RESUMO
El objetivo de esta investigación fue identificar variantes en el exón 3 del gen miocilina (MYOC/TIGR) en pacientes peruanos con Glaucoma Primario de Ángulo Abierto (GPAA). Es en este exón del gen MYOC donde se encuentra la mayoría de mutaciones en pacientes con GPAA a nivel mundial. Material y métodos: Las muestras de ADN fueron obtenidas de 70 pacientes con GPAA y sus respectivos controles del Instituto Nacional de Oftalmología (INO) Lima-Perú, mediante técnicas estandarizadas. Dos fragmentos que comprenden el exón 3 del gen MYOC fueron amplificados por PCR y evaluados mediante Conformation Sensitive Gel Electrophoresis (CSGE) para identificar las variantes. Los segmentos con resultado positivo fueron secuenciados y sus cromatogramas analizados para identificar el cambio de frecuencia. Resultados: Dos pacientes diagnosticados con GPAA, presentaron cambios en la secuencia del exón 3 del gen MYOC. Un polimorfismo neutro denominado Thr325Thr y una nueva mutación Gly326Ser.Conclusiones: El polimorfismo neutro Thr325Thr es una de las muchas variaciones que se han reportado en estudios anteriores en el exón 3 del gen MYOC. Sin embargo la mutación Gly236Ser, aún no reportada en bases de datos, sugiere un rol importante en la función de la miocilina, convirtiéndola en una mutación casual de GPAA en el paciente analizado. El hallazgo de esta mutación permitirá el estudio de los miembros de la familia para un diagnóstico temprano y un manejo adecuado de la enfermedad.
The aim of this study was to identify variations in exon 3 of the myocilin gene (MYOC/TIGR) sequence in Peruvian primary open angle glaucoma (POAG) patients. This exon of the MYOC gene is where most of the mutations are located in POAG patients worldwide. Material and methods: DNA samples of 70 diagnosed POAG patients and controls were obtained from INO (Instituto Nacional de Oftalmología) following customary procedures. We amplified exon 3 of MYOC gene in two fragments by PCR. These products were evaluated with conformation sensitive gel electrophoresis (CSGE). Sequence variations found were sent for sequence analysis and chromatograms were read to identify nucleotide changes. Results: PCR products of two diagnosed POAG patients showed sequence changes in exon 3 of MYOC gene. One known neutral polymorfism Th325Thr and a novel mutation Gly326Ser, were detected. Conclusions: The Thr325Thr polymorfism, is a previously reported variation in exon 3 of the MYOC gene. However Gly236Ser mutation suggests an important rol in myocilin function, becoming a causal disease mutation of POAG in analyzed patients. Our finding of a novel mutation in MYOC/TIGR will contribute to study family members of the proband to make early diagnoses with regular clinical visits and effective treatment.