx of healthy children enrolled in public day-care centers of the municipality of Umuarama, state of Paraná, Brazil. The susceptibility of the pneumococcal strains to antimicrobial agents was also studied. METHODS: Nasopharyngeal specimens from 212 children were collected from April to October 2008. After the specimens were seeded in blood agar and incubated at 37 °C for 24-48 hours, the colonies suspected of belonging to S. pneumoniae were identified using α-hemolysis, optochin sensitivity, and bile solubility test. Penicillin susceptibility was investigated using the disk diffusion and dilution tests. Susceptibility to the other antimicrobial agents indicated for the treatment of pneumococcal infections was investigated using the disk diffusion test. RESULTS: The prevalence of nasopharyngeal pneumococci was 43.4 percent (92/212), with higher rates in children between 2 and 5 years old (p = 0.0005). There was no significant difference between sexes. Intermediate and full resistance to penicillin were found in 34.8 (32/92) and 22.8 percent (21/92) isolates, respectively. Sixty-seven strains (72.8 percent) were resistant to sulfamethoxazole-trimethoprim, eight (8.7 percent) were resistant to erythromycin, and six (6.5 percent) to tetracycline. One strain was resistant to clindamycin (1.1 percent) and another was resistant to chloramphenicol (1.1 percent). All strains were sensitive to levofloxacin, ofloxacin, rifampicin, telithromycin, linezolid, and vancomycin. Nine strains were considered multiresistant because they were resistant to three or more classes of antimicrobial agents. CONCLUSIONS: The present study detected a high prevalence of healthy children colonized with penicillin-resistant S. pneumoniae strains who may be important reservoirs of this pathogen in the community.