Detection of herpes simplex-1 and -2 and varicella zoster virus by quantitative real-time polymerase chain reaction in corneas from patients with bacterial keratitis / Detecção de vírus herpes simplex tipo 1 e 2 e varicella zoster por reação em cadeia de polimerase em tempo real em córneas de pacientes com ceratites bacterianas

ABSTRACT Objective: Bacterial keratitis occurs worldwide, and despite recent developments, it remains a potentially blinding condition. This study assesses the presence of herpes simplex virus (HSV-1 and -2) and varicella zoster virus (VZV) by quantitative real-time polymerase chain reaction (qPCR) in corneal scrapings from patients with bacterial keratitis. Methods: A total of 65 patients with clinical diagnoses of infectious corneal ulcers prospectively underwent clinical eye examinations. Corneal scrapings were investigated by Gram staining, Giemsa staining, culture, and qPCR (the study group). Risk factors and epidemiological data were recorded. The control group comprising 25 eyes with typical herpes dendritic keratitis was also analyzed by qPCR. Results: From the study group (n=65), nine patients (13.8%) had negative smears, cultures, and qPCR findings. Fifty-six (86.2%) patients had positive cultures: 51 for bacteria, 4 for fungi, and 1 for amoebae. Of the patients who had positive bacterial cultures, qPCR identified 10 patients who were also positive for virus: one for VZV and nine for HSV-1. Of the 25 patients in the control group, 21 tested positive for HSV-1 by qPCR analysis. Conclusions: Herpes may be present in patients with bacterial corneal ulcers, and qPCR may be useful in its detection.

RESUMO Objetivo: Ceratites bacterianas ocorrem mundialmente e apesar dos novos desenvolvimentos permanece como uma condição que pode levar à cegueira. Avaliar a presença de herpes simples (-1 e -2) e vírus varicella zoster (VZV) por reação em cadeia quantitativa de polimerase em tempo real (qPCR) em raspados corneanos de pacientes com ceratite bacteriana. Métodos: Sessenta e cinco pacientes com ceratite infecciosa foram submetidos a raspados corneanos estudados para gram, Giemsa, cultura e qPCR (grupo de estudo). Foram avaliados fatores de risco e epidemiológicos. O grupo controle foi composto por 25 casos de úlcera dendrítica típica por herpes analisados por qPCR. Resultados: Do grupo de estudo (n=65), nove pacientes (13,8%) apresentaram cultura, qPCR e raspado negativos. Cinquenta e seis (86,2%) pacientes apresentaram cultura positiva, 51 para bacteria, 4 para fungo e 1 para ameba. A qPCR identificou 10 pacientes do grupo de cultura positiva para bactéria que também foram positivos para vírus, um VZV e 9 para HSV-1. Dos 25 pacientes que compunham o grupo controle, 21 apresentaram qPCR positivo para HSV-1. Conclusão: Herpes pode estar presente em pacientes com úlceras de córnea bacterianas e a qPCR pode ser útil na sua detecção.

Identification of fungi species in the onychomycosis of institutionalized elderly / Identificação de espécies fúngicas nas onicomicoses do idoso institucionalizado

BACKGROUND: Superficial fungal infections are caused by dermatophytes, yeasts or filamentous fungi. They are correlated to the etiologic agent, the level of integrity of the host immune response, the site of the lesion and also the injured tissue. OBJECTIVE: The purpose of this study is to isolate and to identify onychomycosis agents in institutionalized elderly (60 years old +). METHODS: The identification of the fungi relied upon the combined results of mycological examination, culture isolation and micro cultures observation under light microscopy from nail and interdigital scales, which were collected from 35 elderly with a clinical suspicion of onychomycosis and a control group (9 elderly with healthy interdigital space and nails). Both groups were institutionalized in two nursing homes in Sao Bernardo do Campo, SP, Brazil. RESULTS: The nail scrapings showed 51.40% positivity. Of these, dermatophytes were found in 44.40% isolates, 27.78% identified as Trichophyton rubrum and 5.56% each as Trichophyton tonsurans, Trichophyton mentagrophytes and Microsporum gypseum. The second more conspicuous group showed 38.89% yeasts: 16.67% Candida guilliermondii, 11.11% Candida parapsilosis, 5.56% Candida glabrata, and 5.56% Trichosporon asahii. A third group displayed 16.70% filamentous fungi, like Fusarium sp, Aspergillus sp and Neoscytalidium sp (5.56% each). The interdigital scrapings presented a positivity rate of 14.29%. The agents were coincident with the fungi that caused the onychomycosis. In the control group, Candida guilliermondii was found at interdigital space in one person. CONCLUSION: Employing a combination of those identification methods, we found no difference between the etiology of the institutionalized elderly onychomycosis from that reported in the literature for the general population. .

FUNDAMENTOS: As infecções fúngicas superficiais se correlacionam com o agente etiológico, a resposta imune do hospedeiro, o local da lesão e o tecido lesado, sendo causadas por dermatófitos, leveduras ou fungos filamentosos. OBJETIVO: O objetivo é isolar e identificar os agentes das onicomicoses em idosos institucionalizados. MÉTODO: A identificação dos fungos baseou-se nos resultados combinados do exame micológico, isolamento em cultura e da observação de microculturas sob microscopia de luz, do material subungueal e escamas interdigitais, coletado de 35 idosos com suspeita clínica de onicomicose e de um grupo controle (9 idosos com espaço interdigital e unhas saudáveis). Ambos os grupos eram institucionalizados em duas casas de assistência em São Bernardo do Campo, SP, Brasil. RESULTADOS: As unhas raspadas apresentaram 51,40% de positividade. Os dermatófitos foram encontrados em 44,40% de isolados, sendo 27,78% identificados como Trichophyton rubrum e 5,56%, cada, como Trichophyton tonsurans, Trichophyton mentagrophytes e Microsporum gypseum. O segundo grupo mais frequente (38,89%) foi o de leveduras, identificadas como 16,67% Candida guilliermondii, 11,11% Candida parapsilosis, 5,56% Candida glabrata e 5,56% Trichosporon asahii. Um terceiro grupo exibia 16,70% fungos filamentosos, como Fusarium sp, Aspergillus sp e Neoscytalidium (5,56% de cada). Os raspados interdigitais exibiram positividade de 14,29%. Os agentes foram coincidentes com os fungos que causaram a onicomicose. No grupo controle, a Candida guilliermondii foi identificada no espaço interdigital em apenas uma pessoa. CONCLUSÃO: Empregando-se a combinação destes métodos de identificação, não houve diferença entre a etiologia da onicomicose ...